银杏叶提取物对噪声致大鼠螺旋神经节损伤的保护作用

目的探讨银杏叶提取物对大鼠噪声暴露后螺旋神经节损伤的保护作用。方法将36只SD大鼠分为三组:正常对照组(正常组)、生理盐水+噪声暴露组(噪声组)、银杏叶提取物+噪声暴露组(用药组),每组12只。后两组大鼠每天暴露于110dBSPL白噪声中6h,连续10天,且于噪声暴露开始每天分别腹腔注射生理盐水和银杏叶提取物10ml/d。所有大鼠均于实验前和实验第10天检测听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR),并于第二次测试ABR后处死动物,检测耳蜗组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,并用透射电镜观察耳蜗螺旋神经节细胞的超微结构变化。结果实验后噪声组和用药组的ABR阈值均高于正常组,但用药组显著低于噪声组,差异有统计学意义;用药组SOD活性较噪声组明显增加、MDA含量较噪声组显著降低,差异有统计学意义;用药组耳蜗螺旋神经节损害明显轻于噪声组。结论银杏叶提取物对大鼠噪声暴露后螺旋神经节细胞的损害具有保护作用。

EGb761减轻大鼠内耳血管纹损伤的实验研究

目的观察大鼠噪声暴露后其耳蜗电生理与血管纹细胞超微结构的改变,探讨使用银杏叶提取物(EGb761)后减轻血管纹损伤的保护作用的机制。方法实验组大鼠噪声暴露后腹腔注射EGb761,对照组动物噪声暴露后注射等量生理盐水,于处理前后对两组的听力及透射电镜所见耳蜗血管纹结构加以比较。生化检测耳蜗血管纹组织超氧化物歧化酶(superoxide dimutase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果实验组的听力损失明显小于对照组(P<0.05);耳蜗透射电镜观察发现,对照组血管纹边缘细胞核周间隙明显增宽,核异染色质明显边集,线粒体水肿,嵴断裂或消失,部分空泡化。实验组耳蜗细胞损伤明显轻于对照组。两组SOD、MDA检测差异有显著性。结论大鼠噪声暴露后应用EGb761能降低ABR阈移,其机制可能是清除氧自由基,保护血管纹细胞,从而减轻噪声性耳蜗损伤。

锌指转录因子TWIST和Survivin在头颈鳞癌组织中的表达

目的:观察头颈部鳞癌组织中锌指转录因子TWIST及Survivin的表达,并分析其相关性,探索它们在头颈部鳞癌中表达的意义。方法:采用免疫组织化学方法检测62例头颈鳞癌(20例正常软腭黏膜组织作为正常对照组)组织中的TWIST和Survivin的表达情况。结果:TWIST在头颈部鳞癌中的表达率为69.35%,显著高于正常对照组,Survivin在头颈部鳞癌中的表达率为79.03%,显著高于正常对照组,且TWIST的表达均随鳞癌的病理分化程度降低而升高,并在有淋巴结转移组中显著高于无淋巴结转移组,和年龄、性别无关;而Survivin的表达在有淋巴结转移组中显著高于无淋巴结转移组,和年龄、性别以及病理分化程度无关。未见头颈鳞癌组织中Survivin与TWIST的表达程度有相关性。结论:TWIST和Survivin高表达与头颈鳞癌的发生发展有关,但两者之间不一定存在相关性。

缺血后处理减轻缺血再灌注大鼠耳蜗血管损伤的研究

目的探讨缺血后处理(ischemic postconditioning)对大鼠耳蜗缺血再灌注的保护作用。方法成年雄性SD大鼠42只,随机分为3组(n=14),分别为假手术对照组、缺血再灌注组和缺血后处理组。各组动物于再灌注24h取左侧耳蜗,每组随机4个耳蜗做透射电镜观察血管纹血管的超微结构变化,各组余下耳蜗组织进行匀浆,测定匀浆中过氧化氢酶(catalas,CAT)活性、丙二醛(molondialdehyde,MDA)含量。结果与假手术对照组大鼠相比,缺血再灌注组和缺血后处理组大鼠CAT活性显著降低(P<0.05),MDA含量显著升高(P<0.05);与缺血再灌注组大鼠相比,缺血后处理组大鼠CAT活性升高(P<0.05),MDA含量下降(P<0.05)。形态学缺血再灌注组耳蜗血管内皮细胞超微结构破坏明显,而缺血后处理组超微结构有明显改善。结论耳蜗缺血后处理可能抑制耳蜗缺血再灌注后的氧化损伤,对血管有一定保护作用。

抑癌因子PTEN在喉鳞癌组织中的表达

目的:观察喉鳞状细胞癌组织中与张力蛋白同源第10q23.3染色体丢失的磷酸酶基因(PTEN)的表达,探讨PTEN在喉鳞状细胞癌中的作用。方法:收集喉鳞状细胞癌标本41例(其中有淋巴结转移者11例)和20例正常软腭黏膜组织,用免疫组织化学染色法探测PTEN的表达情况。结果:喉鳞状细胞癌中PTEN表达阳性率为58.54%(24/41),显著低于正常软腭黏膜组织阳性率90%(18/20),PTEN在喉鳞状细胞癌中阳性率与淋巴结转移有关(P<0.05),未见与组织分化、临床分期和年龄相关(P>0.05)。结论:PTEN在喉鳞状细胞癌组织中的低度表达在喉鳞状细胞癌发展中可能起重要作用。

曼氏迭宫绦虫裂头蚴超微结构的观察

取黑斑蛙肌肉内的曼氏迭宫绦虫裂头蚴,分别切取新鲜头颈部片段5～7个,经漂洗、固定、脱水、浸透、包埋、切片及染色处理后,透射电镜观察裂头蚴的超微结构。可见裂头蚴的体壁由皮层和实质区组成。微毛位于皮层的外表面,呈尖棘状。基质区内有许多形态各异的颗粒状分泌小体、囊泡、内质网和线粒体,其中线粒体多位于近基膜处。实质区有表层肌、皮层细胞、实质细胞、成石灰小体细胞和排泄系统等分布,并可见皮层细胞形成的胞质连接小管通过基膜伸向基质区。

慢性镉中毒对小鼠海马齿状回结构的影响

目的观察慢性镉中毒对小鼠海马齿状回颗粒层细胞结构的影响。方法将清洁级4~5月龄昆明种小鼠40只随机分为对照组与镉中毒组,每组20只,雌雄各半。适应性饲养1周后,镉中毒组采用皮下注射氯化镉（2 mg/kg）,每周2次,连续染毒3个月,对照组同时注射等体积生理盐水。连续喂养3个月后取大脑海马组织分别进行尼氏染色、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、神经元特异性烯醇酶（NSE）免疫组化染色和透射电镜观察。结果光镜下,尼氏染色与免疫组化染色结果显示,对照组小鼠海马齿状回颗粒层神经元排列整齐、规则,结构完整,胞体较大,细胞轮廓清楚,胞核居中、核仁明显、胞浆尼氏体丰富,均匀分布于核周;胶质细胞分散在海马神经元之间,呈星形或梭形,体积小、核圆形或卵圆形;镉中毒组小鼠海马齿状回颗粒层神经元胞体变小、胞核固缩、胞浆减少,尼氏体明显减少或消失、着色浅,胶质细胞分散在海马神经元之间,体积增大;与对照组相比,镉中毒组海马齿状回颗粒层胶质细胞与NSE阳性神经元的数量增多（P〈0.05）。电镜下,对照组海马齿状回颗粒层神经元形态规则,胞膜清晰,细胞器丰富,结构完整;镉中毒组神经元胞体轻度水肿,核膜皱褶,核染色质皱缩,胞浆密度降低,细胞器减少,线粒体肿胀,部分透明成空泡。结论慢性镉中毒可导致小鼠海马齿状回颗粒层神经元减少、星型胶质细胞增多,这些变化可能是镉的神经毒性作用之一。

褪黑素对小鼠缺血再灌注脑损伤后海马CA3区神经元的保护作用

目的:观察褪黑素(melatonin,MT)对缺血再灌注脑损伤小鼠学习记忆能力的影响,探讨MT对缺血再灌注脑损伤的神经保护作用。方法:将60只健康小鼠随机分为对照组,模型7d组和治疗7d组。模型组采用双侧颈总动脉夹闭法建立小鼠缺血再灌注脑损伤,治疗7d组分别于处死前3d腹腔注射MT(20mg/kg,3次/d),对照组同时给予等量生理盐水。各组小鼠于处死前3d采用Y-型电迷宫检测小鼠学习记忆能力,行为检测完毕后行脑组织SOD、NO、MDA及脑组织含水量检测;电镜下观察海马CA3区神经元超微结构变化。结果:与模型组相比,治疗7d组小鼠的学习记忆能力明显改善(P<0.05);治疗7d组SOD含量显著升高,NO、MDA含量明显下降;电镜下,较非治疗组海马神经元的损伤明显改善。结论:褪黑素可以明显改善缺血再灌注脑损伤小鼠的学习记忆能力,不同程度的减少或减轻神经元的损害,说明其具有神经保护作用。

燃煤型氟中毒对大鼠睾丸超微结构的影响

目的研究燃煤型氟中毒对SD大鼠睾丸超微结构的影响。方法以SD大鼠为研究对象,按体质量均衡随机分为7组:对照组、高氟组、中氟组、低氟组、高氟加营养组、中氟加营养组、低氟加营养组。各染毒组喂饲含不同比例的燃煤型氟中毒病区煤烘玉米的饲料,复制燃煤型氟中毒动物模型。分3批(90 d,120 d,180 d)以股动脉放血法处死动物,查看氟斑牙,测尿氟。常规制作睾丸超薄切片,用透射电镜观察睾丸超微结构的变化。结果 (1)建成氟中毒动物模型,90 d各染毒组均出现氟中毒表现,对照组正常。中毒程度随氟剂量增加和染毒时间延长而加重;氟剂量相同时,营养好,中毒程度轻。(2)对照组结构正常。染毒组曲精小管内各级生精细胞生成减少,精子数量减少,各级生精细胞、睾丸间质细胞、肌样细胞、支持细胞的超微结构均有不同程度的病理变化。随氟剂量增加和染毒时间延长,病变加重。相同染氟剂量和加营养组比较,加营养组病变程度减轻。结论 (1)燃煤型氟中毒对SD大鼠睾丸组织超微结构有明显的损伤作用,随氟剂量和染毒时间延长,病变加重。(2)降低摄氟量及改善营养状况,可改善氟中毒对大鼠睾丸超微结构的损伤。

康复新液对大鼠急性酒精性胃黏膜损伤的保护

目的建立急性酒精性胃黏膜损的动物模型,观察康复新液对实验性大鼠酒精性胃黏膜损伤的保护作用。方法采用康复新、达喜等药物及生理盐水灌胃后,再用酒精灌胃,测量黏膜损伤指数、HE染色、电镜检查,观察胃黏膜损伤程度。结果康复新组损伤指数与药物对照组(达喜)相似,低于模型组,电镜下康复新组上皮细胞变形、细胞间隙增宽较模型组轻。结论康复新液对急性酒精性胃黏膜损伤有明显的保护作用。

姜黄素引入酯键增韧基团对膀胱癌T24细胞靶向作用的体外研究

目的:探讨姜黄素引入酯键增韧基团成为姜黄素前体化合物后靶向诱导膀胱癌T24细胞凋亡,为膀胱癌靶向治疗提供依据。方法:取不同浓度姜黄素前体化合物:叔丁氧羰基-苯丙氨酸酯姜黄素单脂(boc-phenylalanine-curcumin,BPC)及相同浓度的姜黄素对膀胱癌T24细胞及人主动脉平滑肌细胞(people aortic smooth muscle cells,HASMC)作用后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,透视电镜观察BPC 20、40μmol/L处理T24细胞后细胞超微结构的改变。结果:5～40μmol/L BPC及姜黄素母体作用于膀胱癌T24细胞6～24 h后均明显抑制其增殖,呈时间剂量依赖,抑制率BPC:5.31%～59.34%(P<0.05);姜黄素:7.33%～63.59%(P<0.05);对正常二聚体细胞HASMC的抑制作用BPC较姜黄素组明显降低(1.41%～12.34%vs 5.34%～36.59%),差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪分析5～40μmol/L BPC及姜黄素作用于膀胱癌T24细胞24 h后,BPC诱导凋亡率:16.97%～47.12%(P<0.05),姜黄素:19.21%～48.92%(P<0.05);而对HASMC作用则较姜黄素明显减弱,BPC诱导凋亡率为:0.94%～3.27%,姜黄素组为:4.69%～11.35%,差异有统计学意义(P<0.05)。透视电镜显示:经BPC作用后,T24细胞出现典型细胞凋亡的形态学特征。结论:姜黄素酯前体化合物BPC明显抑制膀胱癌T24细胞增殖、诱导其凋亡,而对正常二倍体细胞HASMC抑制作用降低,为姜黄素酯对肿瘤的靶向治疗研究提供新的依据。

贵州省喉癌病例特征分析(附265例报告)

喉癌是耳鼻咽喉头颈外科常见的恶性肿瘤之一,严重危害人类的健康,近年来喉癌的发病率有明显增加的趋势[1]。本文收集贵州省主要城市地区2001年6月至2006年6月265例有准确记录并经病理证实的喉部癌患者进行回顾性分析,现报告如下。

隐性遗传营养不良型大疱性表皮松解症2例

例1．男，6岁。闪全身反复出现水疱、糜烂6年于2007年6月就诊。患儿出生后第2天，左手背出现一绿豆大水疱，疱壁薄，疱液清，家属自行用针刺破后水疱干涸结痂。后全身出现散在绿豆至蚕豆大水疱、血疱．破溃后形成糜烂面、结痂，愈后遗留萎缩性瘢痕。

酯键链接增韧基团增强姜黄素对肿瘤细胞靶向性作用

目的:以酯键链接增强基团,制备姜黄素前体,观察其对前列腺癌细胞和正常二倍体细胞生长活性影响的差异。方法:叔丁氧羰基(Boc)-苯丙氨酸酯姜黄素单酯(BPC)作用于人前列腺癌DU-145细胞6～24 h后,MTT试验检测细胞生长活性,流式细胞术检测细胞凋亡率。计数法测定1～7天细胞生长曲线。人主动脉平滑肌(people aortic smooth muscle cells,HASMC)细胞作为对照组。结果:10～40μmol/L的BPC作用于DU-145细胞6～24 h后,DU-145细胞生长抑制率为7.37%～66.87%(P<0.05),呈浓度﹑时间依赖性;部分细胞出现凋亡形态学改变,FSC-SSC散点图可见24 h DU-145细胞凋亡比率为37.84%～47.12%(P<0.05)。对照组HASMC细胞凋亡比率为0.94%～4.23%(P<0.05),较同浓度姜黄素降低。结论:BPC能在体外有效诱导人前列腺癌DU-145细胞凋亡,对正常二倍体细胞的抑制作用较低,为深入研究泌尿系肿瘤靶向性治疗提供了新的途径。

扫描电镜下氟化物喂养大鼠耳蜗基底膜毛细胞形态

目的:观察正常大鼠和氟化物喂养大鼠耳蜗基底膜毛细胞的形态,了解两者毛细胞的形态是否有差异性。方法:取正常大鼠和添加氟化物饲料喂养180 d的大鼠各2只,处死后取出耳蜗经制样后进行扫描电镜观察,比较两组大鼠耳蜗基底毛细胞差异。结果:正常组大鼠耳蜗基底膜毛细胞排成4排,内毛细胞排成1排,静纤毛呈"一"字型;外毛细胞排成3排,静纤毛呈"V"字型,毛细胞排列整齐、规则;实验组大鼠耳蜗基底膜外毛细胞出现排列不整齐、静纤毛形态不规则的现象,外毛细胞静纤毛呈柱状或不规则的团块状,静纤毛排列有缺失。结论:实验组大鼠耳蜗基底膜毛细胞有明显形态学改变,但大鼠听力是否受到损害还有待证实。

锌指转录因子Snail在头颈鳞状细胞癌组织中的表达及与血管生成的关系

目的观察头颈鳞状细胞癌(简称鳞癌)组织中锌指转录因子Snail的表达及与血管生成的关系,探讨其对血管生成的作用。方法采用免疫组织化学方法检测62例头颈鳞癌及20例正常软腭黏膜组织中Snail的表达情况,并计数微血管密度(microvascular density,MVD)。结果 Snail在头颈鳞癌中的表达率为66.13%,显著高于正常软腭黏膜组织,MVD在头颈鳞癌中的表达率显著高于正常软腭黏膜组织,且二者均随病理分化程度降低而升高,并在有淋巴结转移组中显著高于无淋巴结转移组,头颈鳞癌组织中MVD与Snail的表达呈正相关。结论 Snail高表达与头颈鳞癌的发生发展密切相关,并可能在肿瘤的血管生成中起重要作用。

凋亡抑制因子Livin在喉鳞状细胞癌组织中的表达及与碱性成纤维细胞生长因子的关系

目的:观察喉鳞状细胞癌组织中凋亡抑制因子Livin的表达及与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的关系,探讨Livin在喉鳞状细胞癌发病中的作用机制。方法:收集喉鳞状细胞癌标本41例(其中有淋巴结转移者11例)和正常软腭黏膜组织20例,用免疫组织化学染色法检测Livin和bFGF的表达情况。结果:喉鳞状细胞癌中Livin表达阳性率为70.73%(29/41),显著高于正常软腭黏膜组织(呈阴性表达);Livin在喉鳞状细胞癌中阳性率与淋巴结转移有关(P<0.05),未见与组织分化、临床分期和年龄相关(均P>0.05);Livin和bFGF在喉癌中的表达呈显著正相关。结论:Livin在喉鳞状细胞癌组织中的高度表达在喉鳞状细胞癌的发展中可能起重要作用,并可能和bFGF有协同作用。

人工合成家蝇抗真菌肽MAF-1A体外抗真菌效果及扫描电镜观察

目的探讨人工合成家蝇抗真菌肽MAF-1A结构特点及其抗真菌效果。方法运用生物信息学软件分析人工合成MAF-1A的结构特征;采用液体微量稀释法、MTT法和沙氏琼脂平板培养计数法分别检测MAF-1A对白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌和新生隐球菌的抗菌活性及最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并绘制时间-杀菌曲线;采用扫描电镜观察在MIC浓度下对白色念珠菌超微结构的影响。结果生物信息学软件分析结果显示MAF-1A为一阳离子多肽,分子量3022.5Da,pI值9.23,碱性氨基酸含量26.9%,带2个正电荷,结构较为稳定,脂肪指数71.54,其总平均疏水性数-1.081,预测为一非跨膜多肽,二级结构以α螺旋结构为主的线状肽结构。MAF-1A对白色念珠菌敏感株及耐药株均显示出抗菌活性,对检测酵母菌的MIC值在0.1~0.8mg/ml、MBC值在0.2~0.9mg/ml;杀菌曲线显示,MIC浓度MAF-1A作用真菌2h至14h逐渐发挥杀菌活性。扫描电镜显示MAF-1A作用白色念珠菌后形态发生改变,菌体表面粗糙,可见细胞穿孔样变,严重病变细胞表面呈碎片状,刺状突起,胞质流失至细胞皱缩死亡。结论 MAF-1A为阳离子α-螺旋结构线性多肽,对常见的致病性念珠菌包括耐药性菌株具有抗菌活性,可通过破坏真菌细胞表面结构发挥杀菌作用。