D3基因在抗病防卫反应中的转录调控研究

水稻白叶枯病(bacterial leaf blight,BLB)是由水稻黄单胞菌属水稻致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)引起的细菌性病害,严重影响水稻产量。随着基因技术的发展,编辑抗病基因是提高水稻抗病性降低该病害的发生的一种行之有效的方法。本研究首先对D3基因编辑株系和野生型进行白叶枯病菌接种实验来确定D3基因对于白叶枯病菌的抗性,其次利用高通量测序技术对已筛选出的遗传纯合D3基因编辑株系进行转录组分析,同时结合基因差异表达分析、基因家族分析和富集分析挖掘其在抗病相关通路上的潜在作用,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对部分差异表达基因(differential expressed genes,DEGs)进行验证。结果表明:接种白叶枯病菌后D3基因被显著诱导,同时D3基因编辑株系均表现出不同程度的白叶枯病抗性。转录组数据显示,与野生型相比,在转录组水平共鉴定到8184个差异表达基因,包含4201个上调基因和3983个下调基因,3组均呈现差异表达的相关基因共有359个。GO功能富集分析表明,D3基因编辑株系与野生型在生物学途径、细胞组分和分子功能上的相关基因均呈显著差异表达。KEGG代谢途径富集分析发现,DEGs显著富集于植物与病原菌互作、植物激素信号转导以及苯丙烷生物合成途径。本研究丰富了水稻D3基因在抗病相关基因转录调控方面的信息,为D3基因抗病功能研究拓展了思路。

高温胁迫对内蒙古自治区和云南省致病疫霉生长及产孢的影响

由致病疫霉[Phytophthora infestans(Mont.)de Bary]引起的马铃薯晚疫病是马铃薯生产上的重要病害,而温度是决定马铃薯晚疫病是否发生及发生程度的重要因素。为了明确不同温度及同一温度不同时间的胁迫处理对致病疫霉生长及产孢能力的影响,以18℃恒温培养作为对照,对采集自内蒙古自治区和云南两个地区的致病疫霉进行不同时间的高温胁迫处理。待菌株在18℃培养至三分之一皿时,每天在30,35和40℃分别进行3,6和9 h的变温处理,连续处理4 d,变温处理后的菌株继续18℃培养,直至对照菌株长满整个培养皿。结果表明,随着胁迫时间的延长和温度的升高,致病疫霉的生长受到不同程度的抑制。其中,内蒙古自治区菌株NY13-12受到的抑制最为明显,在30,35和40℃高温处理9 h时,菌落直径较对照分别减少28.74%、37.13%和53.89%。高温胁迫对致病疫霉的产孢具有不同的影响,30和35℃处理对致病疫霉的产孢量有刺激作用,但40℃处理对产孢有抑制作用。其中,菌株NY13-8在30℃处理9 h后,单位面积产孢量为1280个/mm^2,是对照的11.85倍,但40℃处理3 h后单位面积产孢量较对照减少37.04%。研究结果为晚疫病预测预报模型的构建及完善提供了数据支持。