L-谷氨酰胺生产菌的选育及均匀设计在发酵条件试验中的应用

本文对L-谷氨酰胺生产菌的选育及发酵条件作了研究。以天津短杆菌TC-(866)-174为出发菌株,采用亚硝基胍、硫酸二乙酯等常规诱变方法,从500多株突变株中筛选出一株谷氨酰胺生产菌GW-77[CMSO^R、(NH_4)_2SO_4~R、SG^R]运用均匀设计法,以微机为辅助手段,摸索出最佳条件组合,在适宜条件下积累谷氨酰胺,平均值为31.4mg/ml,最高达33.2mg/ml。

肌苷高产菌的转化育种及均匀设计在发酵条件试验中的应用

应用感受态细胞转化法，以ＴＸ２为供体，以ＴＳＡ１９为受体，成功地选育出了具有目的遗传标记Ａｄｅ－＋Ｈｉｓ－＋Ｘａｎ－＋８－Ａｇｒ＋６－ＭＰｒ＋ＳＧｒ，产肌苷高的转化子ＴＳＸＢ２９，在发酵条件试验中，引进均匀设计理论，利用微机对试验数据进行统计处理，找出了最佳条件。在该条件下，转化子ＴＳＸＢ２９摇瓶发酵平均产肌苷２７．８５ｍｇ／ｍｌ，最高达２９．６７ｍｇ／ｍｌ，经斜面传代１５次及连续摇瓶传代１０次，发现该转化子是稳定的。经连续１０批稳产试验，发现其１０批平均产肌苷２７．３８ｍｇ／ｍｌ，完全可用于工业生产中。

用原生质体融合技术选育谷氨酸高产菌

利用原生质体融合技术,在不对亲株做任何诱变的前提下,成功地使天津短杆菌TG-866与钝齿棒杆菌B9的原生质体进行融合,获得兼有两亲株遗传性状——细胞个体大、产酸高的融合子F263及F288。确定了两亲株原生质体制备、再生及融合的最佳条件。在该条件下,其原生质体形成率均在99.9%以上,再生率分别为23%及28%,原生质体融合率为3.2×10^(-3)。在最佳摇瓶发酵条件下,F263及F288的谷氨酸产率分别为8.4g/dl及8.03g/dl。通过连续10次摇瓶传代,发现该融合子较稳定,因而具有较高的应用价值。