烟酰胺核糖对EAE小鼠的外周抗炎作用及其机制研究

目的探讨烟酰胺核糖(NR)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的外周抗炎作用及机制。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35~55肽段(MOG35-55)诱导C57BL/6雌性小鼠制备EAE模型,随机分为EAE模型组和NR治疗组。EAE模型组每只小鼠按200μl/d剂量灌胃给予生理盐水,NR治疗组每只小鼠按500 mg/kg、200μl/d剂量灌胃给予NR,观察并记录各组小鼠临床评分和体质量。免疫后第28天处死小鼠,制备脾脏和脊髓冰冻切片,提取脊髓组织蛋白。HE染色检测外周炎性细胞浸润脊髓,免疫荧光染色检测小鼠脊髓CD4^(+)T细胞、CD68^(+)巨噬细胞数量,Western blot检测小鼠脊髓IFN-γ、IL-1β表达,免疫荧光染色检测小鼠脾脏ROCK-Ⅰ^(+)细胞、TLR4^(+)细胞、p-NF-κB^(+)细胞、TNF-α^(+)细胞、IL-1β^(+)细胞、IFN-γ^(+)细胞、IL-6^(+)细胞、IL-10^(+)细胞、IL-17^(+)细胞、i NOS^(+)细胞、Arg-1^(+)细胞数量。结果与EAE模型组相比,NR显著推迟EAE小鼠发病时间(P<0.05),降低临床评分(P<0.05或P<0.01),减轻体质量丢失,阻止外周炎性细胞浸润脊髓(P<0.01),减少脊髓CD4^(+)T细胞、CD68^(+)巨噬细胞数量(P<0.01),下调脊髓IFN-γ、IL-1β炎性因子表达(P<0.05),抑制小鼠脾脏ROCK-Ⅰ、TLR4、p-NF-κB表达(P<0.01),减少脾脏IFN-γ、i NOS、IL-6等促炎因子分泌(P<0.05或P<0.01),促进脾脏抗炎因子Arg-1、IL-10分泌(P<0.05或P<0.01)。结论NR能够有效缓解EAE小鼠临床症状,显著减轻外周和中枢神经系统炎症反应,其机制可能与抑制EAE小鼠脾脏Rho/ROCK信号通路和TLR4/NF-κB信号通路有关。

黄连中小檗碱提取方法研究进展

小檗碱是一种从黄连等植物中提取的季胺类生物碱,对多种疾病具有显著疗效,已在临床上广泛应用。对黄连中小檗碱的各种提取工艺及工艺原理进行了概述,并比较了不同提取方法的优缺点,以期为同类研究提供参考。

大孔吸附树脂分离纯化黄连小檗碱研究

目的:筛选适用于分离纯化黄连小檗碱的大孔吸附树脂。方法:本文考察了10种大孔吸附树脂,筛选出了适用于分离纯化黄连小檗碱的D101大孔吸附树脂,其静态吸附量为18.08 mg/g,静态和动态解吸率均为95%以上。结果:选用D101大孔吸附树脂,先水洗除杂,再用4～5倍树脂体积的60%乙醇洗脱,浓缩干燥,产品中小檗碱的含量为30.02%,产品收率为9.12%。结论:本法简单、易行,适合黄连小檗碱的提取。

黄连中小檗碱的提取工艺

运用正交实验设计探讨黄连CoptischinensisFranch.中小檗碱的提取工艺。由极差分析和方差分析得知,在本实验考察的影响因素中,温度对提取的影响最大,固液比对提取的影响次之,提取次数对提取的影响最小。实验结果确定黄连中小檗碱的最佳提取条件为:温度为60℃,9倍体积的50%乙醇,提取2次,每次1h。在此条件下,黄连中小檗碱的提取率达到91%以上。分光光度法测定小檗碱的平均回收率为97 38%。6次平行的相对标准偏差CV为1 38%。

基于学生自主探究教学法开展生物化学课程思政的探索

目的探讨学生自主探究教学法在开展生物化学课程思政中的教学效果。方法2021年3—7月选取山西大同大学护理学专业两个班,随机分为试验组和对照组。试验组采用学生自主探究教学法开展生物化学课程思政:学生在教师的指导下,课前自主挖掘专业知识蕴含的思政内涵,择优开展课程思政课堂教学,课后基于线上教学活动巩固、拓展、延伸学习成果。对照组采用传统教学法,以教师讲、学生听的方式开展生物化学课程思政。课程教学结束后,通过调查问卷和学习成绩统计,分析、评价不同教学法的教学效果。结果与传统教学法相比,应用学生自主探究教学法开展生物化学课程思政,学生思政素质、综合能力显著提升,学习成绩明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论运用学生自主探究教学法开展生物化学课程思政,教学效果良好。

师生联合开展生物化学课程思政的设计与思考

在“大思政”教育背景下,文章从师生充分认识开展生物化学课程思政的重要意义,到师生联合开展生物化学课程思政教学的课前准备、课堂实践、课后拓展以及构建生物化学课程思政多元化教学评价体系,深入分析探讨以学生为中心,以立德树人为导向,以课程思政任务为驱动,将教师引导示范式课程思政与学生自主挖掘式课程思政相结合,将现代信息技术与课程思政教育教学相融合,基于线上线下混合式教学引导学生全过程参与课程思政教学,师生共同开展生物化学课程思政的教学策略和实现路径。笔者通过创新生物化学课程思政教育教学模式,将学生被动接受思政教育转变为师生共同开展思政教育,有效提升思政教育亲和力,提高学生思政素质、知识水平和综合能力,促进新时代德才兼备的高素质应用型医学人才培养。

烟酰胺核糖对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠T细胞的免疫调节作用

目的探讨烟酰胺核糖(NR)治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的效果以及对T细胞的免疫调节作用。方法C57BL/6雌性小鼠通过髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG_(35-55))诱导,制备EAE小鼠模型,随机分为EAE组和NR组。从免疫后第3天到免疫后第27天,EAE组灌胃给予生理盐水,NR组灌胃给予NR,连续给药25 d。从免疫当天到免疫后第28天,记录各组小鼠临床评分和体质量。免疫后第28天处死小鼠,制备脾细胞悬液和脊髓组织冰冻切片。HE染色、髓鞘染色分别检测脊髓炎性细胞浸润和髓鞘脱失,免疫荧光染色检测脊髓CD4^(+)T细胞数量,流式细胞术检测脾脏CD4^(+)T细胞亚群比例,ELISA检测脾细胞培养液中IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-17含量。结果与EAE组相比,NR能有效推迟EAE发病时间,缓解EAE临床症状(P<0.05),减少小鼠体质量丢失,抑制外周炎性细胞浸润脊髓(P<0.01),减轻髓鞘脱失(P<0.05),减少脊髓CD4^(+)T细胞数量(P<0.05),下调脾脏CD4^(+)IFN-γ^(+)T细胞、CD4^(+)IL-17^(+)T细胞比例,上调CD4^(+)IL-10^(+)T细胞、CD4^(+)FOXP3^(+)T细胞比例(P<0.05),减少EAE小鼠脾细胞培养液中炎性因子IFN-γ、IL-17分泌,增加抗炎因子IL-4、IL-10分泌(P<0.05)。结论NR可能通过上调EAE小鼠脾脏抗炎型T细胞亚群比例,下调促炎型T细胞亚群比例;促进EAE小鼠脾脏抗炎因子分泌,抑制促炎因子分泌;调节机体免疫平衡,减轻机体炎症反应,改善EAE小鼠临床症状。

生物化学理论教学改革初探

生物化学是医学院校一门重要的基础课程,多学科融合的特点决定了其理论教学的难度。在分析目前生物化学理论教学存在问题的基础上,从教学内容、教学方法、学生考核办法等方面对生物化学理论教学改革进行了探讨。

不同方法及溶剂对黄连小檗碱的提取效果比较

本文采用3种不同方法,分别以乙醇、丙酮、水作为提取溶剂对黄连小檗碱进行提取。以盐酸小檗碱作为对照,用标准曲线法测定各种溶剂及方法提取液中黄连小檗碱的提取率。实验结果表明:采用回流提取法,提取溶剂为乙醇,黄连小檗碱的提取率达到81%以上,标准偏差为0.0005,相对标准偏差为0.06%。

不同方法对黄连小檗碱的纯化比较研究

目的:比较大孔吸附树脂和液液萃取两种方法对黄连小檗碱的纯化效果,为开发利用黄连小檗碱提供参考。方法:采用大孔吸附树脂法和液液萃取两种方法。结果:以标准品盐酸小檗碱为对照,大孔吸附树脂在产品重量和产品中小檗碱含量方面均明显高于液液萃取,其中D101大孔吸附树脂对黄连小檗碱有较好的纯化效果,产品中小檗碱含量达29.82%。结论:黄连小檗碱为传统中药材黄连的主要成分,在抗菌消炎、心血管疾病治疗等方面显示出良好的治疗效果。具有广阔的应用前景。

黄连小檗碱的结晶条件研究

本文考察了不同溶剂、不同pH值条件对黄连小檗碱结晶的影响,确定了精制黄连小檗碱的结晶条件。以盐酸小檗碱标准品为对照,通过HPLC方法 ,对小檗碱进行定量检测。实验结果表明:用水作为溶剂,pH=1,5次结晶后,产品中黄连小檗碱含量为97.78%,产品收率为4.60%。

氨基酸的抑菌作用研究

目的研究 19种氨基酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌作用。方法用氨基酸饱和液滤纸片分别对上述菌的每个混菌液培养基平板做定性抑菌实验 ;将有抑菌作用的氨基酸不同浓度对此三种菌的LB培养基混菌液做定量抑菌实验。结果半胱氨酸对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用 ,最佳抑菌时间为 6h ,最适抑菌浓度为 0 .6 2 5 % ,此条件下抑菌率为 92 .6 2 %。结论半胱氨酸可以抑制金黄色葡萄球菌。

黑骨藤石油醚提取物成分及抑菌活性研究

目的提取黑骨藤非极性成分,测定其主要成分及含量并研究其抑菌作用,为黑骨藤的进一步开发利用提供依据。方法以石油醚提取黑骨藤非极性成分,利用GC-MS联用技术并结合标准谱库检索,得出黑骨藤非极性的主要成分及含量,以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、粪肠球菌、绿脓杆菌、藤黄微球菌、青霉、白色念株菌和黄曲霉为供试菌研究非极性成分对于上述微生物的最低抑菌浓度和抑菌圈大小。结果共分离了39种成分和鉴定了其中28个成分,占非极性成分的71.8%。结论用石油醚提取黑骨藤全株非极性成分,利用GC-MS联用技术并结合标准谱库的检索,从得到的39个化合物中鉴定了28种成分,检出成分占非极性成分的71.8%。其中棕榈酸含量最高,占非极性成分总量的22.94%。黑骨藤非极性成分对受试菌种中大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、藤黄微球菌、粪肠球菌、黄曲霉、白色念珠球菌有明显的抑菌作用,对枯草杆菌、青霉效果不明显。

快速制备鼻腔给予LPS诱导帕金森病动物模型及评价

目的:经鼻腔途径给予脂多糖(LPS)可诱导帕金森病(PD)动物模型,但模型的建立需5个月之久。本课题旨在探讨一个快速建立PD模型的方法。方法:C57BL/6小鼠随机分为对照组和LPS模型组,每组9只。LPS模型组小鼠通过鼻腔滴入LPS(3 mg/kg),每侧鼻孔滴10μl,每3 d一次,连续7周,共计16次,对照组鼻腔滴入等体积生理盐水。7周后通过行为学实验检测小鼠运动能力,免疫荧光染色检测黑质多巴胺能神经元,Western blot检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)、α-突触核蛋白的表达,HPLC检测黑质神经递质(多巴胺、3,4-二羟基苯乙酸、高香草酸、去甲肾上腺素、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸)含量。结果:与对照组相比,LPS模型组小鼠运动能力明显下降,黑质多巴胺能神经元数量明显减少,黑质TH表达明显降低、α-突触核蛋白的表达显著增加,黑质神经递质含量明显减少。结论:本研究通过增加每次LPS经鼻腔给药剂量、减少给药次数,建立了符合行为学及病理学特征的PD小鼠模型,并将制备过程减为7周,可明显缩短PD发病机制、治疗策略及治疗效果的研究周期。

Fasudil促进体外培养骨髓源神经干细胞的增殖与存活

目的探讨法舒地尔（Fasudil）对体外培养骨髓源神经干细胞（BMNSC）增殖和存活的影响。方法取3～4周龄的C57BL／6小鼠，分离骨髓基质细胞并诱导产生细胞球，用免疫荧光染色鉴定细胞类型。羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记细胞，检测Fasudil促进BMNSC增殖能力。利用脂多糖（LPS）和γ干扰素（IFN-γ）联合处理BV-2小胶质细胞制备炎性条件培养液处理BMNSC，Fasudil干预，通过流式细胞术检测线粒体膜电位、碘化丙啶（PI）荧光值，探讨Fasudil对BMNSC的保护效果。结果免疫荧光染色证明骨髓源细胞球为神经上皮干细胞蛋白（nestin）阳性的神经干细胞。Fasudil处理明显降低CFSE平均荧光值。在LPS和IFN-γ联合作用下，BV-2小胶质细胞释放更多的白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）等炎性细胞因子，显著高于PBS处理组。该炎性条件培养液导致BMNSC线粒体膜电位明显降低并诱导更多的细胞死亡，而Fasudil处理则显著恢复线粒体膜电位接近正常值，减少细胞死亡，并且具有明显的剂量依赖性。结论Fasudil对体外培养BMNSC的增殖和存活具有显著的促进作用。

PBL与RISE教学法在医学免疫学教学实践中的探讨

目的:通过对PBL、RISE和LBL教学效果比较,研究对本科生免疫学学习的更有效的教学法。方法:将实验对象分为PBL、RISE和LBL组,分别实施相应教学方式,并对教学效果进行考核和评估。结果:PBL和RISE教学法期末考核明显优于传统教学法,而在提高创新性方面RISE教学方式明显强于PBL组。结论:PBL和RISE教学法的教学效果优于传统教学法,提高了学生的学习积极性和综合能力。

口服烟酰胺核糖抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎的初步研究

目的:探讨口服烟酰胺核糖(nicotinamide riboside,NR)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗效果和作用机制。方法:采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG_(35-55))免疫C57BL/6雌性小鼠制备EAE模型,随机分为EAE组和NR组。从免疫后第3天开始,EAE组小鼠灌胃给予生理盐水,NR组小鼠灌胃给予NR,每天1次至免疫后第27天。免疫当天至免疫后第28天,观察并记录各组小鼠临床评分和体重。免疫后第28天处死小鼠,制备脾细胞悬液和脊髓组织冰冻切片。HE染色和髓鞘染色分别检测脊髓炎性细胞浸润和髓鞘脱失,Western blot和免疫荧光染色分别检测脊髓组织中ROCK-II、TLR4、p-NF-κB、iNOS表达及相应的阳性细胞数量,ELISA检测脾细胞培养液中TNF-α、IL1β和IL-6的含量。结果:口服NR可推迟EAE发病时间,减轻EAE临床症状,缓解小鼠体重丢失,减少外周炎性细胞浸润脊髓,减轻髓鞘脱失,降低脊髓组织中ROCK-II、TLR4、p-NF-κB及iNOS炎性相关蛋白表达,抑制脾脏炎性因子分泌。结论:口服NR对EAE具有显著的治疗效果,其治疗机制可能与NR抑制EAE的炎症反应有关。

江苏省大中小企业专业化协作现状及发展对策研究

与大企业配套协作已成为中小企业技术进步、良性发展的一种成功模式,在回顾专业化协作相关理论的基础上对江苏省中小企业与大企业的专业化协作现状进行了实地调研。针对所存在的问题提出了建议。研究结果对提高大中小企业之间的专业化协作水平、优化产业结构具有很强的理论和实践意义。

液液萃取和大孔吸附树脂纯化银杏外种皮黄酮类化合物的比较研究

选取5种弱极性有机溶剂和3种弱极性大孔吸附树脂,就液液萃取法和大孔吸附树脂法对银杏外种皮黄酮类化合物的纯化效果进行比较。结果表明,以芦丁为对照,液液萃取法在产品质量和黄酮类化合物含量方面均低于大孔吸附树脂法,其中DM-130大孔吸附树脂对银杏外种皮黄酮类化合物的纯化效果最好,产品中黄酮类化合物含量达25.92%。

银杏外种皮黄酮类化合物的提取方法研究

分别以水、乙醇、丙酮作为提取溶剂,对银杏外种皮黄酮类化合物的不同提取方法进行了比较研究。结果表明,以乙醇作为提取溶剂,采用回流提取法提取银杏外种皮黄酮类化合物的效果最好,提取率超过84%,标准偏差为0.0009,RSD为0.10%。为银杏外种皮资源的开发利用提供了依据。