海洋中产胆固醇氧化酶细菌的筛选及其发酵条件优化

利用菌落染色法从海洋中分离、筛选高产胆固醇氧化酶的菌株,所得菌株经分子生物学技术进行鉴定,采用单因素试验对其产酶条件进行优化,并利用硫酸铵沉淀、凝胶过滤层析法对酶进行分离纯化。结果表明,以胆固醇为唯一碳源,筛选出具有高胆固醇氧化酶活性的菌株XLH059,酶活力为0.407 U/m L;菌株XLH059被鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus);菌株XLH059的最佳产酶条件为发酵周期24 h,发酵温度26℃,接种量10%,初始pH值7.0,装液量100 m L/250 m L,转速200 r/min,最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和蛋白胨,胆固醇含量0.5%。在此优化条件下,胆固醇氧化酶活力为0.72 U/m L,是优化前的1.76倍;经分离纯化获得分子质量约为59 kDa的胆固醇氧化酶。

海洋低温胆固醇氧化酶生产菌株诱变育种及酶学性质研究

利用一株来源于海洋的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)XLH059进行紫外诱变、化学诱变及复合诱变,并对诱变菌株的遗传稳定性及胆固醇氧化酶酶学性质进行研究。结果表明,通过复合诱变育种得到酶活力最高、传代后酶活稳定的菌株XL-c23,其所产胆固醇氧化酶的最适pH值为7.0,酶活力在pH 6.0~8.0有较好的稳定性,胆固醇氧化酶最适温度为30 ℃,30 ℃以下酶活力较为稳定。

基于层次分析法的创新型中小企业融资能力

根据创新型中小企业的自身特性,以市场环境为出发点,建立创新型中小企业融资能力评价含20个指标的三级指标体系,采用层次分析法,依据专家评分计算出各指标相对权重,并选取深圳证券交易所20家创新型中小企业的2014年公司年报相关数据进行实证分析。实证结果表明利用层次分析法能够很好地对创新型中小企业融资能力进行合理评价与分类。

海洋低温肌氨酸氧化酶生产菌株的筛选、鉴定及酶学特性研究

为获得更适应低温环境的产肌氨酸氧化酶菌株,该研究从渤海海泥中分离、筛选高产低温肌氨酸氧化酶菌株,采用形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定,并对其所产的肌氨酸氧化酶的酶学特性进行初步研究。结果表明,共分离到产肌氨酸氧化酶的菌株8株,其中菌株LYH18的肌氨酸氧化酶活力最高,为1.65 U/mL;菌株LYH18被鉴定为海泥芽孢杆菌(Bacillus oceanisediminis);肌氨酸氧化酶的最适作用温度和pH分别为25 ℃、8.0,在温度25~40 ℃、pH 7.0~10.0的范围内,酶活性较稳定,该酶属于低温酶。

菌株LYH18发酵条件优化及肌氨酸氧化酶的分离纯化

以海洋来源的芽孢杆菌(Bacillussp.)LYH18为出发菌株,优化其发酵条件,并对其所产肌氨酸氧化酶(SOX)进行分离纯化。结果表明,其最适产酶发酵条件为肌酸添加量1.0%,酵母膏添加量0.8%,MgSO4·7H2O添加量0.05%,KH2PO4添加量0.2%,K2HPO4添加量0.05%,初始pH值为7.0,培养温度25℃,装液量40mL/100mL。在此最佳发酵条件下,肌氨酸氧化酶酶活为4.45U/mL。通过十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析肌氨酸氧化酶,其纯化后的分子质量为43kDa。

外侧入路关节造影辅助治疗儿童孟氏骨折

目的探讨外侧入路关节造影辅助治疗在儿童孟氏骨折的应用效果。方法回顾性分析赤峰学院附属医院于2009年6月~2020年6月诊治的54例儿童孟氏骨折患者的临床资料,根据是否行肘关节造影分为造影组(24例)和非造影组(30例)。分析对比两组患者的手术时间、透视次数、住院费用、术后VAS评分、骨折愈合时间、临床疗效以及并发症发生情况。结果造影组患者的手术时间和透视次数均明显少于非造影组(P<0.05);两组患者的住院费用、术后VAS评分、骨折愈合时间、肘关节屈伸活动度和前臂旋转活动度以及临床疗效优良率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者分别各有1例出现克氏针钉尾激惹症状,拔出后消失;非造影组发生骨骺早闭2例,桡骨头再脱位1例,造影组无骨骺早闭和桡骨头再脱位发生,也无造影剂过敏等不良反应发生。两组患者均无切口感染、神经损伤、骨折畸形愈合、桡骨头坏死、关节僵硬、骨化性肌炎等并发症发生;造影组患者的并发症发生率明显低于非造影组(P<0.05)。结论除了能节省手术时间、减少辐射外,采用外侧入路肘关节造影辅助治疗儿童孟氏骨折还能减轻患者术后疼痛及经济负担,不影响临床治疗效果。

论林业技术推广在生态林建设中的作用及改进措施

林业技术推广在可持续发展的战略指导下,需要切实的从基层林业生产发展出发,促进生态林建设发展。基于此,本文就从林业技术推广的价值、问题以及策略几个角度展开探讨。

切开复位治疗儿童难复性BadoⅠ型孟氏骨折

目的探讨切开复位治疗儿童难复性BadoⅠ型孟氏骨折的临床疗效。方法回顾性分析2012年6月至2018年6月间赤峰学院附属医院骨科收治的18例儿童难复性BadoⅠ型孟氏骨折患者的临床资料,均采用桡骨头切开复位结合尺骨闭合复位经皮克氏针内固定术治疗,其中男14例,女4例;年龄5.8~14.2岁,平均(9.2±2.4)岁,观察并记录手术时间、术中出血量、透视次数、骨折愈合时间和并发症发生情况,末次随访时按Mackay疗效评定标准评价术后患肢功能。结果本组18例患者均获得随访,时间8~32个月,平均(11.9±6.4)个月。手术时间32.8~64.3 min,平均(49.2±10.2)min;术中出血量14.7~42.4 mL,平均(24.5±9.4)mL;X线透视次数2~14次,平均(4.3±3.1)次。所有患者均达骨性愈合,愈合时间4~16周,平均(8.2±3.4)周;根据Mackay疗效评定标准,优14例,良4例,优良率100%;术后有1例发生钉尾刺激征,均未发生感染、神经误损伤、骨骺损伤、尺骨骨折再移位、桡骨头再脱位、关节僵硬、骨化性肌炎、克氏针折断等并发症。结论桡骨头切开复位结合尺骨闭合复位经皮克氏针内固定术治疗儿童难复性BadoⅠ型孟氏骨折的临床疗效满意,具有微创、操作简单、固定可靠、费用低等优点。

应用环介导等温扩增技术快速检测血培养阳性瓶中的七种常见病原菌

目的:采用环介导等温扩增(LAMP)技术扩增血培养瓶阳性标本中病原菌的DNA,实现血流感染病原体的快速检测。方法:设计七种常见血流感染病原菌的LAMP特异性引物;应用LAMP技术分别检测七种菌的标准菌株和5株临床菌株,验证引物的特异性;回顾性实验应用LAMP检测已用传统鉴定方法确证过的血培养阳性标本;前瞻性实验应用LAMP与传统培养方法同时检测血培养阳性标本;统计分析该方法检测血流感染病原体的特异性、灵敏度等临床性能。结果:回顾性实验显示该技术的灵敏度为93%,特异性达100%,准确度为94.80%,整体和单个菌的检测数据通过χ^(2)检验计算后都显示其与传统技术无统计学差异。前瞻性实验显示该技术的灵敏度为83%、特异性为100%,准确度为88.23%,与传统技术有较好的一致性,无统计学差异;该技术还能检测混合感染,优于其他核酸检测技术。结论:LAMP技术有快速简便、高灵敏度、高特异性等特点,作为血液感染的实验室诊断手段具有较好的应用前景。

全膝关节表面置换治疗骨性关节炎

由于我国人口的老龄化,膝关节骨性关节炎患者逐渐增多,目前全膝关节表面置换(TKA)是治疗严重膝关节骨性关节炎比较理想的方法。2009~2010年10月,我科共行膝关节表面置换6例10膝,取得了满意的效果。现报道如下。1资料与方法1.1一般资料本组6例(10膝)均为女性,年龄70~76岁单侧2例,双侧4例。左侧5例,右侧5例。骨性关节炎病史10~20年。均有患膝疼痛,肿胀屈曲。内翻式或外翻畸形。屈伸功能障碍,膝关节X线片显示严重骨质增生。关节间隙变窄,下肢X线异常假体采用北京百慕航科技有限公司的表面轨道式人工关节和北京爱康宜城医疗器械有限公司的膝关节假体。

我笑这春天的飞短流长（外一首）

我蜷缩在时空里 终日饮着相思和别离 任你抽身和度量 所有的爱情