木薯块根中β-葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质

研究了木薯块根中β-葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质。以缓冲液从木薯块根中获得粗提酶液,粗酶酶活力为9.37 U/g木薯干重;再分别通过丙酮沉淀、离子交换层析和凝胶过滤层析进行纯化,β-葡萄糖苷酶酶活力为1.14 U/g木薯干重,经纯化β-葡萄糖苷酶纯度提高了14.62倍,总活力回收率为12.14%,电泳测得其分子量约70 kDa。该酶米氏常数K_(m)为3.60 mmol/L,V_(max)为12.36μmol/(min·mg protein);其最适pH为7.0,pH在6.0~8.0之间有较好的稳定性;在40℃以内有良好稳定性,在4℃存放30 d酶活力剩余81.78%。Mn^(2+)和K^(+)对酶有一定的促进作用,Al^(3+)、Cu^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)、Ca^(2+)、Ba^(2+)、Na^(+)、尿素和SDS对酶没有显著影响(P>0.05),而Fe^(3+)、Fe^(2+)、Ag^(+)和EDTA均会不同程度地抑制酶活性,其中Ag^(+)的抑制作用最强。研究结果可为今后木薯块根中的β-葡萄糖苷酶的应用提供理论依据。