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丁烯酸内酯对软骨细胞的毒理机制和Se、VC、VE的保护作用 被引量:3
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作者 师钟丽 曹峻岭 +2 位作者 陈静宏 郭雄 彭双清 《浙江医学》 CAS 2007年第7期664-667,共4页
目的观察丁烯酸内酯(BUT)对软骨细胞的毒理作用以及维生素C(VC)、维生素E(VE)和硒(Se)的保护作用。方法体外培养软骨细胞,加入不同浓度BUT以及VC、VE和Se。用MTT法检测细胞活性,收集培养液检测氧化相关指标丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)... 目的观察丁烯酸内酯(BUT)对软骨细胞的毒理作用以及维生素C(VC)、维生素E(VE)和硒(Se)的保护作用。方法体外培养软骨细胞,加入不同浓度BUT以及VC、VE和Se。用MTT法检测细胞活性,收集培养液检测氧化相关指标丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的表达水平,通过光镜和电镜来观察其形态变化。结果BUT可以导致软骨细胞膜系统受损甚至死亡。微量毒素可以刺激软骨细胞的活性,增强其抗氧化作用;大量毒素则表现为抑制作用。VC、VE和Se对这种损伤的保护作用很有限。结论BUT通过刺激细胞产生内源性的氧自由基来发挥其损伤作用,进而导致细胞膜系统破坏甚至细胞死亡;单一的抗氧化剂并不能完全拮抗这种损伤作用。 展开更多
关键词 丁烯酸内酯 软骨细胞 维生素C 维生素E 抗氧化 毒理作用
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人类白细胞分化抗原CD44与骨关节病 被引量:2
2
作者 师钟丽 靳燕宇(综述) 曹峻岭(审校) 《国外医学(医学地理分册)》 CAS 2005年第2期49-52,55,共5页
人类白细胞分化抗原作为一种粘附分子,主要与细胞外透明质酸结合,参与关节软骨基质中透明质酸的代谢,因而它与各种骨关节疾病包括大骨节病关系密切。本文从人类白细胞分化抗原的基因结构、蛋白结构、生物学功能等多方面阐述了近年来国... 人类白细胞分化抗原作为一种粘附分子,主要与细胞外透明质酸结合,参与关节软骨基质中透明质酸的代谢,因而它与各种骨关节疾病包括大骨节病关系密切。本文从人类白细胞分化抗原的基因结构、蛋白结构、生物学功能等多方面阐述了近年来国内外在骨关节疾病领域的研究成果,并对开展有关人类白细胞分化抗原和大骨节病的研究提出了建议。 展开更多
关键词 抗原CD44 人类白细胞分化抗原 骨关节病 骨关节疾病 透明质酸 大骨节病 生物学功能 粘附分子 软骨基质 基因结构 蛋白结构 细胞外 国内外
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职业性骨病
3
作者 师钟丽 曹峻岭 《国外医学(医学地理分册)》 CAS 2004年第2期55-57,共3页
职业性骨病比较少见 ,而且缺乏特异性的表现 ,这就给诊断带来困难。近年来由于人们对上述状况和病理生理机制研究更加深入 ,因而对它的认识更加明确 ,这就有利于进一步的诊断和治疗。
关键词 骨病 诊断和治疗 职业性 病理生理机制 特异性 状况 表现 缺乏
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T-2毒素对软骨Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖合成的影响以及硒的保护作用 被引量:17
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作者 陈静宏 曹峻岭 +5 位作者 楚雍烈 杨占田 师钟丽 王红林 郭雄 王治伦 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期381-385,共5页
目的探讨T-2毒素对软骨细胞主要间质成分Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖合成的影响和硒的保护作用。方法采用 MTT法检测T-2毒素对软骨细胞存活率的影响;用TB染色法检测人软骨细胞蛋白聚糖表达;免疫组织化学检测人软骨细胞胶原蛋白Ⅱ表达;RT-PC... 目的探讨T-2毒素对软骨细胞主要间质成分Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖合成的影响和硒的保护作用。方法采用 MTT法检测T-2毒素对软骨细胞存活率的影响;用TB染色法检测人软骨细胞蛋白聚糖表达;免疫组织化学检测人软骨细胞胶原蛋白Ⅱ表达;RT-PCR检测人软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖mRNA表达。结果 T-2毒素在浓度为 0.001-2 mg/L的范围内,对软骨细胞的作用呈较典型的浓度依赖关系和时间依赖关系,而且随着作用时间的延长,浓度依赖关系更加明显。T-2毒素(10~20μg/L)可以抑制软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖的合成及其mRNA表达。而加硒能较明显刺激软骨细胞蛋白聚糖mRNA表达,部分减弱T-2毒素的这种抑制,有一定的保护作用,但不显示对T-2 毒素引起的Ⅱ型胶原蛋白及其mRNA表达的保护作用。结论 T-2毒素对软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白和蛋白聚糖合成有明显的抑制作用,微量元素硒对T-2毒素引起的软骨细胞蛋白聚糖改变有一定保护作用。 展开更多
关键词 Ⅱ型胶原蛋白 蛋白聚糖 T-2毒素 软骨细胞
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T-2毒素对胎儿软骨细胞凋亡、Bcl-2和Bax表达的影响及硒的保护作用 被引量:11
5
作者 陈静宏 楚雍烈 +5 位作者 杨占田 曹峻岭 师钟丽 李思远 郭雄 王治伦 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期130-134,共5页
目的探讨T-2毒素对软骨细胞凋亡的作用,和对凋亡调控蛋白Bcl-2与Bax表达的影响,以及微量元素硒对软骨细胞的保护作用.方法采用电镜,Annexin V/PI法检测T-2毒素致人软骨细胞凋亡的情况,采用流式细胞仪检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达.... 目的探讨T-2毒素对软骨细胞凋亡的作用,和对凋亡调控蛋白Bcl-2与Bax表达的影响,以及微量元素硒对软骨细胞的保护作用.方法采用电镜,Annexin V/PI法检测T-2毒素致人软骨细胞凋亡的情况,采用流式细胞仪检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果 T-2毒素可引起软骨细胞发生凋亡的典型电镜形态改变;不同浓度(1~20μg/L)的T-2毒素均可以引起软骨细胞早期凋亡率和晚期凋亡率明显增加,且在一定范围内呈浓度依赖性,T-2毒素浓度为20μg/L时早期凋亡率最高达5.60%,晚期凋亡率最高达8.61%.生理浓度的微量元素硒可部分减弱T-2毒素引起的凋亡;不同浓度(1~20μg/L)的 T-2毒素都能引起Bcl-2和Bax表达水平提高,浓度为10~20μg/L时,Bax/Bcl-2比值升高;硒能部分对抗T-2毒素引起的Bcl-2和Bax 表达的提高,使Bax/Bcl-2比值下降,以降低凋亡率.结论 T-2毒素在浓度为1~20μg/L时,可以引起软骨细胞凋亡;T-2毒素引起的软骨细胞凋亡与软骨细胞内Bax/Bcl-2比值升高有关,硒对T-2毒素引起的软骨细胞凋亡有一定保护作用. 展开更多
关键词 T-2毒素 凋亡 BCL-2 BAX 软骨细胞
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一氧化氮和Fas在T-2毒素诱导的软骨细胞凋亡中的作用研究 被引量:9
6
作者 陈静宏 楚雍烈 +4 位作者 曹峻岭 杨占田 师钟丽 郭雄 王治伦 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期583-586,共4页
目的探讨T-2毒素致软骨细胞凋亡与一氧化氮(NO)和Fas凋亡途径的关系。方法采用MTT法检测T-2毒素对软骨细胞存活率的影响;Annexin V/PI法和电镜观察研究T-2毒素致人软骨细胞凋亡的作用;用Griess重氮化法,测定T-2毒素作用于软骨细... 目的探讨T-2毒素致软骨细胞凋亡与一氧化氮(NO)和Fas凋亡途径的关系。方法采用MTT法检测T-2毒素对软骨细胞存活率的影响;Annexin V/PI法和电镜观察研究T-2毒素致人软骨细胞凋亡的作用;用Griess重氮化法,测定T-2毒素作用于软骨细胞培养上清液中NO含量;Western Blotting检测T-2毒素对人软骨细胞表达一氧化氮合酶(iNOS)和Fas蛋白的影响。统计分析T-2毒素诱导人软骨细胞凋亡与其分泌NO、iNOS和Fas蛋白的相关性。结果T-2毒素在浓度为1~2000ng/mL的范围内,对软骨细胞存活率的作用呈较典型的浓度依赖关系和时间依赖关系,而且随着作用时间的延长,浓度依赖关系更为明显;T-2毒素可引起软骨细胞发生凋亡的典型电镜形态改变,并使早期凋亡率和晚期凋亡率明显增加,在一定范围内呈浓度依赖性;T-2毒素刺激软骨细胞分泌NO和表达iNOS蛋白;T-2毒素使凋亡相关蛋白Fas表达增多;软骨细胞分泌NO和表达iNOS蛋白和Fas蛋白量与T-2毒素诱导人软骨细胞凋亡率均有正相关性。结论T-2毒索引起的软骨细胞凋亡与T-2毒素刺激软骨细胞分泌NO和表达iNOS蛋白增多有关,并与凋亡相关蛋白Fas表达增多有关。 展开更多
关键词 T-2毒素 软骨细胞 凋亡 NO INOS FAS
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T-2毒素对软骨细胞合成一氧化氮的影响 被引量:3
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作者 杨占田 陈静宏 +4 位作者 楚雍烈 曹峻岭 王治伦 师钟丽 郭雄 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期150-152,共3页
目的探讨T-2毒素对软骨细胞合成一氧化氮(NO)的影响。方法胎儿软骨细胞体外培养,用MTT法检测软骨细胞存活率;用Griess重氮化法测定软骨细胞培养上清液中NO含量;用Western blot检测软骨细胞一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果T-2毒素在质量... 目的探讨T-2毒素对软骨细胞合成一氧化氮(NO)的影响。方法胎儿软骨细胞体外培养,用MTT法检测软骨细胞存活率;用Griess重氮化法测定软骨细胞培养上清液中NO含量;用Western blot检测软骨细胞一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果T-2毒素在质量浓度在1-2 000μg/L的范围内,软骨细胞存活率对其呈较典型的浓度依赖关系和时间依赖关系,而且随着作用时间的延长,浓度依赖关系更为明显;T-2毒素刺激软骨细胞分泌NO和表达iNOS蛋白。结论T-2毒素引起的软骨细胞损伤和生长抑制与T-2毒素刺激软骨细胞表达iNOS蛋白和分泌NO增多有关。 展开更多
关键词 T-2毒素 软骨细胞 一氧化氮 一氧化氮合酶
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蛋白酶体抑制剂MG132诱导caspase-8依赖的骨肉瘤细胞凋亡机制研究 被引量:2
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作者 严晓波 高翔 +2 位作者 冯洁 师钟丽 杨迪生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期231-236,共6页
目的:探讨蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO(MG132)对人骨肉瘤细胞MG-63的作用以及可能作用机制。方法:将不同浓度的MG132作用于骨肉瘤细胞MG-63,采用显微镜观察形态改变、电镜观察细胞超微结构、MTT检测细胞增殖活力、琼脂糖凝胶电泳检测细胞... 目的:探讨蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO(MG132)对人骨肉瘤细胞MG-63的作用以及可能作用机制。方法:将不同浓度的MG132作用于骨肉瘤细胞MG-63,采用显微镜观察形态改变、电镜观察细胞超微结构、MTT检测细胞增殖活力、琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡、流式细胞仪分析细胞凋亡率以及细胞周期改变、RT-PCR检测基因转录、Western blotting检测蛋白表达水平。结果:MG132能有效诱导人骨肉瘤细胞系MG-63细胞周期在G2-M期的停滞,并引起MG-63的凋亡,出现凋亡的典型形态学改变,同时出现p27kip1蛋白的积累,caspase-8活化蛋白表达增加,Bax∶Bcl-2蛋白含量比例的增高,而对正常的人二倍体成纤维细胞,MG132并未表现诱导其凋亡的活性。结论:MG132引起的人骨肉瘤细胞MG-63的凋亡也许是与caspase-8、p27kip1和Bcl-2蛋白相关的。 展开更多
关键词 蛋白酶抑制剂 骨肉瘤 细胞凋亡 蛋白质p27^Kip1 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8
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大骨节病(发生在中国的一种地方性骨关节病)关节软骨代谢 被引量:1
9
作者 曹峻岭 李思远 +6 位作者 师钟丽 岳燕 孙健 陈静宏 付强 HUGHES Clare E CATERSON Bruce 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期184-184,共1页
目的本研究旨在了解大骨节病(KBD,在中国发生的一种地方性骨关节病)患者软骨CD44和蛋白聚糖的代谢及相关影响。方法用免疫组织化学方法分析分化抗原-44(CD44)、BC-13以及3-B-3(-)在所采集KBD患者和正常人软骨切片中的表达;采用夹心酶联... 目的本研究旨在了解大骨节病(KBD,在中国发生的一种地方性骨关节病)患者软骨CD44和蛋白聚糖的代谢及相关影响。方法用免疫组织化学方法分析分化抗原-44(CD44)、BC-13以及3-B-3(-)在所采集KBD患者和正常人软骨切片中的表达;采用夹心酶联免疫吸附测定法检测血清中可溶性CD44(sCD44)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及基质金属蛋白酶-1的水平。结果苏木素&伊红(HE)染色以及甲苯胺兰染色显示,在KBD病患儿以及成人软骨中有细胞坏死和蛋白聚糖的缺失;免疫组织化学染色发现,KBD成人和儿童患者软骨组织中CD44、BC-13和3-B-3(-)具很强的阳性表达;sCD44I、L-1β和TNF-α在KBD成人和儿童血清的水平明显高于正常成人及儿童对照组,经统计学分析具显著性差异。有意思的现象是,KBD病区正常儿童血清中IL-1β和TNF-α的水平亦明显高于非KBD病区正常儿童的水平,这些都提示可能还有一些未被确定的因素(例如遗传因素)或许对KBD发病具有一定的影响。结论大骨节病患者CD44I、L-1β和TNF-α代谢发生的改变,以及KBD成人和儿童软骨由于聚集蛋白聚糖酶活性增强所产生的蛋白聚糖的丢失,可能是KBD发病机理中起关键作用的重要因素,可以引起病态的关节形成和关节的不稳定,这些都可以导致在KBD患者中发生继发性的骨性关节炎。 展开更多
关键词 地方性骨关节病 软骨代谢 大骨节病 中国 酶联免疫吸附测定法 基质金属蛋白酶-1 免疫组织化学方法 肿瘤坏死因子-Α
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胰岛素样生长因子对体外培养豚鼠肋软骨细胞的影响 被引量:4
10
作者 杨壮群 刘利锋 +6 位作者 曹峻岭 许援朝 师钟丽 邢喆 荔鹏 兰海龙 屠军波 《中国美容医学》 CAS 2005年第1期9-11,i001,共4页
目的:了解胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对体外培养豚鼠肋软骨细胞分裂增殖及功能代谢的影响。方法:体外单层培养豚鼠肋软骨细胞,对照组培养液为无血清 DMEM,实验组在培养液 DMEM 中加入 IGF-1 使其终浓度... 目的:了解胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对体外培养豚鼠肋软骨细胞分裂增殖及功能代谢的影响。方法:体外单层培养豚鼠肋软骨细胞,对照组培养液为无血清 DMEM,实验组在培养液 DMEM 中加入 IGF-1 使其终浓度分别为 10ng/ml、50ng/ml、100 ng/ml, 作用 6 天后, 检测细胞 DNA 含量和培养液中糖醛酸的含量。 结果:IGF-1 在 10~100ng/ml 浓度范围能明显增加培养软骨细胞的 DNA 及糖醛酸的含量,且以 50ng/ml 作用效果最明显,与对照组相比,有统计学意义(P<0.01)。结论:IGF-1 对体外培养肋软骨细胞有刺激,并以剂量依赖性方式影响细胞的增殖及功能代谢。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子 软骨细胞
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丁烯酸内酯诱导软骨细胞凋亡及其机制的研究 被引量:1
11
作者 王世捷 郭雄 +5 位作者 张银刚 任峰玲 彭双清 曹峻岭 师钟丽 张增铁 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期414-417,共4页
目的研究丁烯酸内酯(BUT)致培养软骨细胞的凋亡损伤,探讨软骨细胞凋亡的机制及补硒对软骨细胞凋亡的保护作用。方法体外单层及立体培养胎儿的软骨细胞。BUT毒素浓度分为0.1、1.0和5.0μg/ml。脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸... 目的研究丁烯酸内酯(BUT)致培养软骨细胞的凋亡损伤,探讨软骨细胞凋亡的机制及补硒对软骨细胞凋亡的保护作用。方法体外单层及立体培养胎儿的软骨细胞。BUT毒素浓度分为0.1、1.0和5.0μg/ml。脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸缺口标记技术和AnnexinV染色定性和定量检测软骨细胞凋亡。用多克隆抗体免疫组化检测细胞凋亡相关调控因子Bcl-2、Bax在培养软骨细胞中的表达。结果BUT毒素可引起体外培养软骨细胞凋亡,且与BUT毒素浓度有一定关系。在0~1.0mg/ml之间时,BUT毒素浓度越大,凋亡细胞数量越多;各毒素组培养软骨细胞Bcl-2、Bax的表达显著增高(P<0.05);BUT毒素加硒组软骨细胞凋亡较毒素组明显减少(P<0.05),而且凋亡调控因子Bcl-2、Bax表达阳性率较毒素组降低(P<0.05)。结论BUT毒素可以引起体外培养的软骨细胞凋亡,且与BUT毒素浓度有一定关系,各毒素组Bcl-2、Bax蛋白表达增多。补硒对BUT毒素所致软骨细胞凋亡有一定的保护作用。 展开更多
关键词 BUT毒素 细胞凋亡 相关调控因子 软骨细胞
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多聚蛋白聚糖酶与骨关节疾病 被引量:1
12
作者 李思远 曹峻岭 师钟丽 《生命的化学》 CAS CSCD 2004年第1期55-58,共4页
多聚蛋白聚糖酶是ADAMTS家族中的一员 ,受多种细胞因子的调节。它可以降解多聚蛋白聚糖核心蛋白上至少五种不同的位点 ,使多聚蛋白聚糖降解造成关节软骨变性坏死。关节组织中多聚蛋白聚糖酶及其抑制剂的数量保持着动态平衡 ,从而维持关... 多聚蛋白聚糖酶是ADAMTS家族中的一员 ,受多种细胞因子的调节。它可以降解多聚蛋白聚糖核心蛋白上至少五种不同的位点 ,使多聚蛋白聚糖降解造成关节软骨变性坏死。关节组织中多聚蛋白聚糖酶及其抑制剂的数量保持着动态平衡 ,从而维持关节软骨的正常代谢 ,一旦失衡就会产生病理性损伤。该文从多聚蛋白聚糖酶的结构、活化过程、调节因素以及与其他相关生物大分子的关系多个角度阐述了多聚蛋白聚糖酶研究的进展及其与骨关节疾病的关系。 展开更多
关键词 多聚蛋白聚糖酶 关节软骨 多聚蛋白聚糖 骨关节疾病
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新型羟磷灰石涂层的聚乳酸支架体外细胞相容性研究 被引量:1
13
作者 朱俊锋 黄鑫 师钟丽 《浙江创伤外科》 2013年第1期19-21,共3页
目的研究新型的用固定化尿素酶的方法制备的羟基磷灰石/聚乳酸(HA/PLLA)复合材料的生物相容性和成骨活性。方法将成骨样MG63细胞种植在HA/PLLA和PLLA(对照材料)三维支架材料上。在培养2,4和6天后通过改良的MTT法检测细胞在材料上的增殖... 目的研究新型的用固定化尿素酶的方法制备的羟基磷灰石/聚乳酸(HA/PLLA)复合材料的生物相容性和成骨活性。方法将成骨样MG63细胞种植在HA/PLLA和PLLA(对照材料)三维支架材料上。在培养2,4和6天后通过改良的MTT法检测细胞在材料上的增殖情况;用pNPP磷酸酶检测试剂盒测定ALP含量来评估成骨样细胞在材料上的分化情况;在培养4天后用扫描电镜观察细胞在材料上的形貌变化;用RT-PCR检测磷酸酶(ALP),骨钙素(OC),1型胶原等基因变化情况。结果在培养2天和4天后,HA/PLLA材料上的细胞数量要明显多于PLLA材料组,说明相对于传统的PLLA材料,HA/PLLA材料更能促进成骨细胞的增殖。电镜结果提示,在培养4天后HA/PLLA材料上的MG63细胞铺展在材料孔壁表面,提示细胞具有良好的活力,而PLLA组的细胞表现为圆球形,未见明显的细胞伪足形成,其形态明显不及HA/PLLA材料组。ALP检测结果提示,HA/PLLA组的细胞具有更高的ALP活性。RT-PCT结果也提示,HA/PLLA组具有更高的ALP和OC基因表达,提示HA/PLLA材料更能促进成骨细胞的分化。结论通过固定化尿素酶的方法制备的新型羟基磷灰石/聚乳酸材料相比传统的PLLA材料更能促进成骨细胞的增殖和分化,提示该材料是一种良好的骨组织工程支架材料。 展开更多
关键词 固定化尿素酶 羟基磷灰石 生物活性 MG63
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不同形貌羟基磷灰石纳米颗粒的可控合成及其对骨肉瘤细胞生长的影响 被引量:4
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作者 王江 师钟丽 +1 位作者 黄鑫 刘兵 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期333-336,366,共5页
制备不同形貌羟基磷灰石纳米颗粒,检测其对骨肉瘤细胞生长的影响.采用化学沉淀的方法,可控制备球形和杆状纳米羟基磷灰石,并通过透射电子显微镜(TEM)、原子力学显微镜、傅立叶变换红外光谱仪(FT-IR)和X-射线衍射仪(XRD)对所制备的颗粒... 制备不同形貌羟基磷灰石纳米颗粒,检测其对骨肉瘤细胞生长的影响.采用化学沉淀的方法,可控制备球形和杆状纳米羟基磷灰石,并通过透射电子显微镜(TEM)、原子力学显微镜、傅立叶变换红外光谱仪(FT-IR)和X-射线衍射仪(XRD)对所制备的颗粒进行表征.通过光镜和投射电子显微镜分析不同形貌羟基磷灰石颗粒对骨肉瘤细胞增殖和形貌的影响.结果表明,球形纳米羟基磷灰石对骨肉瘤细胞的抑制作用更明显. 展开更多
关键词 羟基磷灰石 纳米颗粒 颗粒形貌 骨肉瘤细胞 相容性
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T-2毒素对软骨细胞CD44表达的影响 被引量:5
15
作者 李思远 曹峻岭 +2 位作者 师钟丽 曹佩华 李尉勃 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期527-529,共3页
目的 研究T-2毒素对软骨细胞CD44表达的影响,为阐明T-2毒素损伤软骨组织的机制提供科学依据。方法 利用RT-PCR方法检测CD44 mRNA在软骨细胞中的转录情况;利用免疫组化方法检测软骨细胞表面CD44的表达情况。结果 在T-2毒素作用5 d后,毒... 目的 研究T-2毒素对软骨细胞CD44表达的影响,为阐明T-2毒素损伤软骨组织的机制提供科学依据。方法 利用RT-PCR方法检测CD44 mRNA在软骨细胞中的转录情况;利用免疫组化方法检测软骨细胞表面CD44的表达情况。结果 在T-2毒素作用5 d后,毒素组、毒素加硒组CD44 mRNA表达水平均低于对照和对照加硒组。同时免疫组化结果显示,毒素组体外再建软骨组织CD44表达最低,其次为毒素加硒组,对照加硒组最高。结论 T-2毒素对于软骨细胞的CD44表达具有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 T-2毒素 软骨细胞 CD44 基因表达 大骨节病
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镰刀菌毒素丁烯酸内酯对软骨细胞分化的影响及硒的保护效应
16
作者 左弘 郭雄 +4 位作者 王世捷 师钟丽 彭双清 曹峻岭 张增铁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期382-385,共4页
目的研究镰刀菌毒素丁烯酸内酯(BUT)对软骨细胞分化的影响及硒(Se)的保护作用。方法体外单层及立体培养软骨细胞,分为对照组(不作任何处理)、加Se0·1μg/ml对照组、BUT0·1μg/ml组、BUT1·0μg/ml组、BUT5·0μg/ml组... 目的研究镰刀菌毒素丁烯酸内酯(BUT)对软骨细胞分化的影响及硒(Se)的保护作用。方法体外单层及立体培养软骨细胞,分为对照组(不作任何处理)、加Se0·1μg/ml对照组、BUT0·1μg/ml组、BUT1·0μg/ml组、BUT5·0μg/ml组和BUT1·0μg/ml+Se0·1μg/ml组等6个处理组。采用单克隆、多克隆抗体免疫组织化学法,观察各种处理因素对Ⅱ型胶原(ColⅡ)、X型胶原(ColX)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及甲状旁腺激素相关多肽(PTHrP)在培养软骨细胞中表达的影响。结果中、高剂量BUT组Ⅱ型胶原表型表达阳性率明显低于对照组(P<0·05);BUT+Se组Ⅱ型胶原表型表达阳性率明显高于中、高剂量BUT组(P<0·05);低、中、高剂量BUT组培养软骨细胞的bFGF和PTHrP的表达显著增高(P<0·05);各组均未见X型胶原的表型表达。结论BUT可影响软骨细胞Ⅱ型胶原的合成,补硒对BUT损伤软骨细胞有一定的保护作用。 展开更多
关键词 镰刀菌毒素 丁烯酸内酯 软骨细胞分化
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THE EFFECT ON PROTEOGLYCAN METABOLISM OF DEOXYNIVALENOL AND SELENIUM IN THE CULTURED HUMAN FETAL CHONDROCYTES IN VITRO
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作者 岳燕 曹峻岭 +5 位作者 李思远 谢龙 孙健 张增铁 张富军 师钟丽 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 SCIE CAS 2005年第2期57-60,共4页
Objective To investigate the effect of deoxynivalenol (DON) and selenium (Se) on the morphology of chondrocytes and the metabolism of cartilage matrix, and the expression of aggrecanase-1, 2 mRNA in monolayer cultured... Objective To investigate the effect of deoxynivalenol (DON) and selenium (Se) on the morphology of chondrocytes and the metabolism of cartilage matrix, and the expression of aggrecanase-1, 2 mRNA in monolayer cultured chondrocytes in vitro. Methods To plant human fetal chondrocytes on the BMG, the expression of Aggrecanase-1, 2 mRNA were analyzed by RT-PCR, the immunohistochemistry of NITEGE epitope was quantitativly analyzed by the image collection and analysis system. Results With the increase of the concentration of DON, the damage of cultured chondrocytes was more and more severe; the expression of NITEGE epitope showed an increasing trend and the fluorescent bands of aggrecanase-1, 2 mRNA were more and more obvious. After adding Se, the damage was relieved, and there was a decreasing trend of NITEGE epitope expressed in matrix. Conclusion DON can enhance transcription of aggrecanase gene and increase the expression of NITEGE epitope which eventually lead to the metabolic disorder of cartilage proteoglycan. It suggested that Se can partially alleviate the damage of DON on cartilage, but can not completely prevent the occurrence of these changes. 展开更多
关键词 kashin-beck disease (KBD) bone matrix gelatin (BMG) deoxynivalenol (DON) selenium(Se) NITEGE epitope AGGRECANASE
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纳米羟基磷灰石颗粒对成骨样细胞生物活性的尺寸效应 被引量:2
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作者 师钟丽 严世贵 +3 位作者 王卫 吴浩波 赵翔 蔡迅梓 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期489-493,共5页
目的探索不同尺寸的纳米羟基磷灰石颗粒nanohydroxyapatite,nHAP)对成骨细胞增殖和凋亡的生物学效应。方法采用化学沉淀的方法,可控制备不同大小的nHAP,包括20nm球形(20HAP)、40nm球形(40HAP)和80nm球形(80HAP)。通过透射电... 目的探索不同尺寸的纳米羟基磷灰石颗粒nanohydroxyapatite,nHAP)对成骨细胞增殖和凋亡的生物学效应。方法采用化学沉淀的方法,可控制备不同大小的nHAP,包括20nm球形(20HAP)、40nm球形(40HAP)和80nm球形(80HAP)。通过透射电子显微镜、X-射线衍射仪、红外线光谱仪等工具分析颗粒大小、形状以及化学组分。将nHAP颗粒制备成薄膜,与成骨样细胞MG-63细胞共培养5d,通过甲基噻唑基四唑(methylthiazolyltetrazolium,MTT)计数活细胞数量,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,通过透射电子显微镜观察细胞器的变化情况以及nHAP在细胞内的分布。结果可控合成并对20HAP、40HAP和80HAP进行大小组分分析。薄膜细胞共培养结果显示,5天时20HAP组的细胞吸光度值高达1.22±0.13,与空白对照组相比差异无统计学意义(F=6.843,P=0.124)。细胞的凋亡率随nHAP尺寸的增加而增大,与空白对照组相比,差异有统计学意义(q=4.284、5.487、2.933,P〈0.05);各组细胞凋亡率分别为1.12%±0.51%(空白对照组),6.68%±1.04%(20HAP组),10.08%±2.10%(40HAP组)和13.61%±2.45%(80HAP组)。透射电子显微镜结果证实,20HAP能够穿透细胞膜而对细胞超微结构和细胞形态不具有毒性作用。结论成骨细胞增殖和凋亡都与nHAP的尺寸相关,其中20HAP的促进细胞增殖和抑制细胞凋亡作用最佳。 展开更多
关键词 羟基磷灰石类 纳米粒子 成骨细胞
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塞来昔布协同顺铂PI3K/Akt途径诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的实验研究 被引量:6
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作者 陶惠民 刘兵 +1 位作者 师钟丽 冯洁 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期684-689,共6页
目的探讨环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法塞来昔布(50μmol/L或100μmol/L)和(或)顺铂(10μg/ml)作用骨肉瘤MG-63细胞48h后,MTT法测定细胞增殖的抑制率,电子... 目的探讨环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法塞来昔布(50μmol/L或100μmol/L)和(或)顺铂(10μg/ml)作用骨肉瘤MG-63细胞48h后,MTT法测定细胞增殖的抑制率,电子显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR法检测基因水平COX-2表达变化,Western blot检测COX-2及凋亡相关蛋白表达变化。PI3K抑制剂Wortmannin作用MG-63细胞48h,检测蛋白表达变化。结果塞来昔布导致MG-63细胞阻滞在G1期,通过激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-9的内源性凋亡途径诱导细胞凋亡;顺铂单药作用后骨肉瘤MG-63细胞凋亡率为5.93%,而联合应用塞来昔布50μmol/L或100μmol/L后,凋亡率分别为6.66%和37.15%,与顺铂联合具有明显的协同作用;COX-2蛋白表达未降低。塞来昔布联合顺铂明显降低PI3K/Akt、survivin、Bcl-2的表达,检测到caspase-9、caspase-3的激活和PARP裂解片段。Wortmannin作用MG-63细胞48h,检测到pAkt(Thr308)、Bcl-2、survivin表达下调。结论塞来昔布可通过非COX-2途径诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡,与PI3K/Akt、survivin、Bcl-2蛋白相关,并且PI3K/Akt途径在survivin、Bcl-2表达调控中发挥重要作用。这可能是塞来昔布药物干预的中心环节。 展开更多
关键词 骨肉瘤 顺铂 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
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T-2毒素和硒对人软骨蛋白聚糖酶的影响 被引量:3
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作者 于伯泉 曹峻岭 +5 位作者 陈静宏 师钟丽 王伟 杨占田 马天有 王世捷 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期46-50,共5页
目的 研究T-2毒素和硒对人软骨蛋白聚糖代谢的影响.方法 体外培养胎儿软骨细胞,根据施加的实验措施将其分为8组,对照组(T-2毒素:0 mg/L,硒:0 mg/L)、1、10、20μg/L T-2毒素组、加硒(0.1mg/L)组、1、10、20 μg/L T-2毒素加硒(0.... 目的 研究T-2毒素和硒对人软骨蛋白聚糖代谢的影响.方法 体外培养胎儿软骨细胞,根据施加的实验措施将其分为8组,对照组(T-2毒素:0 mg/L,硒:0 mg/L)、1、10、20μg/L T-2毒素组、加硒(0.1mg/L)组、1、10、20 μg/L T-2毒素加硒(0.1 mg/L)组,每组设3个平行样.在T-2毒素和(或)硒作用5d后,采用免疫蛋白印迹法检测软骨细胞蛋白聚糖的蛋白表达水平,用RT-PCR方法检测软骨细胞蛋白聚糖酶-1和蛋白聚糖酶-2的mRNA表达水平.结果 硒、T-2毒素对蛋白聚糖的蛋白表达量、蛋白聚糖酶-1 mRNA表达水平、蛋白聚糖酶-2的mRNA表达水平有影响(F=0.294、27.71,107.45、362.25,34.68、22.26,P均<0.05),硒与T-2毒素存在交互作用(F=79.99、230.76、388.33,P均<0.05),表现为拮抗作用.在硒水平为0 mg/L时,1、10、20 μg/L的T-2毒素组蛋白聚糖的蛋白表达(0.278±0.015、0.235±0.029、0.195±0.028)均低于0 mg/L的T-2毒素组(0.472±0.0358,P均<0.05);在硒水平为0.1 mg/L时,1、10、20 μg/L的T-2毒素组的蛋白聚糖的蛋白表达(0.399±0.028、0.299±0.020、0.263±0.019)均高于0 mg/L的T-2毒素组(0.197±0.018,P均<0.05).在T-2毒素分别为1、10、20μg/L时,0.1 mg/L硒组的蛋白聚糖的蛋白表达均高于0 mg/L硒组(P均< 0.05).在硒水平为0 mg/L时,1、10、20μg/L的T-2毒素组蛋白聚糖酶-1 mRNA表达(0.535±0.033、1.071±0.043、1.454±0.058)均高于0 mg/L的T-2毒素组(0.481±0.023,P均<0.05);在硒水平为0.1 mg/L时,1、10、20μg/L的T-2毒素组的蛋白聚糖酶-1 mRNA表达(1.057±0.048、0.555±0.036、0.902±0.045)均高于0 mg/L的T-2毒素组(0.346±0.020,P均<0.05).在硒水平为0 mg/L时,1、10、20μg/L的T-2毒素组蛋白聚糖酶-2 mRNA表达(0.596±0.038、0.656±0.033、0.949±0.049)均高于0 mg/L的T-2毒素组(0.387±0.020,P均<0.05);在硒水平为0.1 mg/L时,1、10、20μg/L的T-2毒素组的蛋白聚糖酶-2 mRNA表达(0.600±0.040、0.453±0.031、0.164±0.011)均低于0 mg/L的T-2毒素组(1.021±0.046,P均<0.05);在T-2毒素分别为10、20μg/L时,0.1 mg/L硒组的蛋白聚糖酶-1和蛋白聚糖酶-2 mRNA表达均低于0 mg/L硒组(P均< 0.05).结论 T-2毒素通过上调蛋白聚糖的主要代谢酶蛋白聚糖酶-1和蛋白聚糖酶-2达到降解蛋白聚糖的作用,微量元素硒对T-2毒索引起的软骨细胞蛋白聚糖降解有一定保护作用. 展开更多
关键词 软骨细胞 大骨节病 蛋白聚糖酶 T-2毒素
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