两种方法建立兔腰椎间盘退变模型

背景:国内外学者对椎间盘退变动物模型的建立做了大量工作,通过改变椎间盘力学特性、纤维环损伤、酶化学法等多种建模方式模拟椎间盘退变的病理表现。目的:通过髓核抽吸法和纤维环薄层切除法建立椎间盘退变模型,比较两种方法的造模效果。方法:取6月龄新西兰大白兔20只,通过手术暴露L3-4、L4-5及L5-6椎间盘,随机使用髓核抽吸法和纤维环薄层切除法对L3-4、L4-5椎间盘进行干预:(1)髓核抽吸组——利用16 G针头在椎间盘纤维环穿刺并负压抽吸10 s;(2)纤维环薄层切除组——在显微镜下辅助下,在兔椎间盘纤维环上切除1 mm×2 mm范围的约1/2层纤维环组织(避免切透全层)。于造模第1,3,5,9,13周进行核磁共振、X射线检查及椎间盘Masson染色病理学观察。结果与结论:(1)X射线检查:纤维环薄层切除组椎间隙高度自术后第1周起便发生不同程度降低;髓核抽吸组椎间隙在术后1周及3周轻微降低,自第5周起发生较明显降低;纤维环薄层切除组术后第3,5,9周椎间隙高度指数百分比高于髓核抽吸组(P<0.05);(2)核磁共振检查:两种方法均诱导相应椎间盘发生退变,各组随时间推移椎间盘退变程度逐渐加重,并于9周后均达到4级退变;髓核抽吸组术后1,3,5周的椎间盘退变程度重于纤维环薄层切除组(P<0.05);(3)病理学观察:随时间推移,两组椎间盘髓核及纤维环退变程度逐渐加重;(4)结果表明:髓核抽吸法和纤维环薄层切除法均能诱导椎间盘退变,纤维环薄层切除法在5周内造成的椎间盘退变程度较髓核抽吸法轻,纤维环薄层切除法在纤维环上所造成的标示部位可作为纤维环修补研究的靶点。

如何构建能较全面模拟人类椎间盘退变性疾病的椎间盘退变实验动物模型

背景:椎间盘退变性疾病的发病机制目前尚无定论,建立理想的椎间盘退变动物模型是研究该病发病机制或治疗的重要途径。目的:对近年来各种椎间盘退变动物模型研究的模型选择、建模方法以及优缺点做一综述。方法:计算机检索万方数据库、知网数据库、Pub Med数据库以及FMJS数据库近5年国内外关于椎间盘退变的体内及体外动物模型的文献。结果与结论:目前的文献报道显示中小型动物是现阶段较为常用的模型动物;造模方法可以分为体内和体外模型两大类,体外模型通过细胞或组织培养,从细胞及分子水平揭示椎间盘退变的机制,体内模型则使用不同种物理或化学方法对椎间盘进行干预,模拟椎间盘退变的结果,并从干预过程中反证椎间盘退变的机制。但因人类的椎间盘退变性疾病发病机制复杂,目前尚无定论,所以目前的动物模型均不能较全面的模拟人类椎间盘退变性疾病。

乌司他丁联合奥曲肽治疗急性胰腺炎的临床效果分析

分析乌司他丁联合奥曲肽治疗急性胰腺炎的临床效果。方法 将2018年3月至2020年1月我院收治的急性胰腺炎患者,抽取82作为样本,按入院先后分为两组,其中对照组41例在接受基础治疗后施以奥曲肽治疗,观察组41例在对照组基础上联合乌司他丁同治。经统计学软件分析数据后得出研究结论。结果 经治疗,两组患者在恢复指标和治疗有效率方面存在统计学差异(P <0.05),皆为观察组更优。结论 对急性胰腺炎患者施以乌司他丁联合奥曲肽治疗,不仅能够缩短患者康复时间,还有助于提高其治疗有效率,可应用推广。

亚精胺促进线粒体自噬缓解急性胰腺炎的分子机制研究

目的探讨亚精胺促进线粒体自噬缓解急性胰腺炎的疗效及作用机制。方法将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、亚精胺组、亚精胺+环孢菌素A组,每组5只。通过每小时向小鼠腹膜内注射1次50μg/kg的蛙皮素构建急性胰腺炎模型。对照组按照同模型组的处理方式注射等体积无菌生理盐水;亚精胺组腹膜内注射100 mmol的亚精胺;亚精胺+环孢菌素A组在给予亚精胺治疗的同时,腹膜内注射10 mg/kg的环孢菌素A。苏木精–伊红(HE)染色评估小鼠胰腺组织损伤程度。TUNEL染色评估胰腺腺泡细胞凋亡情况。ELISA法测定小鼠血清炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤细胞坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、C反应蛋白(CRP)的水平。免疫组织化学染色(IHC)评估髓过氧化物酶(MPO)水平。JC-1染料测定胰腺组织提取的总线粒体的线粒体膜电势水平。Western blotting法测定胰腺组织细胞质基质型LC3(LC-3Ⅰ)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC-3Ⅱ)、泛素结合蛋白(p62)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-1)、cleaved-Caspase-1、IL-1β、PTEN诱导假定激酶1(PINK1)、磷酸化Parkin(p-Parkin)和Parkin的表达水平。结果与模型组相比,亚精胺组胰腺组织几乎不存在中性粒细胞的大量浸润,腺泡细胞肿胀程度明显减弱,基本无腺泡细胞坏死;TUNEL染色阳性细胞数和MPO IHC阳性染色细胞数明显降低;小鼠血清IL-6、TNF-α、IL-1β、CRP的水平明显降低;胰腺组织LC-3Ⅰ/Ⅱ、NLRP3、IL-1β、cleaved-Caspase-1、PINK1和p-Parkin的表达水平明显降低,p62的表达水平明显增强;胰腺组织总线粒体膜电势水平明显增强(P<0.05)。与亚精胺组相比,亚精胺+环孢菌素A组完全逆转了亚精胺的治疗效果。结论亚精胺可以促进线粒体自噬缓解急性胰腺炎。