一个大豆锈病新抗源的筛选与鉴定

采用离体叶片接种方法对2007-2010年收集的1 000份大豆种质资源进行抗性筛选,得到1份高抗材料SX6907。SX6907在接种锈菌后20d不产生侵染病斑;在接种高浓度锈菌时,产生少数红褐色RB(Red-brown)病斑,但无孢子堆破裂现象,无孢子产生;已知抗病品种(除日向外)在本研究抗性鉴定中主要表现为黄褐色TAN型感病病斑,抗性丧失。组织学观察表明,SX6907在接种部位造成细胞坏死,侵染点无孢子形成,其抗性表现为抗锈菌扩展。SX6907是一个优异的抗锈病资源,可做亲本在抗锈病育种中应用。

大豆霜霉病菌rDNA ITS区的分子探针的设计与应用

大豆霜霉病菌是引起大豆病害的重要病原之一,采用真菌18～28 S间的内转录间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)通用引物ITS1和ITS4扩增大豆霜霉病菌和其他外群真菌的基因组DNA,扩增出约500 bp的片段;通过克隆测序大豆霜霉病菌的ITS全序列并与GenBank中霜霉菌属其他种的ITS序列比对,设计出大豆霜霉病菌的特异性引物PM1和PM2。用此特异引物可以从大豆霜霉菌株中扩增出380 bp的特异性片段,而其余9个参试菌株和大豆组织的PCR反应结果为阴性,灵敏度试验证明,可以检测到目标DNA的浓度为0.1 pg。该方法可用于快速、准确和灵敏地检测大豆霜霉病菌,为快速监测组织中霜霉病菌潜伏侵染并及早采取防治措施提供积极的指导作用。

新型冠状病毒20合1混采检测研究

目的研究新型冠状病毒(SARS-CoV-2)样本20合1混采对检测结果的影响。方法取1、10、20份健康人咽拭子分别放入3、6、12 mL病毒保存液,充分混匀后加入SARS-CoV-2假病毒质控品,以模拟单采、10合1混采和20合1混采研究,经磁珠法提取核酸后,分别采用两种扩增试剂检测,比较不同采集方式对检测结果的影响;探索两种扩增试剂对低浓度样本检出能力。结果随着样本浓度的稀释,N和ORF1ab基因的Ct值均有不同程度的升高,0.76~1.35个循环;模拟单采、10合1混采和20合1混采检测500 copy/mL样本,N和ORF1ab基因的Ct值差异甚微,无统计学意义;两种扩增试剂对500、250 copy/mL样本检出率均为100.00%;其中一种扩增试剂对125、62.5、31.25 copy/mL样本N基因检出率分别为95.83%、79.17%、0.00%,ORF1ab基因的检出率分别为100.00%,100.00%、16.67%;另一种扩增试剂对125、62.5、31.25 copy/mL样本N基因检出率分别为100.00%,100.00%、33.33%,ORF1ab基因的检出率分别为100.00%,100.00%、54.17%。结论在扩增试剂盒声称的检测限范围内,20合1混采不影响样本检测结果。

新型冠状病毒核酸快速检测系统质量评估

目的本研究旨在评估快速检测系统对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸项目检测能力和检测质量,为快速检测系统的应用和结果的分析提供一定的参考依据。方法选用SARS-CoV-2假病毒和RNA合成全片段两种类型的能力验证质控品作为阳性样本,人冠状病毒229E灭活样本作为阴性样本。使用SARSCoV-2 RNA合成全片段能力验证质控品和阴性样本验证快速检测系统的性能,包括符合率、精密度和最低检测限,比较快速检测系统和常规PCR设备的精密度和检出能力,以及探索快速检测系统对低于最低检测限浓度样本检出能力;选用这两种类型的阳性样本评估一步法和常规磁珠法提取SARS-CoV-2 RNA后经快检设备扩增对结果的影响。结果快速检测系统的符合率为100.00%;快速检测系统和常规PCR设备检测两个阳性浓度水平样本的精密度CV值均小于5.00%,对浓度500 copy/mL样本的检出率为100.00%;两种类型的阳性样本经磁珠法与一步法提取核酸后,在快检设备上扩增检测,两者结果比较,经磁珠法提取的样本检测结果的ORF1ab和N基因的Ct值均较低,差异有统计学意义(P<0.05);快速检测系统对浓度为400 copy/mL样本检出率为100.00%,对浓度为200 copy/mL样本N和ORF1ab基因检出率分别为100.00%和91.67%,对浓度为100 copy/mL样本N和ORF1ab基因检出率分别为91.67%和58.33%。结论该快速检测系统对新型冠状病毒核酸检测性能良好,但常规磁珠法提取SARS-CoV-2 RNA比该快检设备厂家推荐的一步法提取检测的灵敏度更高。