抗小鼠移码因子1蛋白多抗制备及其在脂肪细胞分化中的表达

目的制备小鼠上游移码因子1(UPF1)蛋白多克隆抗体并探讨脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白的表达。方法构建UPF1蛋白表达载体,制备并纯化兔抗小鼠UPF1抗体;诱导3T3-L1细胞分化,并用免疫共沉淀(Co IP)方法观察脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白的表达。结果 1)制备了效价≥64万且与重组m UPF1蛋白和天然m UPF1蛋白均有很强的特异性结合能力的兔抗小鼠UPF1的多克隆抗体;2)小鼠3T3-L1细胞成脂诱导过程中UPF1蛋白表达量未发生明显变化;3)脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白与UPF2蛋白相互作用增加。结论 1)以m UPF1蛋白C端550个氨基酸为抗原制备的抗体能够有效识别m UPF1蛋白;2)在脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白与UPF2蛋白互作增强。