野生唐鱼在广东的再发现

唐鱼 (TanichthysalbonubesLin)又称白云金丝、白云山鱼 ,是我国特有的国家二级保护野生动物 ,在发现时个体数量已属稀少 ;近代仅分布于广州白云山及附近的山溪中 ;近 2 0年来 ,无野外发现该种的报道 ,被认为野生种群已经灭绝。作者在 2 0 0 3年 9月在广州的山溪中发现了该种的野生种群 ,并对该野生种群的形态、食性、生境、生长和繁殖做了初步研究 ,分析了致危因素 ,提出了保育措施。

乳清蛋白水解程度与抗菌能力的相关性

利用不同方式水解乳清蛋白,测量水解程度及水解物的抗菌能力并探讨二者的相关性。结果表明:一定程度的水解可使乳清蛋白产生明显的抗菌能力,抗菌能力的强弱与水解程度密切相关(胰蛋白酶水解程度小于12mg氨基酸/mL时呈正相关,r=0.9740;水解程度大于12mg/mL时呈负相关,r=-0.9468)。胰蛋白酶在不同水解条件下水解乳清蛋白时均存在一个最适水解程度(10～12mg/mL),在此范围内的水解物呈现最大的抑菌能力。而盐酸水解法无论在乳清蛋白水解液的抗菌能力或在抗菌能力的稳定性方面均明显差于酶水解法。本研究证明了适当水解(酶法水解时控制水解程度为10～12mg/mL)能够显著提高乳清蛋白的抗菌能力,可为利用乳清蛋白开发新型食品天然保鲜剂提供依据。

拟南芥血红蛋白1(AtGLB1)超量表达载体和RNAi表达载体的构建及转化

为研究拟南芥血红蛋白1基因(AtGLB1)的功能,将AtGLB1基因构建入超表达载体pMD和RNAi载体pZYI中,并采用花序浸染法将重组质粒转化拟南芥Columbia得到了转基因植株。对超表达株系和RNAi株系的纯合体进行Northern分析,结果表明:超量表达的拟南芥株系中AtGLB1的表达水平比野生型高很多,而表达被抑制的RNAi株系中几乎检测不到AtGLB1基因的表达。这些AtGLB1表达水平不同的拟南芥株系的获得可为该基因功能的后续研究以及在农业生产中的应用奠定一定基础。

海水提取龙须菜琼胶的碱处理条件优化

利用完全正交实验法对海水提取龙须菜琼胶工艺中的碱处理时间、温度及碱液浓度进行对比研究,通过对琼胶样品中的硫酸基含量、出胶率和凝胶强度的测定,分析不同碱处理条件对龙须菜琼胶产品质量的影响.实验结果表明,利用海水提取龙须菜琼胶的最佳碱处理条件:碱处理温度90℃,碱液浓度8%,碱处理时间60 min.此条件处理所得的龙须菜琼胶产品的平均凝胶强度比标准的琼胶样品的凝胶强度高69.08 g.cm-2.

逆境绿豆幼苗呼吸、活性氧及乙烯产生关系研究

低温和渗透胁迫条件下绿豆(Phaseolus radiatus)黄化幼苗的总呼吸、细胞色素途径呼吸及抗氰呼吸速率明显上升并在到达高峰后下降,乙烯的释放速率也呈现类似的变化.实验结果表明,低温和渗透胁迫下乙烯的产生对呼吸作用有一定程度的依赖性,并且与逆境诱导的超氧阴离子自由基的产生密切相关,低温和渗透胁迫诱导的超氧阴离子自由基对绿豆黄化幼苗的呼吸速率没有明显的影响,却与呼吸商的变化密切相关,表明超氧阴离子自由基不是通过改变呼吸速率,而是通过改变呼吸作用的底物类型或底物降解途径从而影响乙烯的产生.

不同条件下香蕉幼苗对环境羟自由基水平的影响

在人工可控环境中,以香蕉幼苗在不同光强、不同温度、不同酸碱度条件下光系统Ⅱ叶绿素荧光参数的变化衡量香蕉幼苗光合特性的变化,同时测量培养环境中羟自由基水平以评价植物生长对环境羟自由基水平的影响。结果显示:香蕉幼苗生长的环境中羟自由基水平明显高于没有植物生长的同样环境,表明植物的生长可提高环境的羟自由基水平。环境条件变化引起香蕉幼苗叶片光系统Ⅱ叶绿素荧光参数发生明显变化,高光强、极端温度和极端酸碱条件下的叶绿素荧光参数变化显示幼苗不同程度的光抑制,同时也伴随环境中羟自由基水平的升高,二者具有一定程度的相关性。本研究证明了大气中羟自由基水平受植物生长状态的影响,指出植物生长状态与环境中羟自由基水平的密切关系,为研究大气中羟自由基水平的演变机制提供了依据。

拟南芥血红蛋白1的亚细胞定位

为研究拟南芥的血红蛋白1(AtGLB1)基因的亚细胞定位,该实验构建了拟南芥血红蛋白1基因与绿色荧光蛋白基因融合的植物表达载体pUCGFP/AtGLB1.利用基因枪转化法将重组载体转入洋葱表皮细胞瞬时表达,通过检测融合蛋白在洋葱表皮细胞中的分布来确定拟南芥血红蛋白1在细胞中的定位.荧光显微镜检测结果表明,AtGLB1基因表达产物主要定位在细胞核中,少量定位在细胞质中.

盐度对碱煮法提取龙须菜琼胶主要质量指标的影响

探究碱煮法提取龙须菜琼胶时,盐度变化对提取龙须菜琼胶的出胶率、灰分含量和硫酸基含量等琼胶主要质量指标的影响,为优化利用海水提取龙须菜琼胶工艺提供依据.在提取琼胶的碱处理条件分别为高温低碱(90℃,8%NaOH)、中温中碱(60℃,12%NaOH)与室温高碱(25℃,20%NaOH)时,测量不同盐度下提取的琼胶样品的主要质量指标.结果显示:盐度变化在各种碱处理条件下对琼胶的出胶率、灰分含量与硫酸基含量均没有显著影响.提示利用海水代替淡水提取龙须菜琼胶的可行性,同时表明在海水提取龙须菜琼胶的工艺设计过程中无须特别关注水中的含盐量.

拟南芥血红蛋白1(AtGLB1)与过氧化氢的相互作用

拟南芥的血红蛋白1(AtGLB1)属于非共生的血红蛋白。在低氧胁迫中对植物细胞中过氧化氢(H2O2)内稳态的维持起了很重要的作用。为了检测AtGLB1与H2O2能否直接相互作用,我们扩增了拟南芥的AtGLB1基因,并将其克隆到原核表达质粒pET32a中,测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21。IPTG诱导目的蛋白表达后,镍离子亲和层析柱(Ni2+-NTA)纯化了靶蛋白。体外表达的氧合的AtGLB1能与H2O2直接相互作用。因此,与H2O2反应可能是AtGLB1清除低氧胁迫下产生的H2O2的一种方式。

戊二醛交联糖化酶的条件探索及协同实验教学分析

介绍了在生物工程实验中探索利用分组协同创新模式进行实验教学的成果。将一个教学自然班分成12个实验小组,每组同学3人。以可能影响实验结果的四个变量分解成四个独立又互相联系的实验,每个变量分别由三组学生负责研究,研究过程通过定期协调沟通对实验结果进行分析总结并不断优化实验设计,得出了优化实验工艺,同时也培养了学生独立思考和协作配合的精神。实验研究了戊二醛交联糖化酶的优化条件,考察了p H、戊二醛浓度、温度和时间四个变量对交联结果的影响。综合分析各实验小组的实验结果显示:酸性条件交联有利于酶活力及稳定性的保持;使用0.5%或更低的戊二醛浓度有利于酶活力的保持,但其稳定性提升不明显;较高温度下交联不利于酶活力的保持及稳定性的提升;随着交联时间的增加酶活力损失逐渐变大,但其使用稳定性却有所提升。

涡虫的采集和饲养

本文介绍涡虫采集和培养的便捷可行方法，并阐述了涡虫室内培养和管理的注意事项。

拟南芥血红蛋白3的亚细胞定位

拟南芥的血红蛋白3(AtGLB 3)属于截短的血红蛋白。与拟南芥血红蛋白1相比,拟南芥血红蛋白3具有不同的起源、不同的生化特性和结构;但其功能还不清楚。蛋白质的定位与蛋白质的功能息息相关。为深入研究该基因功能,构建了拟南芥血红蛋白3基因与绿色荧光蛋白融合的植物表达载体pUCGFP/AtGLB3。利用基因枪转化法将重组载体转入洋葱表皮细胞瞬时表达,通过检测融合蛋白在洋葱表皮细胞中的分布来确定拟南芥血红蛋白3在细胞中的定位。荧光显微镜检测结果表明,AtGLB3基因表达产物主要定位在细胞膜上。

拟南芥AtJ2基因植物超量表达载体的构建

在胁迫条件下,分子伴侣可以稳定蛋白质结构,防止蛋白质凝聚变性,并修复受伤害蛋白.J蛋白是一类重要的分子伴侣.AtJ2是拟南芥(Arabidopsis thaliana)J蛋白中的一种.为研究该基因的功能,提取了拟南芥幼苗的总RNA,经过RT-PCR获得了AtJ2的全长.并将其构建入表达载体pMD中,得到重组质粒pMD/AtJ2.通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)将此重组质粒转化入拟南芥,得到了转基因植株,为后续该基因的功能研究奠定基础.

应用型人才培养模式与生物工程专业实验教学体系的整合

基于应用型人才培养模式将生物工程类实验教学课程体系进行了整合。研究表明,这种生物工程大实验平台的模式为学科综合性设计性实验的开展打下了良好的基础,并为研究型创新型实验内容的凸显创造了有利的环境。阐述了培养模式与实验体系的构建,并分析了整合的重点和难点,强调了构建的特色。整合体系的建立在很大程度上提高生物工程专业办学水平,改进人才培养模式。

拟南芥AtJ2基因定位表达载体的构建

AtJ2是拟南芥中的一种分子伴侣,参与了许多重要的生命活动,但其具体的作用机制还不清楚。为进一步研究该蛋白的功能,我们构建了该基因的定位表达载体,拟对该基因在拟南芥中的定位进行研究。将该基因构建到带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒表达载体pB inGFP中,并将此重组质粒通过农杆菌介导转入拟南芥中,得到了转基因植株,为后续该基因的定位研究奠定基础。

D201大孔离子交换树脂固定糖化酶的研究

在单因素实验基础上,本文以D201大孔离子交换树脂为载体进行糖化酶的固定,以酶活回收率为评价指标,分析了固定化时间、料液比(酶与载体的比例)、给酶量等因素在糖化酶固定化中的影响。通过响应面法分析得到固定化最佳工艺为:固化时间27 min,料液比1:1,给酶量1800 U/g。此条件下的酶活回收率为60.66%,响应面优化结果验证良好。此外,通过稳定性检测发现:固定化糖化酶在常温下的半衰期为5天,低温4℃时保存较佳,操作稳定性较差。

光强对玉米幼苗光合特性及环境羟基自由基水平的影响

在条件可控的密闭培养室中培养玉米幼苗,改变温度、光强及水分等培养条件,动态测量玉米幼苗的光合作用指标以及培养室环境空气中的羟基自由基(.OH)水平.结果显示:在较低光照强度下,玉米幼苗叶片净光合速率(Pn)、最大光化学量子产量(Fv/Fm)、PSⅡ实际光化学量子产量(ΦPSⅡ)、光化学淬灭系数(qP)均随着光强的上升而上升.当光强增大到某一程度时,Pn、Fv/Fm、ΦPSⅡ及qP开始下降,显示高光强下玉米幼苗出现了一定程度的光抑制.无论正常生长条件或低温及渗透胁迫环境下,玉米幼苗生长的培养室空气中.OH水平均明显高于没有植物生长的对照培养室.光照强度没有达到引起光抑制出现的程度时,培养室环境中的.OH水平随光强的变化不明显;当光强上升到引起玉米幼苗出现光抑制时,环境.OH水平明显上升,并且随着光抑制程度的增加而升高.相关性分析表明,较低光照下环境.OH水平与玉米幼苗各项光合作用指标没有明显的相关性,但在光抑制情况下,环境.OH水平与光抑制程度密切相关,并与非光化学淬灭系数qN值呈明显正相关.研究结果为证明植物生长对环境.OH水平的影响提供了依据,同时表明处于光抑制状态比正常光合状态的玉米幼苗对环境中.OH水平的影响更加明显.