脂质体阿霉素的制备及包封率测定方法的研究

目的：建立一种检测脂质体中阿霉素含量的方法。方法：对阿霉素溶液进行紫外可见光扫描，探求最佳波长。阿霉素脂质体溶液进行柱分离，找出脂质体和游离药物分离的最佳体积。结果：可以看出在２３２ｎｍ处阿霉素有最大吸收；脂质体和游离药物的最佳分离体积为２０ｍｌ。用紫外ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０法测定阿霉素脂质体的包封率为１０．３％±１．２％（ｎ＝４），包封率测定回收实验表明，此法重复性好。结论：紫外ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０法测定阿霉素脂质体的包封率准确性高、重现性好、简便易行。

半乳糖脂修饰的阿霉素脂质体体外杀伤肝癌细胞的实验研究

目的：合成ｎ十六烷酰１硫代βＤ半乳糖苷（ＣｅｔｙｌＧａｌ），并用其修饰阿霉素脂质体表面，观察体外对人肝癌细胞系ＳＭＭＣ７７２１的杀伤作用。方法：半乳糖经化学反应制备ＣｅｔｙｌＧａｌ，用１０％摩尔的糖脂整合到超声法制备的小单层阿霉素脂质体脂膜上进行体外杀瘤研究，ＭＴＴ法检测杀瘤活性。结果：４８小时细胞毒试验糖脂阿霉素脂质体对人肝癌细胞系ＳＭＭＣ７７２１的杀伤作用优于无糖脂阿霉素脂质体（Ｐ＜００５），而对非靶细胞（Ｂ１６黑色素瘤细胞）的杀伤作用糖脂和无糖脂阿霉素脂质体两者相近。０５ｈ预处理实验表明：缩短药物与细胞接触时间后，糖脂阿霉素脂质体仍保持较强的杀伤肝癌细胞作用。结论：半乳糖阿霉素脂质体对人肝癌细胞杀伤作用较无糖脂组及非靶细胞组为强。

乳糖脂修饰的阿霉素脂质体体外杀伤肝癌细胞的实验研究

在ＮａＢＨ４还原作用下制备乳糖酰磷脂酸乙醇胺（Ｌａｃ－ＰＥ），反应４００ｈ测定仍联率为４８．６％，硅酸柱纯化得纯品。用该脂质修饰阿霉素脂质体表面，观察体外对人肝癌细胞系ＳＭＭＣ－７７２１的杀伤作用。方法乳糖和磷脂酰乙醇胺经化学反应制备Ｌａｃ－ＰＥ，用１０％摩尔的糖脂整合到超声法制备的小单层阿霉素脂质体脂膜上进行体外杀瘤研究，ＮＴＴ法检测杀瘤活性。结果４８小时细胞毒试验糖脂阿霉素脂质体对人肝癌细胞系ＳＭＭＣ－７７２１的杀伤作用优于无糖脂阿霉素脂质体（Ｐ＜０．０１），而对非靶细胞（Ｂ１６黑色素瘤细胞）的杀伤作用优于无糖脂阿霉素脂质体两者相近。０．５ｈ预处理实验表明：缩短药物与细胞接触时间后，糖脂阿霉素脂质体仍保持较强的杀伤肝癌细胞作用。结论乳糖脂阿霉素脂质体的杀伤作用来自乳糖中的半乳糖基配体的特异性介导和人肝癌细胞上肝半乳糖受体的识别内吞作用。

半乳糖脂修饰的脂质体靶肝特性实验研究

目的研究用半乳糖脂修饰的脂质体与肝特异性半乳糖受体结合的能力，为用该脂质体包埋药物进行肝病治疗和肝造影提供依据。方法半乳糖经乙酰化、溴化、缩合、亲核取代反应制备半乳糖新糖脂质并与其他脂质制备脂质体，在二氯化锡还原作用下用９９ｍＴｃ标记脂质体，进行动物体内靶肝实验，用γ计数器检测各脏器放射性，计算摄取率。结果标记脂质体的标记率大于９５％，动物体内实验肝最大摄取率为８０１％，对照组为３１５％。乳糖封闭受体后，肝摄取率明显下降（３２１％），差异有显著意义（ｔ＝５２２，Ｐ＜００１）。结论半乳糖脂修饰的脂质体具有很好的靶肝作用，这种靶向性是与肝半乳糖受体结合的结果。

乳糖酰磷脂酰乙醇胺修饰的阿霉素脂质体体外杀伤肝癌细胞的实验研究

目的 :探讨乳糖酰磷脂酰乙醇胺修饰的阿霉素脂质体对肝癌细胞的杀伤作用。方法 :在NaBH4 还原作用下连接乳糖和磷脂酰乙醇胺制备乳糖酰乙醇胺 (Lac_PE) ,反应 40 0h测定偶联率为 48.6 % ,硅酸柱层析得到纯品。用 10 %的Lac_PE整合到超声法制备的小单层脂质体 (由PC :chol:PE以 7∶2∶1摩尔比组成 )脂膜上。结果 :其插入率为 99.6 % ,乳糖脂阿霉素脂质体体外杀瘤试验 (MTT法 )表明 :48h细胞毒试验乳糖脂阿霉素脂质体对人肝癌细胞系SMMC - 772 1的杀伤作用显著优于无糖脂脂质体 (P <0 .0 1) ,以IC50 计 ,乳糖脂脂质体的杀伤作用是对照组的 16 .3倍 ,而对非靶细胞 (B16黑色素瘤细胞 )的杀伤作用二者相近。 0 .5h预处理试验表明 :缩短药物与细胞接触时间后 ,乳糖脂阿霉素脂质体仍保持较强的杀伤肝癌作用 ,IC50 为 2 .74μg/ml,而对照组为 48.7μg/ml。 结论 :表明乳糖脂阿霉素脂质体的杀伤作用来自半乳糖基配体的特异性介导和人肝癌细胞上肝凝集素的识别内吞作用。