亚甲蓝对不同时期脓毒症大鼠肝脏诱导型一氧化氮合酶的影响

目的 探讨亚甲蓝对不同时期脓毒症大鼠肝脏诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响.方法 按随机数字表法将126只成年雌性Wistar大鼠分为假手术组、脓毒症组和亚甲蓝组,每组再按术后第0、6、12、18、24、30、36 h给药分为7个亚组,每个亚组6只.采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症动物模型;假手术组仅行开腹、分离盲肠系膜,不进行结扎和穿孔.亚甲蓝组术后0、6、12、18、24、30、36 h经尾静脉注射亚甲蓝15 mg/kg;脓毒症组和假手术组给予等量生理盐水.各组于给药后6 h处死大鼠取肝组织,用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）检测iNOS mRNA表达,用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测iNOS蛋白表达.结果 与假手术组比较,脓毒症组术后0、6、12、18 h肝组织iNOS mRNA表达明显升高（2-ΔΔCt：16.66±2.81比1.00±0.36,12.26±5.78比1.00±0.30,6.08±1.33比1.00±0.18,2.42±0.64比1.00±0.12,均P〈0.01）,24 h后则无明显改变;术后6、12、18、36 h肝组织iNOS蛋白表达明显升高（灰度值：0.350±0.011比0.210±0.005,1.460±0.085比0.090±0.005,0.230±0.012比0.180±0.008,0.310±0.017比0.200±0.010,均P〈0.01）.与脓毒症组比较,亚甲蓝组术后0、12、18 h肝组织iNOS mRNA表达明显降低（2-ΔΔCt：9.90±3.06比16.66±2.81,1.56±0.58比6.08±1.33,1.11±0.15比2.42±0.64,均P〈0.05）,术后6、12、18、36 h肝组织iNOS蛋白表达明显降低（灰度值：0.150±0.008比0.350±0.011,0.950±0.009比1.460±0.085,0.150±0.007比0.230±0.012,0.170±0.009比0.310±0.017,均P〈0.05）.结论 脓毒症大鼠24 h内肝脏iNOS mRNA和蛋白表达明显升高;亚甲蓝可明显抑制脓毒症时肝脏iNOS表达.