去氢骆驼蓬碱衍生物DH-330的一般药理学研究

目的:研究1-(2-氯)苯基-9-丁基-β-咔啉(DH-330)在药效学剂量或之上时对实验动物神经系统、呼吸系统和心血管系统的影响,为其进一步的开发和使用提供安全性评价数据。方法:采用灌胃给药方式观察DH-330(50,250,500 mg·kg^(-1))对小鼠自主活动、协调功能和阈下睡眠剂量戊巴比妥钠协同作用的影响;通过测定呼吸幅度、呼吸频率、动脉收缩压、动脉舒张压、动脉平均压观察DH-330对大鼠呼吸系统及心血管系统的影响。结果:DH-330剂量为药效学有效剂量的10倍时(小鼠500 mg·kg^(-1)、大鼠350 mg·kg^(-1))单次给药后会导致小鼠自主活动减少,协调能力降低,对戊巴比妥钠催眠阈下剂量的效果无协同作用,但该剂量下会使麻醉大鼠血压降低及心电图异常,其余各剂量组和各观察指标均未见异常。结论:DH-330在有效量的10倍时可能会诱发中枢神经和心血管系统毒性。DH-330在有效剂量的10倍以下时,对动物中枢神经系统、呼吸系统和心血管系统均未见有毒理学意义的影响,因此在药效学有效剂量范围内具有较高的安全性。

去氢骆驼蓬碱及其衍生物H-2-168对SH-SY5Y细胞的毒性作用

目的通过建立SH-SY5Y模型,探讨去氢骆驼蓬碱(HM)及其衍生物H-2-168对神经细胞的毒性作用。方法将SH-SY5Y细胞分为对照组(给予含0.1μmol·L^(-1)二甲基亚砜的完全培养基),低、中、高剂量HM组(分别给予含1、5和10μmol·L^(-1)HM的完全培养基)和低、中、高剂量衍生物组(分别给予含1、5和10μmol·L^(-1)H-2-168的完全培养基)。用克隆形成实验检测细胞的增殖情况,用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)和腺苷三磷酸(ATP)水平,用JC-1染色法测定细胞线粒体膜电位(MMP)。结果高剂量HM组、高剂量衍生物组和对照组的克隆形成率分别为(14.43±0.85)%、(43.00±2.26)%和(100.20±0.82)%,LDH释放水平分别为(404.28±8.79)%、(260.36±2.04)%和(100.00±0.28)%,ATP水平分别为(56.36±1.65)%、(77.65±0.70)%和(100.00±0.85)%,MMP水平分别为0.21±0.02、1.27±0.24和8.33±1.04。高剂量HM组和高剂量衍生物组的上述指标与对照组比较,高剂量HM组的上述指标和高剂量衍生物组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论HM衍生物H-2-168对SH-SY5Y细胞的损伤作用明显低于HM。

1-(2-氯)苯基-9-丁基-β-咔啉对小鼠的神经毒性作用

目的:探讨去氢骆驼蓬碱衍生物1-(2-氯)苯基-9-丁基-β-咔啉(简称“DH-330”)对小鼠神经行为损伤的影响及可能机制,为系列衍生物的开发提供依据。方法:将昆明小白鼠随机分为4组,分别为空白对照组(0.9%NaCl溶液)、低剂量组(69.44 mg·kg^(-1)DH-330)、中剂量组(208.33 mg·kg^(-1)DH-330)和高剂量组(347.22 mg·kg^(-1)DH-330),连续灌胃给药28 d,采用Morris水迷宫实验测试神经行为;通过免疫吸附测定法(ELISA)测定小鼠脑组织中ROS、GSH、MAO、AChE、5-HT含量,同时采用透射电镜对小鼠海马组织超微结构进行观察。结果:Morris水迷宫实验:高剂量DH-330对小鼠的空间学习记忆能力造成影响,主要表现为高剂量组小鼠的逃避潜伏期及总行程显著长于对照组(P<0.05),而穿台次数及靶象限停留时间显著少于对照组(P<0.05)。生化指标结果:与对照组比较,DH-330高剂量组小鼠脑内ROS、5-HT水平显著升高(P<0.05);GSH、AChE、MAO含量显著降低(P<0.05)。海马超微结构:高剂量DH-330可导致海马组织中细胞结构损伤,主要表现为异染色质多黑、线粒体出现空泡化等现象。结论:DH-330可致小鼠神经行为系统损伤,其机制可能是通过抑制小鼠脑内AChE、MAO及GSH含量,促使ROS、5-HT水平升高,导致氧化平衡状态改变及单胺类神经递质含量升高,从而诱导神经行为毒性。