三叶青黄酮的提取工艺优化及抗氧化活性分析

目的响应面法优化三叶青块根黄酮的提取工艺,测定9种单体物质的含量,评价黄酮的体外抗氧化活性。方法根据中心组合设计,对提取温度、提取时间、甲醇浓度、液料比4个因素进行考察,以三叶青黄酮得率为指标优化提取工艺。采用超高效液相色谱分析9种黄酮单体的含量。以DPPH自由基和羟自由基清除率为指标评价总黄酮的体外抗氧化能力。结果确定的优化工艺条件为提取温度78℃,提取时间92 min,甲醇浓度78%,液料比15∶1,总黄酮得率为1.725%,通过中试验证,总黄酮得率为1.709%。异荭草苷、荭草苷、芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、槲皮素、芹菜素和山柰酚含量依次为119.6、25.3、26.4、28.8、41.6、30.4、150.8、18.1、20.6μg·g^(-1)。总黄酮对DPPH自由基和羟自由基的清除率高达92.56%和72.96%,IC50值分别为0.061 mg·mL^(-1)与0.115 mg·mL^(-1)。结论确定的提取工艺稳定、高效、经济,可用于三叶青黄酮的提取,所得提取物具强抗氧化活性。