生物发酵制备骨化二醇相关杂质的分离及结构鉴定

生物发酵的骨化二醇发酵液经板框过滤,液液萃取以及高压制备色谱精制,得到色谱纯度为97.5%的骨化二醇相关杂质单体。通过紫外、质谱和核磁共振波谱综合解析,确证了杂质的化学结构为骨化二醇的同分异构体,即24-羟基维生素D3,是不同于化学合成的一个新的杂质。该实验中确定的制备条件可以为该杂质的制备提供参考,所得杂质单品可以为后续实验提供杂质对照品。

自养假诺卡菌突变株SIIA243-924产26-甲基-25-羟基维生素D_3的分离纯化及结构鉴定

在骨化二醇产生菌自养假诺卡菌(Pseudonocardia autotrophica)突变株SIIA243-924的发酵液中发现一个骨化二醇的结构类似物,分别采用液-液萃取、硅胶柱色谱和高效液相制备色谱等方法提取分离,得到纯度为97.5%的目标化合物。并进一步通过UV、MS、1H NMR、13C NMR及1H-1HCOSY等光谱分析,结合骨化二醇相关谱图,确定该化合物的结构为(5Z,7E)-9,10-开环胆甾-5,7,10(19)-三烯-(26-甲基)-3β,25-二醇,即26-甲基-25-羟基维生素D3。