磷酸二酯酶4B与小鼠阿霉素心脏毒性相关性研究

目的探讨磷酸二酯酶4B(PDE4B)与小鼠阿霉素心脏毒性(DIC)的相关性。方法将12只C57BL/6J小鼠随机分入生理盐水组和DIC组,每组各6只。DIC组采用腹腔注射阿霉素(DOX)建立小鼠DIC模型。注射DOX后第15天,超声评价生理盐水组和DIC组小鼠的心功能。采用实时荧光定量聚合酶链式反应和Western blot检测生理盐水组、DIC组PDE4B mRNA及PDE4B蛋白水平。采用DOX刺激HL-1心肌细胞24 h后,实时荧光定量聚合酶链式反应和Western Blot检测对照组(未给予DOX刺激)、DOX组(给予DOX刺激)PDE4B mRNA及PDE4B蛋白水平。结果与生理盐水组比较,DIC组小鼠的左室射血分数和短轴缩短率均显著降低(P<0.05)。与生理盐水组比较,DIC组心肌组织PDE4B mRNA及蛋白水平均明显升高(P<0.05)。在心肌细胞中,与对照组比较,DOX组PDE4B mRNA及蛋白水平均明显升高(P<0.05)。结论PDE4B在DOX刺激后心肌组织和心肌细胞中表达升高。

NAD依赖性蛋白脱乙酰酶Sirtuin-3对糖尿病心肌病影响及机制

目的 探讨NAD依赖性蛋白脱乙酰酶Sirtuin-3(Sirt3)对糖尿病心肌病(DCM)的影响及其相关机制。方法 将6只8周龄雄性C57BL/6J小鼠分入正常组和DCM模型组,每组各3只。DCM模型组高脂饮食4周后连续5 d腹腔注射链脲菌素;正常组正常饮食,腹腔注射等量的柠檬酸缓冲液5 d。用300μmol/L的棕榈酸(PA)刺激H9C2细胞24 h构建心肌细胞脂毒性模型,将PA处理过的细胞纳入PA组,未处理过则纳入对照组。对细胞进行Sirt3的干扰RNA(si-Sirt3)和对照试剂(si-con)转染,转染24 h后给予PA刺激24 h并收集细胞。将细胞按照处理方式不同分入4组:si-con组,si-Sirt3组,si-con+PA组,si-Sirt3+PA组。采用Western blot检测正常组和DCM模型组小鼠心肌组织中Sirt3蛋白水平,以及对照组和PA组细胞中Sirt3蛋白水平。采用Western blot检测H9C2细胞中超氧化物歧化酶2(SOD2)乙酰化水平。采用DHE染色检测活性氧产生情况。结果 与正常组比较,DCM模型组小鼠心肌组织中Sirt3蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,PA组细胞中Sirt3蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-con组比较,si-con+PA组ac-SOD2/SOD2水平和活性氧水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与si-con+PA组比较,si-Sirt3+PA组ac-SOD2/SOD2水平和活性氧水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Sirt3可通过SOD2的去乙酰化消除心肌细胞中的活性氧,减少心肌细胞氧化应激损伤,在DCM的发生和发展中发挥重要作用。

Trim55在心血管系统疾病中研究进展

Trim55为Trims家族一员,Trims基序由锌结合结构域、环指结构域、B盒基序与盘绕线圈结构域组成。在Trims家族中,Trim54、Trim55与Trim63被命名为肌肉特异性环状因子家族,为Trims蛋白的一个特殊亚类[1]。Trim54、Trim55与Trim63编码高度同源的蛋白,可以通过各自的螺旋卷曲结构域形成同源或异源二聚体发挥生物学作用[2]。本文就Trim55的生理功能,以及其在心血管系统疾病中的作用予以综述。

不同血清标本保存条件及时间对血清生化检验结果影响

目的探讨不同血清标本保存条件及时间对血清生化检验结果的影响。方法选取北部战区总医院心血管内科自2022年5月至2023年2月收治的50例行常规生化检验的冠心病患者为研究对象。所有患者均采用分离胶采血管采集血标本5 ml。将血清标本离心后即时检测设为即测组,将血清标本密封冷藏保存于4℃设为A组,将血清标本密封冷冻保存于-20℃设为B组。测定并比较即测组、A组、B组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷草氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL⁃C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL⁃C)、超敏C反应蛋白(hs⁃CRP)。记录并比较最大变异系数(CV_(max))、室内质控允许最大变异系数(CV_(室内))、常规项目质量指标允许最大变异系数(CV_(指标))。结果即测组、A组、B组ALT、AST、TBIL、DBIL、TG、TC、HDL⁃C、LDL⁃C、hs⁃CRP结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。CV_(max)均小于或等于CV_(室内)、CV_(指标),标本保存12 d后指标的CV_(max)在行业规定标准允许波动范围内。结论血清标本于4℃与-20℃密封保存12 d后,血清生化检测结果依旧稳定,可作为不满足即测条件标本测定的补充方案。

FosB与小鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡相关性研究

目的观察FosB在C57BL/6J小鼠心肌梗死(MI)后3 d的心肌组织及氯化钴(CoCl_(2))刺激后的心肌细胞中的表达变化。方法将12只SPF级8~10周雄性C57BL/6J小鼠随机分入假手术组(sham组)和MI组,每组各6只。MI组采用永久性冠状动脉前降支结扎法构建小鼠MI模型。术后第3天超声评价sham组和MI组小鼠的心功能。采用Western Blot和实时荧光定量聚合酶链式反应检测sham组、MI组FosB mRNA水平及FosB、cleaved caspase3蛋白水平。采用氯化钴(CoCl_(2))刺激HL-1心肌细胞24 h后,Western Blot和实时荧光定量聚合酶链式反应检测对照组(CON组,未给予CoCl_(2)刺激)和缺氧组(给予CoCl_(2)刺激)FosB mRNA水平及FosB、cleaved caspase3蛋白水平。结果与sham组比较,MI组3 d时梗死边缘区FosB mRNA水平及FosB、cleaved caspase3蛋白水平均明显升高(P<0.05)。与CON组比较,缺氧组HL-1细胞FosB mRNA水平及FosB、cleaved caspase3蛋白水平均明显升高(P<0.05)。结论FosB在MI后心肌组织和缺氧后心肌细胞中表达升高,与MI后心肌细胞凋亡存在正相关性。

TRIM55基因敲除小鼠建立及鉴定

目的建立并鉴定TRIM55基因敲除小鼠。方法将雄性TRIM55杂合子小鼠与雌性C57BL/6J小鼠进行交配,获得雌性TRIM55杂合子小鼠,再将雄性TRIM55杂合子小鼠与雌性TRIM55杂合子小鼠进行交配,获得子代小鼠。第4周时提取鼠耳基因组DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳进行基因型鉴定。提取小鼠的心肌组织和骨骼肌组织的RNA和蛋白,采用荧光定量PCR、Western Blot检测小鼠心肌组织和骨骼肌组织TRIM55基因转录水平和蛋白表达。结果子代小鼠中,野生型22只(23.16%)、TRIM55杂合子24只(25.26%)、TRIM55基因敲除49只(51.58%),成功构建TRIM55基因敲除小鼠模型。TRIM55基因敲除小鼠心肌组织和骨骼肌组织的TRIM55基因转录水平和蛋白表达低于野生型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究成功建立了TRIM55基因敲除小鼠模型,为深入阐明TRIM55的作用及其机制提供了新的实验工具。