骆驼蓬子活性成分的筛选及小鼠乳腺炎治疗效果评价

为探明骆驼蓬(Peganum harmala L.)种子的抑菌作用及小鼠乳腺炎的治疗效果。本研究采用溶剂提取和超声辅助提取等方式对骆驼蓬子中的多糖、多酚、生物碱、黄酮类活性成分进行提取;通过琼脂平板扩散法(打孔法)和微量肉汤法对各提取物的抑菌效果进行检测;通过急性毒性预试验和最大耐受量试验对抑菌效果显著的提取物进行安全性检测;最后用于小鼠乳腺炎模型,对其治疗效果进行评价。结果表明,骆驼蓬子中含有多糖、多酚、生物碱、黄酮类活性物质,相应提取物的含量分别为36.90%±0.27%、23.18%±0.36%、22.24%±0.08%、20.46%±0.14%。抑菌试验结果显示,骆驼蓬子多酚和黄酮的抑菌效果较为显著,对大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、无乳链球菌(S.agalactiae)的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)分别在0.7813~1.5625 mg/mL和0.7813~12.5000 mg/mL。安全性试验结果显示,骆驼蓬子多酚和黄酮对小鼠的半数致死量(LD_(50))值均大于1200 mg/kg,其最大耐受量是4.5 g/kg。小鼠乳腺炎治疗结果显示,骆驼蓬子多酚和黄酮能够显著降低乳腺组织中的TNF-α、IL-6含量及菌落数量(P<0.05),减少血管扩张和炎性细胞浸润程度,加快腺泡结构和功能的恢复。其中,骆驼蓬子多酚的作用效果更为显著(P<0.05)。骆驼蓬子多酚不但对引发奶牛乳腺炎的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌具有较强的抑制效果,而且能够降低金黄色葡萄球所致的乳腺炎小鼠乳腺组织中的菌落数量、IL-6和TNF-α含量,增强乳腺组织修复能力。

葫芦多糖及其硫酸化修饰物抗新城疫病毒活性

为了探究硫酸化修饰对葫芦多糖(LSP)抗新城疫病毒(NDV)活性的影响,本试验利用Sephadex G-100方法纯化得到LSP,通过氯磺酸-吡啶法得到硫酸化修饰的sLSP_(1.3),用苯酚硫酸法对LSP及sLSP_(1.3)进行多糖含量、蛋白含量及硫酸根取代度测定,经红外光谱测定LSP及sLSP_(1.3)的官能团变化,结果显示,氯磺酸-吡啶法能够对LSP进行硫酸化修饰。利用MTT法测定LSP及sLSP_(1.3)对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全质量浓度,结果LSP及sLSP_(1.3)的安全质量浓度分别为50,10 mg/L,LSP经硫酸化修饰后对CEF的安全质量浓度下降。在安全质量浓度范围内以3种不同的加药方式(先添加LSP后接种病毒、先接种病毒后添加LSP、LSP和病毒混合后同时加入)检测LSP与sLSP_(1.3)体外对NDV活性的影响,结果显示,LSP经硫酸化修饰后其抗NDV活性明显增强,其中sLSP_(1.3)在5 mg/L时抗NDV感染能力和杀灭NDV的作用显著高于40 mg/L时(P<0.05)。检测LSP与sLSP_(1.3)对新城疫模型鸡血清HI抗体效价及攻毒后的死亡率、保护率和痊愈率,结果显示,攻毒后各治疗组及病毒对照组抗体都逐渐升高,sLSP_(1.3)组效价显著高于病毒对照组(P<0.05),但LSP和sLSP_(1.3)之间无显著性差异(P>0.05)。攻毒后病毒对照组死亡率高达86.7%,而sLSP_(1.3)组死亡率降低为66.7%(P<0.05);治疗组中sLSP_(1.3)组的保护率显著高于LSP组,痊愈率达16.7%,保护率达33.3%。上述结果表明,LSP经硫酸化修饰后抗NDV活性显著增强且LSP使用的有效质量浓度显著降低。