草棉花花瓣提取物对大鼠肝损伤的保护作用

目的:探讨草棉花花瓣采用不同工艺提取的黄酮类化合物即提取物Ⅰ(FGF-Ⅰ)和提取物Ⅱ(FGF-Ⅱ)对D-氨基半乳糖(D-GalN)引起的实验性肝损伤的保护作用并比较2种提取物的作用强度,对药物筛选提供依据。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(联苯双酯组,150 mg.kg-1)、FGF-Ⅰ大、小剂量组(50,25 mg.kg-1)和FGF-Ⅱ大、小剂量组(50,25 mg.kg-1)7个组,腹腔注射350 mg.kg-1的D-GalN造成急性肝损伤动物模型;观察2种提取物对血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性等的影响。结果:对D-GalN引起的肝损伤动物模型FGF-Ⅰ和FGF-Ⅱ均能降低血清ALT,AST活性(P<0.01);FGF-Ⅰ大、小剂量组能增加肝组织SOD活性(P<0.01),大剂量可以降低MDA含量(P<0.05),但是对GSH-PX活性没有影响;FGF-Ⅱ大、小剂量组可以增加肝脏SOD,GSH-PX活性(P<0.05)并可以降低MDA含量(P<0.05)。结论:FGF-Ⅰ和FGF-Ⅱ均有一定的保肝作用,FGF-Ⅱ的作用优于FGF-Ⅰ。

提高大型仪器分析实验课教学效果初探

仪器分析是药学类专业的一门重要的专业基础课,笔者针对目前大型仪器分析实验教学中存在的问题,提出了几点针对实验课改革方面的建议,希望有助于仪器分析实验更好的开展。

草棉花总黄酮对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的: 研究草棉花花瓣不同提取物FGF Ⅰ、FGF -Ⅱ对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)造成免疫性肝损伤动物模型,观察本品对小鼠血清ALT、AST 活性及肝组织匀浆SOD、MDA、GSH PX、NO水平的影响,并观察肝组织病理学改变。结果: FGF -Ⅱ可明显降低小鼠血清中ALT、AST活性,同时能减少肝匀浆MDA、NO含量,并能使降低的肝匀浆SOD、GSH PX活性升高。FGF -Ⅱ小剂量可使肝脏脏器系数降低。FGF -Ⅰ不同剂量可以降低ALT活性,但不能降低AST活性,大剂量可降低MDA含量,而对肝组织匀浆其它指标FGF- Ⅰ不同剂量均没有作用。结论: FGF -Ⅱ有明显的保肝作用,FGF- Ⅰ虽有一定的保肝作用,但效果不如FGF- Ⅱ。

代谢组学在消化系统肿瘤中的应用进展

代谢组学是系统生物学的主要分支,可对生物系统内源性代谢物进行全面的定性、定量分析。用核磁共振光谱和高效液相色谱、质谱等技术可以对细胞、组织或体液进行代谢产物检测。代谢组学在肿瘤研究方面已被广泛应用,包括癌症的早期检测、诊断,药物作用的预测,药效标记。消化道肿瘤是恶性肿瘤中最常见的一组肿瘤,发病率和病死率均较高。该文主要探讨代谢组学在消化系统肿瘤中的应用及前景。

维吾尔医异常黑胆型哮喘大鼠模型的心电图变化分析

目的观察维吾尔医异常黑胆质型哮喘大鼠模型的心电图变化规律。方法选用55只SD大鼠,随机分为健康对照组、哮喘组、异常黑胆质证组和异常黑胆质型哮喘组4组;模型制备成功后用心电记录仪记录不同组别大鼠的心电图,并测量P波时限、P-R间期、QRS时限、Q-T间期等心电图指标,同时记录不同组别大鼠的体质量变化情况。结果异常黑胆质证组和异常黑胆质型哮喘组的体质量增长率明显低于健康对照组和哮喘组。异常黑胆质证组和异常黑胆质型哮喘组大鼠心电图的P波时限、Q-T间期明显延长,与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);异常黑胆质型哮喘组大鼠心电图P-R间期延长,与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);但是异常黑胆质证组大鼠P-R间期没有发生变化,与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);各组大鼠QRS时限均没有发生变化,与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。单纯的哮喘组大鼠心电图参数没有发生变化,与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论异常黑胆质证导致模型大鼠心电图显著改变,证候刺激造成心肌缺血的可能性较大。

草棉花花瓣不同提取物对实验性肝损伤小鼠的保护作用

目的:研究草棉花花瓣采用不同工艺提取的产物提取物Ⅰ和提取物Ⅱ(FGF-Ⅰ、FGF-Ⅱ)对扑热息痛引起的实验性肝损伤是否有保护作用。方法:选用昆明种小鼠,采用腹腔注射扑热息痛的方法造成肝损伤动物模型;观察FGF-Ⅰ和FGF-Ⅱ对血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平的影响。结果:FGF-Ⅰ和FGF-Ⅱ对小鼠血清ALT、AST活性均有降低作用。FGF-Ⅰ对肝组织SOD、GSH-PX活性没有影响,但可以降低肝组织MDA含量。FGF-Ⅱ可以增加肝组织SOD活性、降低MDA含量、增加GSH-PX活性。结论:FGF-Ⅰ和FGF-Ⅱ均有一定的保肝作用,但是FGF-Ⅱ作用优于FGF-Ⅰ。

维药鹰嘴豆中总黄酮的超声提取工艺研究

目的确定鹰嘴豆中总黄酮的优选超声提取工艺。方法采用正交实验法,考察溶剂量,提取次数,超声时间,溶剂浓度对提取率的影响,用分光光度标准曲线法测定含量。结果所考察的因素中,鹰嘴豆总黄酮的提取影响程度为:溶剂浓度>提取次数>溶剂量>超声时间。结论超声提取的最佳条件为:A1B3C3D3。

异常黑胆质证2型糖尿病大鼠模型的血浆代谢组学研究

目的建立与分析2型糖尿病(T2DM)维吾尔医异常黒胆质证大鼠模型血浆代谢组学变化特点。方法建立T2DM维吾尔医异常黑胆质证大鼠模型并采集血浆样本,测试核磁共振氢谱,对数据进行多变量分析。结果单纯的异常黑胆质证组大鼠血浆中葡萄糖和乳酸含量下降的同时VLDL、LDL和肉碱的含量明显增加(P<0.05);病证结合的T2DM维吾尔医异常黑胆质证组大鼠血浆中多种氨基酸(丙氨酸、异亮氨酸、、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甲基组氨酸、甘氨酸)以及乳酸、丙酮酸、糖蛋白、柠檬酸、肌酸酐、β-羟丁酸、乙酰乙酸、乙酸、肌酸、肉碱、鲨肌醇、VLDL、LDL的含量均降低,而葡萄糖和牛磺酸含量明显增加(P<0.05)。结论蛋白质代谢、苯丙氨酸和酪氨酸代谢通路、糖酵解通路和脂代谢通路在病证结合的T2DM维吾尔医异常黑胆质证模型大鼠体内发生了明显的变化;血浆代谢组学变化在一定程度上反映病证结合的T2DM维吾尔医异常黑胆质证大鼠模型体内发生的病理变化过程。

核磁共振技术测试不同性别大鼠尿液代谢物的研究

采用核磁共振波谱技术测试不同性别大鼠尿液代谢物,分析性别因素对大鼠尿液代谢成分的影响.大鼠尿液核磁共振氢谱(1HNMR谱)结果采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal to partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)方法分析,得到不同性别大鼠尿液中的差异性代谢物.PCA分析结果显示2组尿液代谢成分有明显的差异,进一步进行OPLS-DA分析可以判别出2组尿液中具有差异性的代谢物.结果显示,雌性大鼠尿液中的丙氨酸、缬氨酸、鸟氨酸等氨基酸类以及乙酸、硫胺、氨基马尿酸、苯乙胺、氧氨嘧啶等代谢物含量高于雄性大鼠,差异有统计学意义(p<0.05).雄性大鼠尿液中的甲胺、二甲胺、三甲胺、肌酸酐、尿囊素、延胡索酸、甲酸等代谢物则明显高于雌性大鼠,差异有统计学意义(p<0.05).性别因素对大鼠尿液中的代谢成分有一定的影响.

紫外分光光度法测定维药鹰嘴豆中总黄酮的含量

目的建立鹰嘴豆中总黄酮含量测定方法。方法紫外分光光度法。结果方法重现性好,操作简便,平均加样回收率为95.5%,RSD为1.45%。结论该实验方法可控制质量。

中药复方颗粒对D-半乳糖致衰老模型小鼠尿液的核磁共振氢谱代谢组学研究

目的采用基于核磁共振氢谱(hydrogen-nuclear magnetic resonance, ~1H-NMR)的代谢组学研究方法探讨一种中药复方颗粒对D-半乳糖致衰老模型小鼠尿液代谢的影响。方法昆明小鼠48只,雄性,随机分为正常对照组、衰老模型组、阳性对照组、中药复方颗粒低、中、高剂量给药组;采用D-半乳糖致小鼠衰老模型,用中药复方颗粒进行药物干预,各组小鼠末次给药后收集24h内的尿液进行~1H-NMR检测,随后采用偏最小二乘法-判别式分析(partialleastsquares-discriminantanalysis,PLS-DA)及正交偏最小二乘法-判别式分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis, OPLS-DA)的方法对6组小鼠尿液代谢物进行模式识别分析并构建相应的代谢通路。结果代谢组学分析发现小鼠尿液中有超低密度脂蛋白(very low-densitylipoprotein,VLDL)、异亮氨酸、亮氨酸、乳酸、丙氨酸、胆碱、蛋氨酸、丙酮酸、琥珀酸、α-酮戊二酸、柠檬酸、二甲胺、三甲胺、牛磺酸、甘氨酸、肌酸、尿囊素、尿素、马尿酸、甲酸等20个差异代谢物;以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成,牛磺酸和亚牛磺酸代谢,乙醛酸和二羧酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,柠檬酸循环(TCA循环),丙酮酸代谢,半胱氨酸和蛋氨酸代谢等7个相关代谢通路。结论 D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的能量代谢、氨基酸代谢和炎症反应相关通路紊乱,而中药复方颗粒对其紊乱有一定的改善作用。

链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠模型的脾脏代谢特征研究

目的探讨2型糖尿病发生时体内主要的免疫脏器之一脾脏的代谢功能变化过程。方法 20只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=9)和2型糖尿病组(n=11),采用链脲佐菌素诱导制备2型糖尿病大鼠模型,取其脾脏组织并低温提取甲醇水提取液,进行核磁共振检测,对脾脏组织代谢轮廓的变化进行分析。结果多元统计分析结果显示,与正常对照组比较,2型糖尿病组大鼠脾脏提取液中β-羟基异丁酸、牛磺酸、α-葡萄糖、脯氨酸、β-葡萄糖、胆碱含量明显升高,同时亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、赖氨酸、乙酸、谷氨酰胺、蛋氨酸、谷氨酸、肉碱、甲胺、天冬氨酸、肌酸、乙醇胺、酪氨酸、组氨酸,苏氨酸,苯丙氨酸含量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 2型糖尿病模型大鼠脾脏组织中多种代谢物成分发生了明显的变化,这些代谢物的变化机制及其参与的代谢通路可能与2型糖尿病发生、发展过程的免疫损伤密切相关。

不同程度的哮喘患者血浆氨基酸代谢组学特征的比较研究

目的探讨不同严重程度(轻度、中度、重度)哮喘患者血浆氨基酸代谢组学的特征。方法收集符合支气管哮喘诊断标准的哮喘患者(轻度哮喘组、中度哮喘组、重度哮喘组各25例)和健康对照组30例。采用超高效液相联用质谱法(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometer,UPLC-MS)检测轻度、中度、重度哮喘组和健康对照组血浆氨基酸代谢物含量的特征。结果与健康对照组比较,轻度哮喘组中的甘氨酸、丝氨酸、缬氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、天门冬氨酸、甲硫氨酸和苯丙氨酸含量降低,差异有统计学意义(P<0.05);与健康对照组比较,中度哮喘组中的甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、丝氨酸、缬氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、天门冬氨酸、甲硫氨酸和苯丙氨酸含量降低,差异有统计学意义(P<0.05);与健康对照组比较,重度哮喘组中的甘氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸含量降低,丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸含量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同程度哮喘组中,代谢产物的变化趋势有一定的相似性与差异,可将代谢组学运用到寻找不同程度的哮喘疾病相关特异性代谢产物之间的共性与差异性;不同程度哮喘组中,重度哮喘代谢产物的紊乱程度最明显,表明代谢产物的变化可能是判断哮喘严重程度的依据。

二乙基亚硝胺诱导的肝癌模型大鼠尿液代谢组学研究

目的应用核磁共振检测法(~1H-NMR)对大鼠尿液小分子代谢标志物及其参与的代谢通路进行分析。方法通过饮用质量浓度为0.1 mg·mL^(-1)的二乙基亚硝胺溶液(DEN)造肝癌大鼠模型,同时用饮用灭菌水的大鼠作为正常对照组,18周后采集尿样并进行核磁共振检测,在显微镜下对肝组织进行观察对比。结果模型组大鼠尿液中异亮氨酸、乳酸、丙氨酸、醋酸盐、糖蛋白、丙酮酸盐、琥珀酸盐、α-酮戊二酸、苯丙氨酸和甲酸盐10种代谢物的含量显著降低;而柠檬酸、二甲基亚硝酸、肌酸、牛磺酸和肌酸酐5种代谢产物的含量显著增加。采用MetaboAnalyst 3.0对差异性代谢物进行分析,发现共有4种代谢通路发生了明显变化。结论通过对大鼠尿液代谢物进行检测分析,为肝癌提供早期诊断依据。

基于~1H-NMR的干寒性气质失调证糖尿病大鼠肝组织代谢变化研究

目的:观察干寒性气质失调证糖尿病模型大鼠肝脏组织的代谢变化。方法:对模型肝脏组织进行核磁共振检测,并对其代谢轮廓变化进行分析。结果:与健康组比较,干寒性气质失调证大鼠肝组织中β-羟基丁酸、肌酸、氧化三甲胺、苏氨酸和胆碱等代谢物含量明显升高,而乳酸、肌酸肝、葡萄糖和肌醇等含量明显降低;干寒性气质失调糖尿病大鼠肝组织中β-羟基丁酸、肌酸、肌醇和葡萄糖等含量明显升高,但异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、乳酸、丙氨酸、鸟氨酸、瓜氨酸、蛋氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、α-酮戊二酸、乙酰天冬氨酸、甲胺、肌氨酸、肌酸肝、组氨酸、色氨酸、甘氨酸、苏氨酸、胆碱、酪氨酸、苯丙氨酸、烟酸和马尿酸等含量均明显降低。结论:干寒性气质失调证的发生伴随有多种能量代谢的变化。

铁线蕨总黄酮对哮喘大鼠模型及其尿液代谢物的影响

目的探讨铁线蕨总黄酮(TXJF)对哮喘模型大鼠及其尿液代谢物的影响。方法选取60只健康雄性SD大鼠,采用OVA致敏及雾化吸入方法,建立哮喘大鼠模型,随机分为正常对照组,阳性对照组(醋酸地塞米松),哮喘模型组,铁线蕨总黄酮(TXJF)组(高、中、低剂量)各组10只,TXJF组以TXJF进行灌胃给药,检测各组大鼠肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞数目及分类,肺组织病理形态学改变,测定血清免疫球蛋白E(IgE),从而进行模型的评价及观察TXJF对哮喘模型大鼠的影响。收集大鼠尿液,利用核磁共振波普(1 H-NMR)技术检测氢谱,从而建立大鼠尿液代谢指纹谱,正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA),运用偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)观察各组大鼠尿液中代谢产物的差异性。结果与正常对照组相比较,哮喘模型组大鼠出现哮喘样症状,BALF中细胞总数及炎症细胞百分率升高,肺组织出现病理学改变,血清IgE水平升高;TXJF组大鼠哮喘样症状有所好转,BALF中细胞总数及炎症细胞百分率下降、肺组织病理改变情况减轻;与哮喘模型组比较,TXJF组血清IgE水平下降。哮喘模型组尿液中异亮氨酸、柠檬酸、琥珀酸、甘氨酸、丙氨酸含量降低,乳酸含量升高。与哮喘模型组相比较,高剂量TXJF组中异亮氨酸、琥珀酸、柠檬酸、肌酸、牛磺酸、丙氨酸、甘氨酸含量升高,乳酸等含量降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TXJF能够改善哮喘大鼠的一般情况,减轻肺组织病理改变,降低血清IgE水平,降低肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞数目及分类,并且对哮喘大鼠尿液代谢物具有显著的影响,从而起到治疗哮喘的作用,其作用机制可能与作用于哮喘大鼠体内的氨基酸代谢、能量代谢等多种代谢途径有关联。

维吾尔医异常黑胆质证大鼠模型的尿液代谢组研究

目的用外部特征观察与尿液代谢组研究相结合的方式,对维吾尔医异常黑胆质证大鼠模型进行生物学标志评价与讨论。方法采用维吾尔医异常黑胆质理论建立大鼠动物模型,并对其各项外部指标如毛发、舌象、睡眠、粪便、情绪、体重增长率等进行观察和评分,采用核磁共振氢谱(~1H-nuclear magnetic resonance,~1HNMR)对其尿液进行检测与分析。结果异常黑胆质证模型组大鼠与对照组相比较外部特征发生了明显的变化,包括粪便干燥且硬,尿量减少且颜色加深,皮毛干燥,舌苔暗紫并有瘀斑,体重增长率降低等;尿液代谢物中23种代谢物含量明显降低包括丙酸酯、乳酸、丙氨酸、丙酮酸、乙酸、乙酰胺、糖蛋白、丙酮、甲胍、肌氨酸、鸟氨酸、甘氨酸、肌酸、肌酸酐、肌胺酸酐、β-半乳糖、尿刊酸酯、酪氨酸、苯丙氨酸、马尿酸、氨基马尿酸、甲酸和赖氨酸等,而尿素、柠檬酸、尿囊素和α-酮戊二酸等4种代谢物含量明显升高。结论模型组大鼠在异常黑胆质证发生发展过程中不但外在表形发生明显变化,而且也发生了内在多种代谢通路的明显变化,尿液代谢产物的明显异常可能与异常黑胆质证的生物学机制有关。

基于核磁共振代谢技术研究宫颈上皮内瘤样变患者血浆代谢物

探讨宫颈上皮内瘤样变(CIN)和健康人血浆差异性代谢成分,分析利用基于核磁共振(NMR)代谢组学技术诊断宫颈癌的可行性。收集新疆医科大学第一附属医院病理确诊的36例CIN患者及36名健康人血液标本,应用NMR技术结合正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)对NMR谱数据进行模式识别分析,其结果与液基薄层细胞学(TCT)检测结果比较。结果表明,与健康人相比,CIN患者血浆中极低密度脂蛋白、不饱和脂肪酸和丙酮含量增加,与健康人血浆代谢物比较,差异有统计学意义(r<-0.349,P<0.05)。乳酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、肌酸、异亮氨酸和1-甲基组氨酸等多种氨基酸含量减少,与健康人血浆代谢物比较,差异具有统计学意义(r>+0.349,P<0.05)。基于NMR代谢组学技术结合OPLS-DA可以将CIN患者与健康人鉴别开来,其诊断灵敏度为91.7%,假阳性率为8.3%,优于TCT检测。由此得出结论,基于NMR代谢组学技术结合OPLS-DA能有效区分CIN和健康人的血浆代谢物。该技术有望成为早期诊断宫颈癌的一个新手段。

固相萃取结合HPLC-荧光法测定人血浆中维生素B_2含量

目的:建立固相萃取结合HPLC-荧光法测定人血浆中维生素B2含量的方法。方法:采用SiroccoTM96孔蛋白沉淀板和正压固相萃取装置处理样品,采用SymmetryshieldTMRP-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol.L-1乙酸铵(35∶65),流速为0.6 mL.min-1,荧光检测器检测(激发波长:450 nm,发射波长:520 nm)。结果:维生素B2线性范围为0.2～10 ng.mL-1(r=0.9937)。定量下限为0.17 ng.mL1,日内精密度(RSD)为2.0%～4.8%,日间精密度(RSD)为3.8%,方法回收率为101.5%～116.0%(n=3),提取回收率为91.8%～115.1%。结论:所建方法采用96孔蛋白沉淀装置自动处理样品,高效液相色谱-荧光法测定,可用于临床血浆样品中维生素B2含量的测定。