牛副流感病毒3型3种基因型多重RT-PCR检测方法的建立

为建立检测牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)3种基因型的多重RT-PCR方法,根据GenBank上发表的BPIV3 3种基因型病毒株的HN基因序列设计特异性引物,优化反应体系建立多重RT-PCR方法。结果显示,方法可同时扩增出BPIV3A型150bp、B型253bp和C型342bp的特异性片段,与牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、牛支原体、牛布鲁氏菌、羊布鲁氏菌、牛源多杀性巴氏杆菌A型和B型均无交叉反应,A、B、C基因型BPIV3最低阳性质粒检测量分别为0.89×104、0.92×104和1.53×104拷贝/μL。本试验建立的多重RT-PCR检测方法操作方便、特异性强,应用于临床样本的检测,可快速检测BPIV3 3种基因型。

会阴部造口术治疗公犬尿道结石

2015年在河北省张家口市宣化区顽皮动物医院实习期间,诊治了四例犬尿道结石病,用会阴部尿道造口的手术方法予以治疗,三例痊愈,一例死亡。报告如下。（一）尿道结石症概念和病因1.概念。尿道结石症（简称尿石症） 是指在尿液中溶解状态的盐类物质析出的结晶体,所形成的矿物质凝聚结构,刺激尿道粘膜并造成尿路阻塞。造成尿道的损伤﹑发炎﹑血尿﹑频尿﹑甚至闭尿等临床症状。如果不及时治疗可致膀胱破裂。

新疆某牛场牛结核病的综合诊断与病原分离鉴定

目的用多种方法检测新疆某牛场的结核病并分离病原。方法选择皮内变态反应、牛型PPD点眼试验、IFN-γ试验及ELISA抗体检测试验4种免疫学诊断方法对新疆某牛场进行牛结核病的综合诊断,锁定疑似阳性牛后进行扑杀、剖检并采集病料进行病原的分离,用已建立的PCR方法对培养的细菌进行分型鉴定。结果共检测了奶牛755头,其中4种方法综合锁定结核疑似阳性牛26头(3.4%)。从中随机选择5头牛进行剖检均发现有明显的结核病变,采样后在罗氏培养基上进行培养,结果均为阳性。挑取菌落经PCR鉴定结果均为牛分枝杆菌。结论牛结核病的诊断存在其他分枝杆菌的干扰,单一诊断方法因特异性不足导致结果存在误差。合理选择诊断方法的组合有利于牛结核病的确诊。

家畜炭疽病的发生与防制

十七年来,笔者主持了15起炭疽疫情的处理工作,牛、羊混合发病占66.67%;牛发病占26.67%;羊发病占6.67%;人发病占86.67%;无动物发病占6.67%。牛发病率比羊发病率高。对可疑炭疽病死畜的尸体禁止解剖,对尸体焚烧炭化后深埋。要建立免疫制度,对易感染动物每年进行一次、高质量的疫苗接种。在疫区本病很难彻底消除。

甘肃省奶牛副结核分枝杆菌的调查与分离鉴定

为进一步了解甘肃省某奶牛场牛副结核病的感染情况,采集该场227头奶牛血清进行ELISA抗体检测,结果,检出13头阳性奶牛,阳性率为5.73%。在13头抗体阳性奶牛中随机采集6头表现拉稀症状奶牛的直肠粪便,提取DNA进行荧光定量PCR检测,结果显示,6份粪便样品均为阳性。6份粪便样品用十六烷基氯化吡啶(HPC)处理后接种自行配制的Herrold’s卵黄琼脂培养基,经过7~14周培养得到5株分离菌株。采用IS900特异性序列PCR鉴定和限制性内切酶分析(REA)鉴定,结果表明,5株分离菌株均为副结核分枝杆菌。采用IS1311特异性序列PCR-REA鉴定,结果表明,5株分离菌株均为C型MAP。