高糖促进大鼠血管平滑肌细胞A7r5增殖及相关基因表达

目的观察高浓度葡萄糖对大鼠血管平滑肌细胞A7r5增殖及葡萄糖转运体4(GLUT4)、核糖体增殖物激活受体β(PPARβ)、磷酸果糖激酶(PFK)和己糖激酶(HK)mRNA表达的影响。方法将A7r5细胞分为对照组(葡萄糖浓度5.5m M)和实验组(葡萄糖浓度25m M),用MTT法检测A7r5细胞增殖,流式细胞术检测A7r5细胞周期,RT-q PCR检测A7r5细胞GLUT4、PPARβ、PFK、HK的mRNA水平。结果实验组OD值(0.680±0.031)较对照组(0.373±0.045)升高(P<0.01)。细胞周期检测表明实验组G1期细胞比例(36.7%)较对照组(62.8%)下降(F=109.8,P<0.05);实验组S期细胞比例(44.2%)较对照组(23.1%)下降(F=103.1,P<0.05)。RT-q PCR结果显示,与对照组比较实验组GLUT4和PPARβ的mRNA表达降低,2-ΔΔCt值分别为(0.491±0.027)、(0.512±0.273)(P<0.01或P<0.05);而实验组PFK与HK2的mRNA表达水平均较对照组升高,2-ΔΔCt值分别为(2.426±0.610)、(5.757±0.946)(P<0.05或P<0.01)。结论高糖可促进A7r5细胞增殖,并改变A7r5细胞GLUT4、PPARβ、PFK和HK的mRNA表达水平。

坎地沙坦抗高糖诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖作用

目的探讨坎地沙坦(Cand)对高糖诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞株A7r5增殖的影响及作用机制。方法体外培养A7r5细胞,分为对照组、高糖组、Cand(低、中、高)剂量组;通过CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测p-c-Raf、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达水平。结果与对照组比较,高糖组A7r5细胞增殖活性明显增强,细胞周期S期比例[(30.503±1.521)%]明显增加(P<0.01),A7r5细胞内p-c-Raf、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达水平[分别为(1.060±0.087)、(1.155±0.064)、(1.924±0.065)]明显升高(P<0.05);与高糖组比较,Cand高剂量组A7r5细胞增殖活性下降,细胞周期S期比例[(21.677±1.690)%]下降(P<0.01),A7r5细胞内p-c-Raf、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达水平[分别为(0.658±0.039)、(0.821±0.049)、(0.795±0.028)明显下降(P<0.01)。结论坎地沙坦对高糖诱导的A7r5细胞增殖具有抑制作用,其机制可能与抑制细胞周期及信号传导通路上3种蛋白磷酸化有关。