电针对干眼大鼠角膜自噬相关蛋白调节作用的研究

目的观察电针对干眼大鼠角膜自噬的调节作用。方法将雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常组、模型组、电针组和假针组。除正常组外,其余3组均采用皮下注射东莨菪碱溶液配合吹风制备大鼠干眼模型。电针组和假针组造模后分别予电针及假针刺干预。检测大鼠干预前后泪膜破裂时间和泪液分泌量,并评估角膜荧光素染色的分值;应用透射电镜观察大鼠角膜组织的超微结构;采用蛋白免疫印迹(Western blotting)技术检测大鼠角膜微管相关蛋白轻链3(microtubule-associatedprotein 1 light chain 3,LC3)、P62和Beclin-1的表达,应用实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测角膜LC3 mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠泪液分泌量降低,泪膜破裂时间缩短,角膜荧光素染色评分升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);角膜上皮细胞肿胀,线粒体明显损伤;角膜LC3Ⅱ和Beclin-1蛋白表达减少,P62蛋白表达增多,LC3 mRNA表达减少,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠泪液分泌量升高,泪膜破裂时间延长,角膜荧光素染色评分降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);角膜上皮细胞轻微肿胀,有自噬小体形成;角膜LC3Ⅱ和Beclin-1蛋白表达增多,P62蛋白表达降低,LC3 mRNA表达增多,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,假针组细胞器肿胀明显,线粒体损伤明显;其余指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论电针可以促进干眼大鼠角膜组织中自噬的发生,促进自噬可能是电针治疗干眼的潜在机制。