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咪唑类离子液体长期暴露对鲤肠道形态、氧化应激、免疫和肠道菌群的影响
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作者 张艳敏 马丽美 +8 位作者 蔡慧敏 梁晓敏 游富 江爱霞 杨国坤 张新党 申亚伟 常绪路 孟晓林 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期193-203,共11页
以鲤(Cyprinus carpio L.)为受试对象,探究3种不同烷基链咪唑类离子液体(Alkyl ionic liquids,AILs)([C6mim]Cl、[C8mim]Cl和[C_(12)mim]Cl,暴露浓度分别为4.97、2.15和0.09 mg/L)对鲤肠道的毒性作用。结果表明随烷基链长度增加,与对照... 以鲤(Cyprinus carpio L.)为受试对象,探究3种不同烷基链咪唑类离子液体(Alkyl ionic liquids,AILs)([C6mim]Cl、[C8mim]Cl和[C_(12)mim]Cl,暴露浓度分别为4.97、2.15和0.09 mg/L)对鲤肠道的毒性作用。结果表明随烷基链长度增加,与对照组(NC)相比(1)鲤肠绒毛高度和肌层厚度显著降低(P<0.05);(2)[C8mim]Cl组T-AOC水平显著性升高(P<0.05);[C_(12)mim]Cl组GSH-Px、LDH、ACP酶活性和T-AOC水平显著性升高(P<0.05);(3)促炎因子IL-6、IL-8基因表达量显著升高(P<0.05),[C_(12)mim]Cl组尤为明显;(4)[C6mim]Cl和[C_(12)mim]Cl组鲤肠道菌群Chao1和Ace指数显著升高(P<0.05)。PCoA和UPGMA聚类分析结果表明3种AILs暴露改变了鲤肠道菌群组成。[C8mim]Cl和[C_(12)mim]Cl组有益菌厚壁菌门(Firmicutes)丰度显著降低(P<0.05)。3种AILs暴露均使黄杆菌属(Flavobacterium)等致病菌丰度显著增加(P<0.05),鲸杆菌属(Cetobacterium)等有益菌丰度降低。PICRUSt2菌群功能预测分析发现,[C6mim]Cl、[C_(12)mim]Cl组辅助因子和维生素代谢、外源生物降解和代谢等与碳氮循环功能相关途径丰度升高。综上,不同烷基链AILs暴露均可造成鲤肠道组织形态改变、氧化应激和免疫损伤,改变肠道菌群结构,且毒性随烷基链长度增加呈一定上升趋势。研究结果将为不同烷基链AILs对鱼类肠道的生态毒性机制研究提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 咪唑类离子液体 氧化应激 免疫 肠道菌群 黄河鲤
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嗜黏蛋白阿克曼菌对鲤糖代谢的调控机制
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作者 王亚娓 黄真屹 +6 位作者 杨博雅 游富 张新党 杨国坤 常绪路 冯世坤 孟晓林 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期44-59,共16页
为探究巴氏灭活的阿克曼菌(Akk)调控鲤糖代谢的分子机制,实验通过不同糖水平(20%、30%、40%、50%葡萄糖)探究体重(10.5±1.0)g的鲤4周和8周时胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)分泌及阿克曼菌定植的时空变化;在不同... 为探究巴氏灭活的阿克曼菌(Akk)调控鲤糖代谢的分子机制,实验通过不同糖水平(20%、30%、40%、50%葡萄糖)探究体重(10.5±1.0)g的鲤4周和8周时胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)分泌及阿克曼菌定植的时空变化;在不同糖水平实验基础上,设置含有40%葡萄糖的3个不同Akk浓度(10^(8)、10^(9)和10^(10)CFU/g)P-Akk组,探究添加P-Akk 4周后对鲤(16.38±0.39 g)糖代谢及GLP-1的调控;通过P-Akk孵育鲤原代肝脏、肠细胞实验,共同探究不同糖水平下鲤肠道Akk、GLP-1对糖代谢的调控机制。结果显示,(1)随着饲料中葡萄糖含量的升高,鲤血清中GLP-1b含量显著降低,4周时高糖组鲤肠道GLP-1a、GLP-1b以及肠道内容物中Akk丰度均显著降低,但8周时无显著性差异。(2)P-Akk处理后,鲤血清中葡萄糖、GLP-1含量显著减少;中肠绒毛高度、肌层厚度显著增加,GLP-1含量减少,短链脂肪酸含量增加,muc2 mRNA表达水平升高;此外,P-Akk上调肝脏中ampk、pi3k、akt及糖酵解基因gk、pfk mRNA表达量,下调糖异生基因pepck mRNA表达量。(3)原代肝脏、肠细胞孵育结果显示,P-Akk处理肠细胞后GLP-1含量显著减少,而gpr40的mRNA表达量升高;此外肝脏细胞中糖酵解基因gk、pfk mRNA表达量显著升高。综上,外源添加P-Akk可以缓解高糖饲料引起的血糖升高,维持葡萄糖稳态。该研究结果可为Akk作为益生菌在水产饲料中的应用提供理论基础。 展开更多
关键词 不同糖水平 胰高血糖素样肽-1(GLP-1) 糖代谢
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草鱼subfatin分子鉴定及表达特性分析
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作者 杨博雅 顾嘉宁 +5 位作者 张新党 常绪路 张艳敏 冯世坤 杨国坤 孟晓林 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期159-168,共10页
Subfatin脂肪因子在哺乳动物中具有调节脂质代谢、炎症、能量消耗等多种功能,但其在鱼类中的功能研究较少。以草鱼(Ctenopharyngodon idella)为研究对象,利用RT-PCR技术克隆得到草鱼subfatin基因序列,通过葡萄糖灌喂、饥饿再投喂、诱导... Subfatin脂肪因子在哺乳动物中具有调节脂质代谢、炎症、能量消耗等多种功能,但其在鱼类中的功能研究较少。以草鱼(Ctenopharyngodon idella)为研究对象,利用RT-PCR技术克隆得到草鱼subfatin基因序列,通过葡萄糖灌喂、饥饿再投喂、诱导脂质沉积及原代肝细胞培养实验,探究了Subfatin在草鱼糖脂代谢中的生理功能。研究发现,草鱼subfatin基因全长为861 bp,编码286个氨基酸,包含3个O-连接糖基化位点。葡萄糖灌喂草鱼1和3 h后,肝脏和肠道组织中subfatin mRNA的表达量显著上调,葡萄糖处理3 h后,脑和肾脏组织中subfatin mRNA的表达量显著上调。饥饿再投喂实验结果表明,草鱼禁食14 d后,脑、脂肪、肠道和肝脏组织中subfatin mRNA的表达量显著下调,再投喂后其表达量显著上调。诱导脂肪沉积实验结果表明,诱导组的脑、脂肪、肠道和肝脏组织中subfatin基因的表达量均显著上调。葡萄糖、油酸和胰高血糖素分别孵育原代肝细胞均能显著增加subfatin基因的表达量;而胰岛素却会显著降低肝细胞中subfatin基因的表达量。综上所述,Subfatin参与了草鱼的葡萄糖和脂质代谢过程并发挥调节作用,为阐明Subfatin在鱼类中的生理功能提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 草鱼 Subfatin 分子鉴定 表达分析
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凝结芽孢杆菌对镉暴露下鲤肝脏镉含量、抗氧化能力及炎症反应的影响 被引量:1
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作者 常绪路 陈永艳 +2 位作者 康美如 冯军厂 张建新 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期150-158,共9页
为了探究凝结芽孢杆菌SCC-19对镉暴露下鲤肝脏镉含量、抗氧化能力以及炎症反应的影响,实验选取平均体重为(34.00±1.16)g的鲤450尾,随机分为5组(每组3个重复,每个重复30尾),即对照组、0.5 mg/L Cd^(2+)组、0.5 mg/L Cd^(2+)+10^(7)C... 为了探究凝结芽孢杆菌SCC-19对镉暴露下鲤肝脏镉含量、抗氧化能力以及炎症反应的影响,实验选取平均体重为(34.00±1.16)g的鲤450尾,随机分为5组(每组3个重复,每个重复30尾),即对照组、0.5 mg/L Cd^(2+)组、0.5 mg/L Cd^(2+)+10^(7)CFU/g凝结芽孢杆菌组,0.5 mg/L Cd^(2+)+10^(8)CFU/g凝结芽孢杆菌组以及0.5 mg/L Cd^(2+)+10^(9)CFU/g凝结芽孢杆菌组(分别记为DK、D、DA、DB和DC),养殖8周。结果显示,与镉暴露组相比,凝结芽孢杆菌SCC-19能够有效降低鲤肝脏中镉含量,显著提高金属硫蛋白(MT)的水平,降低血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性。此外,凝结芽孢杆菌组鲤肝脏总抗氧化能力(TAOC)、抗超氧阴离子自由基能力(ASA)和抑制羟自由基能力(AHA)水平显著高于镉暴露组,而活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)水平显著低于镉暴露组。另外,凝结芽孢杆菌SCC-19可以恢复鲤肝脏因镉暴露造成的肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β)、转化生长因子-β(TGF-β)等基因的异常表达。研究表明,凝结芽孢杆菌SCC-19可以减少镉暴露下鲤肝脏镉含量,缓解氧化应激,抑制炎症反应。研究结果有助于探索凝结芽孢杆菌做为饲料添加剂缓解水产动物镉毒性的可能性。 展开更多
关键词 益生菌 肝脏 氧化损伤
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椰果内生枯草芽孢杆菌YZ-21甘露聚糖酶基因的克隆、表达及酶学性质研究 被引量:1
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作者 和子涵 穆广亚 +4 位作者 贾一然 张晓彤 冯军厂 常绪路 张建新 《饲料工业》 北大核心 2023年第15期71-78,共8页
为了提高β-甘露聚糖酶的活性及稳定性,通过基因克隆技术克隆并表达了一株分离自椰果的内生枯草芽孢杆菌YZ-21(Bacillus subtilis YZ-21)β-甘露聚糖酶基因ManA,并使用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)测定了酶活性及稳定性。结果表明:β-甘露... 为了提高β-甘露聚糖酶的活性及稳定性,通过基因克隆技术克隆并表达了一株分离自椰果的内生枯草芽孢杆菌YZ-21(Bacillus subtilis YZ-21)β-甘露聚糖酶基因ManA,并使用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)测定了酶活性及稳定性。结果表明:β-甘露聚糖酶基因ManA序列全长1104 bp,与相同来源的β-甘露聚糖酶同源性高达97.56%,具有ManA保守结构域,符合糖苷水解酶家族GH26的典型特征。将ManA连接到pET-32a表达载体上,构建重组表达质粒pET-ManA,并导入大肠杆菌BL21(DE),经诱导获得了β-甘露聚糖酶基因ManA的高效表达。表达产物经过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶电泳分析,显示条带大小约为56.07 ku。重组酶活性为372.86 U/mL,酶学性质研究发现其最适反应温度为40℃,最适pH为7.0,最佳反应底物是瓜豆胶,酶活性能够达到392.54 U/mL。在55℃处理120 min后,酶活仍保留69.8%,pH为4.0~9.0时处理30 min后酶活性均能保留60%以上,且金属离子Ca^(2+)、Co^(2+)、Ba^(2+)对重组酶有明显激活作用。综上所述,从内生枯草芽孢杆菌YZ-21中克隆的β-甘露聚糖酶基因能在大肠杆菌中高效表达,并具有良好的稳定性。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 基因克隆 Β-甘露聚糖酶 底物特异性 酶学性质
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鲤源高黏附力地衣芽孢杆菌HF-07107分离及其益生菌特性研究
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作者 武婧玉 陈永艳 +4 位作者 贾一然 张晓彤 冯军厂 常绪路 张建新 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2711-2720,共10页
【目的】分离、鉴定鲤源高黏附力地衣孢杆菌菌株,并综合评价其作为鲤养殖饲料添加剂的潜力,为开发宿主源益生菌在鲤养殖中的应用提供参考。【方法】从健康鲤的肠道及其内容物中分离出潜在益生菌,根据形态学特征、生理生化特性、16S rRN... 【目的】分离、鉴定鲤源高黏附力地衣孢杆菌菌株,并综合评价其作为鲤养殖饲料添加剂的潜力,为开发宿主源益生菌在鲤养殖中的应用提供参考。【方法】从健康鲤的肠道及其内容物中分离出潜在益生菌,根据形态学特征、生理生化特性、16S rRNA序列比对分析、菌株系统发育进化树构建等对分离菌株进行鉴定。通过检测分离菌株的自聚集能力、共聚集能力及其在有机溶剂中的疏水性评估其黏附能力,并通过测定菌株的耐酸、耐胆盐和耐高温能力,对嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌的抑菌能力及对抗生素药敏片的敏感性,明确其是否具有益生菌特性。【结果】从健康鲤的肠道及其内容物中分离出菌株HF-07107,形态学特征显示该菌株能产生芽孢、呈革兰氏阳性、杆状,其生理生化特征与地衣芽孢杆菌一致,其16S rRNA序列与地衣芽孢杆菌ATCC 14580T相似性为99.31%,且与地衣芽孢杆菌聚类在同一分支上,综合鉴定该菌株为地衣芽孢杆菌。菌株HF-07107自聚集能力最高达72.92%,与迟缓爱德华氏菌和嗜水气单胞菌的共聚集能力分别为96.15%和60.23%,在有机溶剂甲苯、二甲苯、三氯甲烷、正己烷中的疏水性值较高(90.00%以上),说明菌株HF-07107有高黏附力。同时,菌株HF-07107能耐受pH 2.0、0.3%胆盐浓度和90℃高温环境,抑制嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌的生长,对复方新诺明、丁胺卡那、环丙沙星、庆大霉素、红霉素、四环素、头孢唑林和诺氟沙星等8种抗生素敏感。【结论】鲤源潜在益生菌地衣芽孢杆菌HF-07107具有高黏附特性,能耐受不良环境,抑制病原菌生长,可作为宿主源益生菌应用于水产养殖。 展开更多
关键词 宿主源益生菌 地衣芽孢杆菌 黏附特性 鲤源 菌株分离
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基于宏基因组学研究怀地黄对鲤鱼肠道微生物群落组成的影响 被引量:1
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作者 常绪路 康美如 +1 位作者 冯军厂 张建新 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第5期124-130,I0005,I0006,I0007,共10页
鲤鱼(Cyprinus carpio L.)是我国淡水养殖鱼类的主要品种之一,其养殖过程中病害给养殖业带来重大经济损失.已有研究表明怀地黄(Rehmannia glutinosa,RG)作为饲料添加剂,具有提高鲤鱼免疫力和抵抗病害的功能,但机制尚不明确.利用宏基因... 鲤鱼(Cyprinus carpio L.)是我国淡水养殖鱼类的主要品种之一,其养殖过程中病害给养殖业带来重大经济损失.已有研究表明怀地黄(Rehmannia glutinosa,RG)作为饲料添加剂,具有提高鲤鱼免疫力和抵抗病害的功能,但机制尚不明确.利用宏基因组技术研究饲料中添加4%(质量分数)怀地黄对鲤肠道微生物群落组成的影响.结果表明梭杆菌门(Fusobacteria),变形杆菌门(Proteobacteria),拟杆菌门(Bacteroidetes),广古菌门(Euryarchaeota),奇古菌门(Thaumarchaeota),短尾噬菌体(Siphoviridae),肌尾噬菌体(Myoviridae),长尾噬菌体(Podoviridae),子囊菌门(Ascomycota)和担子菌门(Basidiomycota)是鲤肠道主要微生物类群.怀地黄可以增加鲤鱼肠道中益生菌、短链脂肪酸产生菌和产甲烷古菌的丰度,同时降低一些鱼类病毒的丰度.研究结果表明,饲料中添加怀地黄可以改善鲤鱼肠道微生物组成,提高有益菌的丰度而降低有害微生物的含量.研究结果为解析怀地黄增强鲤鱼免疫力的机制奠定了基础. 展开更多
关键词 怀地黄 鲤鱼 肠道微生物组 宏基因组
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微生物β-甘露聚糖酶的研究进展 被引量:18
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作者 张建新 宋宜乐 +1 位作者 冯军厂 常绪路 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第4期7-10,共4页
β-1,4-D-甘露聚糖酶是一种广谱诱导型多功能酶,广泛存在于植物、动物和微生物中,其主要存在于微生物中,主要水解产物为甘露寡糖。该文对β-甘露聚糖酶的来源、酶结构、催化机制及过去和现在的应用进行了综述,并对β-甘露聚糖酶在动物... β-1,4-D-甘露聚糖酶是一种广谱诱导型多功能酶,广泛存在于植物、动物和微生物中,其主要存在于微生物中,主要水解产物为甘露寡糖。该文对β-甘露聚糖酶的来源、酶结构、催化机制及过去和现在的应用进行了综述,并对β-甘露聚糖酶在动物生产、饲料、食品、医药、石油开采及生物技术等方面的广泛应用进行介绍,为β-甘露聚糖酶的基础研究和开发提供参考和依据。 展开更多
关键词 Β-甘露聚糖酶 来源 结构 催化机制 应用
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鲤细胞因子多克隆抗体的制备及检测 被引量:6
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作者 冯军厂 常绪路 +5 位作者 朱振祥 郭祥瑞 赵燕静 刘慧芬 张建新 聂国兴 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1615-1625,共11页
为从蛋白质水平研究细胞因子在鲤体内免疫应答过程中的合成变化,本研究采用PCR技术克隆TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β基因含有部分抗原决定簇的片段,引入双酶切位点Bam HⅠ和HindⅢ后连接至p ET-32a/21a,构建相应的表达载... 为从蛋白质水平研究细胞因子在鲤体内免疫应答过程中的合成变化,本研究采用PCR技术克隆TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β基因含有部分抗原决定簇的片段,引入双酶切位点Bam HⅠ和HindⅢ后连接至p ET-32a/21a,构建相应的表达载体,制备多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,并以此作为实验工具,检测经嗜水气单胞菌感染后鲤血清中炎性细胞因子的合成变化。结果显示,基因TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β融合蛋白分子量分别约为31.8、31.7、35.3、32.5、18.0和33.6 ku;抗体效价达到2.4×106;在病原菌感染后的不同阶段,促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12和抗炎细胞因子IL-10、TGF-β呈现出不同的合成变化。研究表明,制备的抗体具有较高的效价、亲和力和特异性,可用于鲤细胞因子的定量研究,该抗体的获得为鲤免疫应答与细胞因子合成的系统研究奠定了基础。同时,获取的鲤细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β的抗体亦可用于其他鱼类细胞因子蛋白质水平的定量研究。 展开更多
关键词 细胞因子 原核表达 抗体效价 病原菌 ELISA
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饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响 被引量:5
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作者 李衡 曹慧 +7 位作者 杨国坤 常绪路 张艳敏 张建新 胡文攀 朱振祥 李克克 孟晓林 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期1831-1844,共14页
为研究饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响,本试验在基础饲粮中分别添加0(对照)、1%和2%的怀山药,选择健康状况良好的180尾鲤[(75.25±1.45)g],随机分为3组,每组3个重复。饲养8周后检测其生长性能、肠道酶活性、肠组... 为研究饲料添加怀山药对鲤生长、肠屏障及肠道菌群的影响,本试验在基础饲粮中分别添加0(对照)、1%和2%的怀山药,选择健康状况良好的180尾鲤[(75.25±1.45)g],随机分为3组,每组3个重复。饲养8周后检测其生长性能、肠道酶活性、肠组织形态、肠道防御屏障相关基因表达以及肠道内容物短链脂肪酸(SCFAs)含量和肠道菌群的变化。结果显示:1)与对照组相比,添加怀山药对鲤生长性能无显著影响(P>0.05),但可以增加肠微绒毛密度和完整性,增加杯状细胞数量、肠道黏膜褶皱数量和肠绒毛高度,从而改善鲤肠道组织结构,提高吸收表面积。2)与对照组相比,怀山药组肠道组织过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性增强(P>0.05),白细胞介素-1β(IL-1β)基因相对表达量显著升高(P<0.05),转化生长因子-β(TGF-β)、闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)和Toll样受体4(TLR4)基因相对表达量也显著上调(P<0.05)。3)肠道菌群高通量测序结果表明,在门水平上,梭杆菌门、变形菌门和拟杆菌门是鲤肠道的优势类群。与对照组相比,怀山药组梭杆菌门相对丰度显著增加(P<0.05),而变形菌门相对丰度显著下降(P<0.05);在属水平上,与对照组相比,怀山药组肠道鲸杆菌属相对丰度显著增加(P<0.05),而气单胞菌属相对丰度显著下降(P<0.05)。4)与对照组相比,添加怀山药后,肠道内容物乙酸和SCFAs的含量显著升高(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加怀山药可以改善鲤肠道菌群组成结构、增强肠上皮防御屏障、提升机体免疫力,可作为一种潜在开发的免疫刺激剂应用于水产养殖。 展开更多
关键词 怀山药 肠道菌群 肠屏障 免疫
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产酸芽孢杆菌的筛选与生物学特性研究 被引量:6
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作者 张建新 李梦 +4 位作者 郭祥瑞 黄梦媛 陈永艳 冯军厂 常绪路 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2021年第5期96-103,共8页
使用改良MRS培养基从养殖池塘底泥中分离得到一株具有产酸能力的芽孢杆菌,命名为DN-5.通过形态观察,生理生化指标测定,扫描电镜观察,16S rDNA同源序列比对和gyrB基因及系统发育树分析,确定该菌株为副地衣芽孢杆菌(Bacillus paralichifor... 使用改良MRS培养基从养殖池塘底泥中分离得到一株具有产酸能力的芽孢杆菌,命名为DN-5.通过形态观察,生理生化指标测定,扫描电镜观察,16S rDNA同源序列比对和gyrB基因及系统发育树分析,确定该菌株为副地衣芽孢杆菌(Bacillus paralichiformis).对该菌株发酵液中的代谢产物进行气相-质谱分析,发现DN-5可产生丁酸、丙酸和乙酸等短链脂肪酸.生物学特性研究表明,DN-5对嗜水气单孢菌(Aeromonas hydrophila)、大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)均有良好的抑制作用,抑菌圈直径分别达17.40 mm、9.77 mm和21.03 mm.同时,对菌株DN-5进行耐热、耐酸和耐胆盐处理,发现DN-5具有较强的耐热性能和良好的耐酸、耐胆盐能力.对庆大霉素、链霉素、氨苄青霉素等抗生素均表现为敏感(S).DN-5既具有乳酸菌产酸的特性,又具有芽孢杆菌的优势,且具有很好的安全性,在水产养殖中具有广阔的应用前景. 展开更多
关键词 产酸 副地衣芽孢杆菌 菌株筛选 抗逆性
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椰果内生枯草芽孢杆菌YZ-21产β-甘露聚糖酶的纯化及酶学性质研究 被引量:3
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作者 张建新 郭祥瑞 +2 位作者 穆广亚 冯军厂 常绪路 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第3期95-102,共8页
[目的]分离纯化来源于内生枯草芽孢杆菌YZ-21的β-甘露聚糖酶,并研究其酶学性质.[方法]采用乙醇沉淀法、硫酸铵盐析法、聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH 4)2SO 4]双水相体系进行分离与纯化,在此基础研究它的酶学性质.[结果]比较3种纯化方法,... [目的]分离纯化来源于内生枯草芽孢杆菌YZ-21的β-甘露聚糖酶,并研究其酶学性质.[方法]采用乙醇沉淀法、硫酸铵盐析法、聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH 4)2SO 4]双水相体系进行分离与纯化,在此基础研究它的酶学性质.[结果]比较3种纯化方法,最优方法为双水相萃取法,在双水相体系为16%(NH 4)2SO 4、18%PEG2000、2%NaCl条件下,纯化倍数最高可以达到3.06,酶回收率达到99.26%;酶学性质研究表明,β-甘露聚糖酶的最适反应pH为7.0,最适的反应温度是40℃,pH稳定性在3.0~7.0,热稳定范围在35~55℃之间;Ca^2+,Ba^2+,Mg^2+,K^+,Co^2+对酶都有激活作用,而Ca^2+激活作用最强,Cu^2+,Na^+,Zn^2+,Mn^2+,EDTA对酶有抑制作用.[结论]利用双水相萃取法较好纯化了β-甘露聚糖酶,酶学性质良好,可以广泛应用于饲料添加剂、纸浆漂白和食品加工等领域. 展开更多
关键词 Β-甘露聚糖酶 枯草芽孢杆菌 分离纯化 酶学性质
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葡甘聚糖酶高产菌株Bacillus subtilis的超剂量诱变育种 被引量:1
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作者 张吨 张建新 +3 位作者 常绪路 冯军厂 郭祥瑞 贵茜 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第2期99-103,共5页
超剂量诱变育种就是加大诱变剂处理剂量,提高菌株突变幅度,从而获得较好的诱变效果.以葡甘聚糖酶产生菌Bacillus subtilis MY-1为初始菌株,先用紫外线、硫酸二乙酯进行单因子诱变,再用超剂量复合诱变,经过透明圈法和摇瓶筛选,得到了一... 超剂量诱变育种就是加大诱变剂处理剂量,提高菌株突变幅度,从而获得较好的诱变效果.以葡甘聚糖酶产生菌Bacillus subtilis MY-1为初始菌株,先用紫外线、硫酸二乙酯进行单因子诱变,再用超剂量复合诱变,经过透明圈法和摇瓶筛选,得到了一株高产葡甘聚糖酶的突变菌株,命名为Bacillus subtilis UDMY-25,连续传代培养5次,发酵酶活稳定在5 387.2U/mL以上,较原初始菌株提高了44.8%,该菌株产酶能力处于同领域较高水平,具有较好的开发潜力和市场应用价值. 展开更多
关键词 葡甘聚糖酶 紫外线 硫酸二乙酯
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养殖池塘黄河鲤肠道硫酸盐还原菌群落特征解析
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作者 马丽美 蔡慧敏 +7 位作者 梁晓敏 游富 江爱霞 杨国坤 张新党 常绪路 张艳敏 孟晓林 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2022年第6期3-9,共7页
为探究鱼类肠道硫酸盐还原菌(sulfate-reduction bacteria,简称SRB)的群落特征,本研究选用黄河鲤(Cyprinus carpio L.)为研究对象,通过SRB功能基因(dsrB)高通量测序技术,对黄河鲤前、中和后肠SRB功能群进行检测。研究结果显示:黄河鲤肠... 为探究鱼类肠道硫酸盐还原菌(sulfate-reduction bacteria,简称SRB)的群落特征,本研究选用黄河鲤(Cyprinus carpio L.)为研究对象,通过SRB功能基因(dsrB)高通量测序技术,对黄河鲤前、中和后肠SRB功能群进行检测。研究结果显示:黄河鲤肠道SRB主要分布在中肠和后肠,中肠SRB主要包括变形菌门(Proteobacteria)的脱硫球茎菌属(Desulfobulbus)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、互营杆菌属(Syntrophobacter),厚壁菌门(Firmicutes)的脱亚硫酸菌属(Desulfitobacterium)和绿弯菌门(Chloroflexi)的暖绳菌属(Caldilinea);后肠SRB主要分布在变形菌门的脱硫球茎菌属、脱硫弧菌属、脱硫菌属(Desulfotalea)、互营杆菌属、脱硫念珠菌属(Desulfomonile)和鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)。依据高通量测序结果的FAPROTAX(Functional Annotation of Prokaryotic Taxa)数据库代谢功能预测显示,黄河鲤肠道SRB主要参与硫化合物呼吸、硫酸盐呼吸和化能异养功能。 展开更多
关键词 黄河鲤(Cyprinus carpio L.) 肠道菌群 硫酸盐还原菌(SRB) dsrB高通量 功能预测
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新农科背景下水产类专业实习课程思政探索与实践
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作者 李佳璇 常绪路 +1 位作者 朱雷 张建新 《河南水产》 2024年第3期37-39,共3页
在新农科背景下,水产类专业应落实立德树人根本任务,推进“课程思政”建设。专业实习作为理论教学的继续、扩展和深化,在培养学生实践动手能力和创新能力方面起到重要作用。如何在专业实习过程中以润物细无声的形式融入思想政治教育显... 在新农科背景下,水产类专业应落实立德树人根本任务,推进“课程思政”建设。专业实习作为理论教学的继续、扩展和深化,在培养学生实践动手能力和创新能力方面起到重要作用。如何在专业实习过程中以润物细无声的形式融入思想政治教育显得尤为重要。本文以河南师范大学水产类专业实习为例,探讨了专业实习课程思政教育的课程概况、思政目标、融入点、实施路径以及建设成效,旨在为其他相关院校开展专业实习课程思政提供思路和参考。 展开更多
关键词 新农科 水产 课程思政 专业实习
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新农科视域下渔业发展专业学位研究生培养“四新”体系重构
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作者 孟晓林 李学军 +2 位作者 李莉 杨国坤 常绪路 《河南水产》 2023年第6期38-40,共3页
以全日制渔业发展专业学位研究生培养体系构建为研究对象,结合河南师范大学水产学院的实践探索,围绕“新课程体系”、“新实践体系”、“新导师体系”、“新管理体系”的重塑开展讨论,旨在为新农科建设过程中渔业发展专业学位研究生的... 以全日制渔业发展专业学位研究生培养体系构建为研究对象,结合河南师范大学水产学院的实践探索,围绕“新课程体系”、“新实践体系”、“新导师体系”、“新管理体系”的重塑开展讨论,旨在为新农科建设过程中渔业发展专业学位研究生的高质量培养提供参考。 展开更多
关键词 渔业发展 专业学位研究生 “四新”体系
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水产微生物学课程思政教育的探索与实践 被引量:4
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作者 常绪路 张建新 《河南水产》 2021年第2期36-38,共3页
涉农专业应落实立德树人根本任务,深入挖掘专业课程中蕴含的思想政治教育元素,培养学生家国情怀。本文以河南师范大学水产养殖专业核心课程-水产微生物学课程为例,分析水产养殖专业课开展课程思政教育的必要性,并从课程概况、思政目标... 涉农专业应落实立德树人根本任务,深入挖掘专业课程中蕴含的思想政治教育元素,培养学生家国情怀。本文以河南师范大学水产养殖专业核心课程-水产微生物学课程为例,分析水产养殖专业课开展课程思政教育的必要性,并从课程概况、思政目标、课程思政融入点、实施路径以及效果评价方面开展课程思政教育的探索和实践。 展开更多
关键词 水产养殖 水产微生物学 课程思政
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鲤源产β-甘露聚糖酶Bacillus velezensis HF-14109的分离鉴定及其酶学和生物学特性研究 被引量:3
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作者 张建新 陈永艳 +6 位作者 和子涵 武婧玉 李梦 黄梦媛 孟晓林 常绪路 冯军厂 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期3062-3078,共17页
【目的】以黄河鲤为材料,从其肠道内分离具有产β-甘露聚糖酶功能的益生菌。【方法】采用平板水解圈法初筛,摇瓶发酵法复筛获得产β-甘露聚糖酶的菌株,通过形态学观察、生理生化试验、16S rRNA基因序列和比较基因组分析对该菌株进行鉴定... 【目的】以黄河鲤为材料,从其肠道内分离具有产β-甘露聚糖酶功能的益生菌。【方法】采用平板水解圈法初筛,摇瓶发酵法复筛获得产β-甘露聚糖酶的菌株,通过形态学观察、生理生化试验、16S rRNA基因序列和比较基因组分析对该菌株进行鉴定,并用DNS定糖法测定酶学活性,用耐高温、耐酸、耐胆盐和平板打孔扩散法对其益生特性进行研究,用滤纸片法、腹腔注射法等对其生物安全性进行评价。【结果】本研究通过刚果红染色从鲤肠道中分离筛选出产β-甘露聚糖酶的细菌62株,其中HF-14109菌株产酶能力最强。通过形态学观察、生理生化试验、16S rRNA基因序列和比较基因组分析对该菌株进行鉴定,确定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。酶学性质研究发现,该酶最适反应温度为45℃、最适pH为6.0,在温度20–80℃、pH 4.0–9.0范围内都较为稳定;Cu^(2+)、Fe^(3+)、Zn^(2+)、Ba^(2+)对该酶具有激活作用,而Mn^(2+)、Ca^(2+)对该酶具有抑制作用;对魔芋粉、瓜尔胶和槐豆胶都有较好的降解能力。生物学特性研究表明,HF-14109对酸、高温、胆盐具有较好的耐性,对大肠杆菌(Escherichia coli)EC 05、迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)ET 03、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)SA 16、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)Ah 01等均有抑制作用。安全性评价显示,用107、108、109浓度HF-14109菌悬液对黄河鲤腹腔注射后,未出现死亡及异常状况;该菌株对庆大霉素、卡那霉素、克林霉素、氯霉素、红霉素、链霉素、四环素、万古霉素、氨苄西林等均不具有耐药性。【结论】本研究从黄河鲤(Cyprinus carpio)肠道筛选到一株产β-甘露聚糖酶的贝莱斯芽孢杆菌HF-14109,具有较高的酶活性和良好的酶学性质、益生特性和安全性,可作为潜在消除水产饲料中甘露聚糖抗营养因子的功能益生菌。 展开更多
关键词 贝莱斯芽孢杆菌 Β-甘露聚糖酶 肠道细菌 酶学性质 功能益生菌
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水产专业渔业统计学教学改革与探索
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作者 常绪路 张玉茹 +2 位作者 李慧 狄桂兰 张建新 《河南水产》 2018年第3期37-38,共2页
渔业统计学是一门有关数据收集与分析的方法学课程,是高等农业院校水产相关专业的学科基础课程,其在水产研究中的作用越来越重要。因此,为了提高渔业统计学的教学质量,文章通过分析渔业统计学教学中存在的主要问题,有针对性地提出相应... 渔业统计学是一门有关数据收集与分析的方法学课程,是高等农业院校水产相关专业的学科基础课程,其在水产研究中的作用越来越重要。因此,为了提高渔业统计学的教学质量,文章通过分析渔业统计学教学中存在的主要问题,有针对性地提出相应的教学改革措施。 展开更多
关键词 水产专业 渔业统计学 教学改革
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案例教学在专业学位研究生现代生物学实验技术课程中的应用实践 被引量:4
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作者 杨丽萍 秦超彬 +3 位作者 杨国坤 常绪路 闫潇 聂国兴 《河南水产》 2020年第6期31-33,共3页
研究生课程案例教学是近年来广泛开展的一种改变的教学方式,即由传统教学课程,改变为以案例方式引导学生思考、师生共同参与的教学方式,来提升教学质量的教学方法。现代生物学实验技术是水产养殖专业硕士研究生必修课之一。本文总结归... 研究生课程案例教学是近年来广泛开展的一种改变的教学方式,即由传统教学课程,改变为以案例方式引导学生思考、师生共同参与的教学方式,来提升教学质量的教学方法。现代生物学实验技术是水产养殖专业硕士研究生必修课之一。本文总结归纳现代生物学相关案例,构建教学案例库,并从现代生物学实验技术课程特点、案例库建设、案例库应用前景、案例库建设的意义等方面探讨现代生物学实验技术案例库建设在研究生教学中的应用。案例库的应用将促进专业研究生掌握现代生物学相关技术,提升执行论文过程中的实验能力,有助于提高研究生培养质量。 展开更多
关键词 现代生物学 案例库 研究生
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