葶苈大枣泻肺汤通过ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴对心梗后心衰模型大鼠心室重构的影响

目的探讨经方葶苈大枣泻肺汤对心肌梗死后心力衰竭模型大鼠心室重构的作用机制。方法应用左冠状动脉前降支结扎术构建心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,分8组:假手术组、模型组、A779组(1 mg/kg)、A779(1 mg/kg)+葶苈大枣泻肺汤等效剂量组(0.8 g/kg)、A779(1 mg/kg)+葶苈大枣泻肺汤高剂量组(1.6 g/kg)、葶苈大枣泻肺汤等效剂量组(0.8 g/kg)、葶苈大枣泻肺汤高剂量组(1.6 g/kg)和氯沙坦钾组(10 mg/kg),各组分别给予等体积蒸馏水或者相应的药物,灌胃4周。采用Masson染色法测定大鼠心肌组织中胶原纤维分布;采用碱水解法测定心肌组织羟脯氨酸(Hyp)含量;采用免疫组化法检测心肌组织中Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)的表达水平;采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、可溶性致瘤性抑制因子2(sST-2)等心肌纤维化相关指标;采用Western blot法检测心肌组织中血管紧张素转换酶2-血管紧张素-(1-7)-Mas[ACE2-Ang-(1-7)-Mas]轴相关蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组、A779组心肌细胞排列紊乱,胶原纤维沉积明显增多,心肌纤维化明显,Hyp含量和MMP-2、MMP-9、sST-2水平显著升高,COLⅠ、COLⅢ阳性表达显著增强,TIMP-1水平和ACE2、Ang-(1-7)、Mas蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,葶苈大枣泻肺汤等效剂量组和高剂量组上述指标均可得到不同程度的改善。与A779组比较,A779+葶苈大枣泻肺汤等效剂量组及A779+高剂量组心肌排列及胶原分布可一定程度地改善,Hyp含量和MMP-2、MMP-9水平降低,COLⅠ、COLⅢ阳性表达显著减少(P<0.05),但Ang-(1-7)和Mas蛋白表达水平未显著升高。结论葶苈大枣泻肺汤可通过提高ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴蛋白的表达改善心肌梗死后心力衰竭模型大鼠的心室重构。

心脉隆注射液治疗蒽环类药物化疗后心脏毒性的Meta分析

目的系统评价心脉隆注射液治疗蒽环类药物诱导的心脏毒性的作用。方法计算机检索中国知网(CNKI)、万方数据知识服务平台(Wanfang)、维普中文期刊(VIP)、PubMed、Embase、the Cochrane Library中、英文数据库中从建库起至2020年7月有关心脉隆注射液治疗蒽环类药物心脏毒性的随机对照试验。2位研究者按照纳入、排除标准进行文献筛选和资料提取。运用RevMan 5.3软件对结局指标进行Meta分析,采用TSA v0.9软件对心电图异常率进行试验序贯分析。结果共纳入研究8项,涉及对象660例,其中试验组330例,对照组330例。Meta分析结果显示,试验组在提高左心室射血分数(LVEF)[MD=4.95,95%CI(3.44,6.45),P<0.00001],提高二尖瓣环舒张早期与心房收缩期峰值速度比率(E/A)[MD=0.28,95%CI(0.09,0.46),P=0.003],缩小左心室收缩末期内径(LVESD)[MD=-0.51,95%CI(-0.74,-0.29),P<0.00001]、左心室舒张末期内径(LVEDD)[MD=-0.50,95%CI(-0.62,-0.37),P<0.00001],减少心电图异常率[RR=0.28,95%CI(0.20,0.40),P<0.00001],降低肌钙蛋白I(cTnI)[SMD=-2.62,95%CI(-3.55,-1.69),P<0.00001]方面均优于对照组。心脉隆注射液治疗未增加药物不良反应发生率。试验序贯分析显示心脉隆注射液对蒽环类药物诱导的心脏毒性的心电图异常率的疗效明确。结论心脉隆注射液对蒽环类药物化疗患者有心脏保护作用,可改善其产生的心脏毒性。

基于网络药理学探究丹参饮治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的潜在作用机制

目的:采用网络药理学筛选丹参饮中的活性成分和作用靶点,分析治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病的潜在作用机制。方法:通过检索中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)、PubChem、Swiss及UniProt数据库筛选丹参饮的有效成分及作用靶点,使用GeneCards和OMIM获得疾病的致病靶点,在Veney 2.1.0数据库中将药物的作用靶点和疾病的致病靶点取交集得到核心靶点。使用String数据库构建靶点蛋白质-蛋白质相互作用网络,筛选连接度排名前10位的靶点蛋白,借助网络拓扑属性分析软件Cytoscape 3.7.2构建药物活性成分-疾病-靶点网络。利用DAVID对靶点基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)中代谢通路进行富集分析。结果:从丹参饮中共筛选出活性成分78个,与冠心病相关的共同作用靶点169个,核心靶点主要包括肿瘤坏死因子、白细胞介素-6、血清白蛋白、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、血管内皮生长因子A、丝裂原活化蛋白激酶1;GO生物过程结果显示与RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、信号转导、质膜、ATP结合、蛋白同源二聚体化活性等相关;KEGG通路富集分析结果显示主要涉及磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B、肿瘤坏死因子、丝裂原活化蛋白激酶、缺氧诱导因子-1、叉头框O等信号通路。结论:丹参饮通过多种药物活性成分及靶点效应有效干预冠心病,分析成分、靶点及通路的相互关系可为进一步实验及临床研究提供基础。

槲皮素通过ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴对AngⅡ诱导下大鼠心肌收缩蛋白表达的影响

目的:探讨槲皮素(Que)通过血管紧张素转换酶2-血管紧张素-(1-7)-Mas轴[ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴]对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导下原代大鼠心肌收缩蛋白表达的影响。方法:取1~2 d日龄大鼠的心肌组织,分离、培养原代心肌细胞,并构建心肌细胞ACE2基因沉默模型。实验分为12组,其中AngⅡ组、AngⅡ+小干扰RNA(siRNA)组、AngⅡ+A779组为模型组,AngⅡ+氯沙坦组为阳性对照组,AngⅡ+Que40组、AngⅡ+Que80组、AngⅡ+siRNA+Que40组、AngⅡ+siRNA+Que80组、AngⅡ+A779+Que40组、AngⅡ+A779+Que80组为实验组,另设空白组、siRNA组。其中AngⅡ终浓度为1×10^(-6) mol/L,siRNA终浓度为50 nmol/L,Que终浓度分别为40、80μmol/L,A779(Mas受体拮抗剂)终浓度为1μmol/L,氯沙坦终浓度为1×10^(-4) mol/L。分别检测各组心肌细胞中ACE2、Ang-(1-7)、Mas的mRNA和蛋白表达水平,以及Na^(+)/Ca^(2+)交换通道(NCX)、钙泵(SERCA2a)、磷蛋白(PLB)等3种心肌收缩蛋白的表达水平。结果:与AngⅡ组比较,AngⅡ+Que80组细胞中的Mas mRNA表达水平升高(P<0.05);AngⅡ+氯沙坦组细胞中的ACE2、Mas mRNA表达水平升高(P<0.05)。与AngⅡ组比较,AngⅡ+Que40组细胞中的ACE2、Ang-(1-7)蛋白表达水平升高(P<0.05);与AngⅡ+siRNA组比较,仅AngⅡ+siRNA+Que40组Ang-(1-7)蛋白表达水平升高(P<0.05);与AngⅡ+A779组比较,仅AngⅡ+A779+Que40组Ang-(1-7)蛋白表达水平升高(P<0.05)。与AngⅡ组比较,AngⅡ+Que40组NCX蛋白表达水平降低(P<0.05),AngⅡ+氯沙坦组NCX蛋白表达水平降低(P<0.05);与AngⅡ+A779组比较,AngⅡ+A779+Que80组NCX蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:Que一定程度上提高了AngⅡ诱导大鼠心肌细胞模型中ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴的表达,从而调节心肌收缩蛋白。

冠心康通过肝胞葬作用改善LDLR^(-/-)动脉粥样硬化模型小鼠肝脏脂肪变性的机制研究

目的通过观察冠心康对肝胞葬作用的影响,探讨冠心康改善LDLR^(-/-)动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型小鼠肝脏脂肪变性的可能机制。方法选取LDLR^(-/-)小鼠西方饮食制备AS模型,随机分为模型组、冠心康组和阿托伐他汀组,另取C57BL/6J小鼠作为对照组。干预结束后,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate Aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate Transaminase,AST)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)含量;HE和油红O染色观察主动脉和肝组织病理变化;RT-qPCR和Western blot法分别检测肝脏1-磷酸-鞘氨醇受体1(Sphingosine-1-phosphate,S1P1)、趋化因子受体1(Chemokine C-X3-C-Motif Receptor 1,CX3CR1)、酪氨酸激酶(MER proto-oncogene tyrosine kinase,MERTK)、乳脂球表皮生长因子8(Recombinant Milk Fat Globule EGF Factor 8,MFGE8)mRNA和蛋白相对表达量;免疫荧光法检测肝脏胞葬信号和凋亡细胞表达。结果与对照组相比,模型组小鼠主动脉窦斑块明显增大(P<0.01),血清ALT、AST、TC、TG水平显著升高(P<0.01),肝组织可见病理变化和脂肪样变性,肝脏S1P1、CX3CR1、MERTK、MFGE8 mRNA和蛋白相对表达量显著降低(P<0.01),S1P1信号表达减弱(P<0.05)、Caspase-3(P<0.01)信号表达增强;与模型组相比,冠心康及阿托伐他汀组小鼠主动脉窦斑块明显减小(P<0.01),冠心康组小鼠血清ALT、AST、TC、TG水平显著降低(P<0.01),肝组织病理改变及脂肪样变性好转,S1P1、CX3CR1、MERTK、MFGE8mRNA和蛋白相对表达量显著升高(P<0.01),S1P1信号表达增强(P<0.01)、Caspase-3信号表达减弱(P<0.01);结论冠心康可能通过促进肝胞葬作用改善LDLR^(-/-)AS模型小鼠肝脏脂肪变性。

心力衰竭风险预警模型研究进展

心力衰竭(简称心衰)是一种全球性疾病,全世界约2600万人被影响[1]。研究发现,1年内心衰患者的病死率男性为43%,女性为36%,5年内心衰患者病死率男性为75%,女性为62%[2]。因此,心衰已成为世界范围内的主要健康威胁,其预测研究也成为医学研究的热点。心衰患者需要进行持续监测和调节,国内外多年实践证明,早预警、早诊断、早干预、早治疗可以有效地预防心血管疾病的发生,早期识别高危人群和预防心衰逐渐成为专业指南中强调的策略[3-5]。

心脉隆注射液治疗急性心肌梗死后心力衰竭疗效与安全性的Meta分析

系统评价心脉隆注射液治疗急性心肌梗死后心力衰竭的疗效与安全性。计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI),维普数据库(VIP),万方数据库(Wanfang),中国生物医学文摘数据库(SinoMed)和PubMed,EMbase,Cochrane Library等七大中英文数据库,检索时限从建库至2020年3月,筛选心脉隆注射液治疗急性心肌梗死后心力衰竭的随机对照试验;运用Cochrane协作网偏倚风险评价工具对纳入研究进行文献质量评价,利用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果共检索到相关文献926篇,最终纳入12项研究,涉及972例患者,其中试验组486例,对照组486例,纳入文献质量一般。Meta分析结果显示,心脉隆注射液联合西药常规可降低B型钠尿肽(BNP)(SMD=-5.90,95%CI[-8.45,-3.36],P<0.00001)、N末端前脑钠肽水平(NT-proBNP)(SMD=-2.28,95%CI[-3.13,-1.43],P<0.00001)、肌钙蛋白Ⅰ水平(cTnI)(SMD=-2.91,95%CI[-4.21,-1.60],P<0.0001),提高左心室射血分数(LVEF)(MD=4.67,95%CI[4.19,5.16],P<0.00001),增加6 min步行距离(6MWT)(MD=73.90,95%CI[67.51,80.28],P<0.00001),降低左心室舒张末期内径(LVEDD)(MD=-5.46,95%CI[-9.66,-1.25],P=0.01)、高敏C-反应蛋白(hs-CRP)(SMD=-3.14,95%CI[-5.04,-1.24],P=0.001)、C反应蛋白(CRP)(SMD=-1.43,95%CI[-1.94,-0.92],P<0.00001)、白细胞介素-6水平(IL-6)(SMD=-2.62,95%CI[-3.53,-1.72],P<0.00001)。安全性方面,因纳入研究不良反应发生较少,未影响治疗。结果表明,临床使用心脉隆注射液联合常规西药治疗急性心肌梗死后心力衰竭可进一步改善临床症状及相关指标,且不良反应较少,但鉴于纳入研究在数量及质量上存在一定局限性,得出的阳性结果仅作为临床诊疗的提示与参考,还需更多高质量的研究进一步证实其疗效。

参麦注射液联合右丙亚胺防治蒽环类药物心脏毒性的Meta分析及GRADE评价

目的系统评价参麦注射液联合右丙亚胺对蒽环类药物心脏毒性的防治作用。方法检索中国知网、万方知识服务平台、维普网、PubMed、Cochrane Library数据库,收集参麦注射液联合右丙亚胺防治蒽环类药物心脏毒性的随机对照试验,检索时间范围为各数据库建库至2020年7月1日。由两位研究人员独立检索、筛选及资料提取,并对纳入的研究进行方法学质量评价,采用RevMan 5.3软件对结局指标(包括肌钙蛋白、左心室射血分数、心电图异常率、B型利钠肽、肌酸激酶同工酶)进行Meta分析。基于Meta分析结果,采用GRADE证据质量分级系统对结局指标的证据质量进行评级。结果共纳入10项研究,涉及613例患者,10项研究方法学质量均偏低。Meta分析结果显示:右丙亚胺联合参麦注射液在降低肌钙蛋白[SMD=-1.84,95%CI(-2.19,-1.50),P<0.00001]、血浆脑钠肽[MD=-33.70,95%CI(-36.94,-30.46),P<0.00001]、肌酸激酶同工酶[MD=-7.59,95%CI(-8.39,-6.79),P<0.00001],提高左心室射血分数[MD=13.52,95%CI(9.91,17.12),P<0.00001]、减少心电图异常率[RR=0.40,95%CI(0.29,0.55),P<0.00001]方面均优于单纯使用右丙亚胺组。安全性方面,试验组头晕、恶心呕吐等不良反应发生率与对照组相比差异无统计学意义(P=0.49)。参麦注射液联合右丙亚胺治疗蒽环类药物化疗后心脏毒性相关结局指标的证据质量评级为低级或极低级。结论参麦注射液联合右丙亚胺在防治蒽环类药物心脏毒性方面优于单纯使用右丙亚胺,但考虑到研究质量较低,此结论仍需更多高质量研究进行确证。

基于网络药理学探讨参附汤治疗慢性心力衰竭的作用机制

目的:探究参附汤治疗慢性心力衰竭(CHF)的多成分、多靶点、多通路作用机制。方法:通过检索中药系统药理学平台(TCMSP)、Pubchem、Swiss及Uniprot数据库筛选参附汤的有效成分及作用靶点,使用人类基因数据库(GeneCards)和在线《人类孟德尔遗传》数据库(OMIM)获得疾病的致病靶点,在Veney2.1.0数据库中将药物的作用靶点和疾病的致病靶点进行交集得到核心靶点。结合STRING数据库构建靶蛋白相互作用网络,筛选连接度排名前10的靶蛋白,借助网络拓扑属性分析软件Cytoscape 3.7.2构建药物活性成分-CHF靶标网络。利用生物学信息注释数据库(DAVID)对靶点基因本体(GO)生物过程和京都基因与基因组百科全书(KEGG)中代谢通路进行富集分析。结果:从参附汤中筛选出活性成分43个,与CHF相关的共同作用靶点143个,核心靶点主要包括白介素6(IL-6)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、肿瘤坏死因子(TNF)、MAP激酶(MAPK1)、半胱氨酸蛋白酶-3 (CASP3)等;GO生物过程结果显示与RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、信号转导、蛋白质结合、ATP结合、蛋白同源二聚体化活性等相关;KEGG通路富集分析结果显示主要涉及PI3K-Akt、cGMP-PKG、MAPK、cAMP、RAS等信号通路。结论:本研究初步明确了参附汤治疗CHF的主要靶标和通路,为后续深入研究提供一定参考。

葶苈大枣泻肺汤对心梗后心衰大鼠的利尿作用研究

目的 探讨葶苈大枣泻肺汤对心肌梗死后心衰大鼠的利尿作用。方法 结扎大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,正常喂养4周后,选择LVEF≤50%的大鼠纳入心衰模型组。实验分为5组:假手术组(A),模型组(B),葶苈大枣泻肺汤等效剂量组(C),葶苈大枣泻肺汤高剂量组(D),氯沙坦组(E)。其中C组[0.8 g/(kg·d)]、D组[1.6 g/(kg·d)]、氯沙坦[10 mg/(kg·d)]药物溶于蒸馏水后灌胃给药;A、B组给予等体积蒸馏水灌胃。给药2周及4周时,将大鼠置于代谢笼中,分别收集给药后6 h、12 h、24 h尿液;检测尿液Na^(+)浓度、Cl^(-)浓度、AQP2含量;ELISA检测大鼠血清ADH含量;免疫组化法检测肾脏组织中AQP1、AQP2表达。结果 与假手术组比较,模型组6 h、12 h、24 h尿量明显减少(给药2周、4周),尿液Na^(+)、Cl^(-)含量明显降低,尿液AQP2、血清ADH明显升高,肾脏组织AQP1、AQP2蛋白阳性着色程度明显增强(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,葶苈大枣泻肺汤给药2周时,尿量改变不明显,给药4周尿量明显增加,以12 h、24 h效果最显著;葶苈大枣泻肺汤提高Na^(+)、Cl^(-)含量,降低尿液AQP2、血清ADH含量,降低肾脏组织AQP1、AQP2蛋白阳性着色程度(P<0.01,P<0.05),且高剂量组效果优于等效剂量组。结论 葶苈大枣泻肺汤具有显著利尿作用。