鳗鲡(Anguilla japonica)性腺发育和饥饿胁迫下生物学指标及体内蛋白质与氨基酸含量变化

自然条件下,鳗鲡(Anguilla japonica)自降河入海至性腺发育成熟需洄游数千公里、耗时半年以上,且整个过程中不摄食。本文以降海洄游、人工促熟和长期饥饿(20个月)三种状态下的鳗鲡为材料,研究其在性腺发育和饥饿胁迫时的主要生物学指标(包括肥满度、肝体比、脏体比、性腺指数、含肉率)以及肌肉、肝脏和性腺中的粗蛋白与氨基酸含量的变化情况,以探讨鳗鲡性腺发育和饥饿胁迫下的营养物质来源与变化。结果发现:人工促熟鳗鲡的肝体比、脏体比和性腺指数显著高于降海洄游鳗鲡(P<0.05),而含肉率、肝脏和卵巢内的粗蛋白含量、氨基酸总量、必需氨基酸总量以及非必需氨基酸总量均显著低于降海洄游鳗鲡的含量(P<0.05);长期饥饿鳗鲡的肥满度、肝体比、含肉率、肌肉(鲜样)、肝脏内的粗蛋白、氨基酸总量、必需氨基酸总量以及必需氨基酸占氨基酸总量的比值显著低于降海洄游鳗鲡(P<0.05)。结果表明,鳗鲡性腺发育所需要的营养物质主要来源于肌肉,其性腺的发育依赖自身营养物质在体内的流动和转化,肌肉中的必需氨基酸和非必需氨基酸均被利用,转化成性腺发育所需要的物质。

人工诱导花鳗鲡成熟过程中卵巢内6种性类固醇激素的含量及变化

为分析成年花鳗鲡经多次注射鲤鱼脑垂体（carp pituitary extract,CPE,每周12 mg/kg）和人绒毛膜促性腺激素（h CG,每周300 IU/kg）后,卵巢发育成熟过程中6种性类固醇激素的含量及变化,实验采用超高效液相色谱—串联质谱（UPLC/MS/MS）联用方法对花鳗鲡性腺内这6种类固醇激素进行研究。结果发现,睾酮（testosterone,T）、孕酮（progesterone,P）、雌二醇（estradiol-17β,E2）、雌三醇（estriol,E3）、17α,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮（17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one,DHP）、17α-羟基孕酮（17α-hydroxyprogesterone,17α-OHP）在x Bridge C18色谱柱上得到良好分离,在0～200 ng/m L的范围内线性相关系数均大于0.99,检测限为0.1～0.5 ng/g,回收率为89.00%～94.83%,相对标准差均小于20%;注射外源激素后,6种性类固醇激素在花鳗鲡卵巢中的含量及变化情况如下：第2次注射后,T、P、E2、E3、DHP、17α-OHP的含量分别为（0.27±0.05）、（0.64±0.05）、0、（1.17±0.19）、0、0 ng/g;第9次注射后,T、P、E2、E3、DHP、17α-OHP的含量分别为（0.73±0.13）、（1.28±0.38）、（1.27±0.27）、（0.83±0.14）、（1.50±0.59）、（0.43±0.25）ng/g;第16次注射后,T、P、E2、E3、DHP、17α-OHP的含量分别为（1.17±0.14）、（2.23±0.51）、（5.59±0.96）、（2.46±0.70）、（2.29±0.65）、（4.56±0.74）ng/g。对照组中均未检测到雌二醇和雌三醇。研究表明,雌二醇和雌三醇是花鳗鲡性腺发育的关键因素;随着性腺发育,花鳗鲡卵巢中6种性类固醇激素的含量整体呈逐步增加的趋势。另一方面,UPLC/MS/MS法能同时定量测定这6种性类固醇激素,具有灵敏、高回收率、稳定的优势。

碳源对花鳗鲡养殖系统水质及生产性能的影响

为探究碳源对花鳗鲡Anguilla marmorata养殖系统内水质及生产性能的影响,利用生物絮团技术在12个室内水泥池(3.0 m×5.0 m×1.2 m)中进行花鳗鲡—罗非鱼—蕹菜立体综合养殖试验,试验设置A(花鳗鲡单养)、B(花鳗鲡—罗非鱼—蕹菜)、C(花鳗鲡—罗非鱼—蕹菜同时添加玉米淀粉)、D(花鳗鲡—罗非鱼—蕹菜同时添加木薯淀粉)4组,其中,A、B组为非生物絮团组,C、D组为生物絮团组。试验期间不换水,仅投喂花鳗鲡商品饲料,两种淀粉的添加量为花鳗鲡实际摄食量的75%,此时碳氮比为12,试验共进行78 d。结果表明:养殖水质方面,到试验结束时,生物絮团组在总氮、总磷、三态氮方面均显著低于单养组(P<0.05);养殖期间,各组氨氮和亚硝酸氮含量变化剧烈,无明显规律,叶绿素a含量随养殖水温的变化呈先升高后降低的趋势,COD含量随生物絮团形成量起伏变化;絮体体积形成量与总悬浮颗粒(TSS)变化规律一致;试验结束时,D组絮团蛋白质含量最高(23.68%),与C组无显著性差异(P>0.05),但二者均显著高于非絮团组A、B (P<0.05);絮团组C的氮、磷利用率分别为31.43%、14.14%,D组氮、磷利用率分别为28.04%、13.69%,二者均显著高于非絮团组A(18.43%,9.23%)和B(19.91%,8.42%);生物絮团组(C、D)在花鳗鲡生物量、终末平均体质量、特定生长率方面均显著高于非絮团组(A、B)(P<0.05),在饵料系数方面显著低于花鳗鲡单养组(A)(P<0.05),但絮团组间无显著性差异(P>0.05),综合养殖组(B、C、D)在花鳗鲡生长性能方面均优于花鳗鲡单养组(A)。研究表明,在花鳗鲡综合养殖系统中,添加有机碳源能够显著改善养殖水环境,提升花鳗鲡生长性能及对饲料中氮磷的利用率。

不同发育时期雄性鳗鲡精巢和GtH分泌细胞的结构观察及相关组织中性类固醇激素的变化

通过组织切片和电子显微镜观察经多次注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)和鲤鱼脑垂体匀浆液(carp pituitary extract,CPE)促熟的雄性鳗鲡(Anguilla japonica)精巢和脑垂体超微结构的变化,并采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC/MS/MS)联用的方法,观察性腺和血液中7种类固醇激素含量的变化。结果发现:成熟组鳗鲡精巢发育至第Ⅴ期,排精10 d时鳗鲡精巢进入退化吸收期。性成熟雄性鳗鲡的脑垂体GtH分泌细胞代谢活动旺盛,细胞中分泌小球增多,囊泡数量增加,线粒体和内质网丰富。鳗鲡精巢和血液中睾酮(testosterone,T)、17α,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮(17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one,DHP)和17α-羟孕酮(17α-hydroxyprogesterone,17α-OHP)3种激素含量较高,且成熟的和排精10 d后雄鱼精巢和血液中T、DHP和17α-OHP的含量均显著高于对照组(P﹤0.05),排精10 d时雄鱼精巢和血液中17α-羟孕酮的含量显著低于成熟组鳗鲡精巢和血液中的含量(P﹤0.05);精巢和血液中未检出孕酮(progesterone,P)、雌酮(estrone,E1)、β-雌二醇(estradiol-17β,E2)和雌三醇(estriol,E3)4种激素。结果表明,睾酮、17α-羟孕酮和DHP是雄鱼成熟的关键类固醇激素,其含量在性成熟时达到峰值,排精10 d时含量降低,其含量受脑垂体GtH分泌的调控。