人可溶性白细胞介素- 6受体基因在昆虫细胞内的克隆与表达

在昆虫细胞中表达人可溶性白细胞介素- 6受体（ sIL- 6R）基因。方法将人 sIL- 6R cDNA克隆至杆状病毒转移载体 pAcGP67B中，再将重组转移载体质粒与野生病毒 AcNPV DNA共转染昆虫细胞 Sf9；经同源重组后，以终点稀释和斑点杂交法筛选重组杆状病毒；采用空斑分析法纯化重组的病毒，然后以纯化的重组病毒感染昆虫细胞 Sf9。结果斑点杂交实验证实，纯化得到的重组病毒含有人 sIL- 6R基因； SDS- PAGE结果显示，表达产物 sIL- 6R相对分子质量为 47 000左右； Western blot和受体配基结合实验表明，表达产物具有与其配基特异性地结合的能力。结论杆状病毒－昆虫细胞系统能分泌表达 sIL- 6R，表达产物具有免疫活性和生物活性。