基于PI3K/Akt信号通路探讨和枢消积方对肝纤维化大鼠的影响

目的探究和枢消积方对肝纤维化大鼠的影响。方法40只大鼠随机分为模型组,和枢消积方低、中、高剂量组(1.625、3.25、6.5g/kg),秋水仙碱组(0.12mg/kg),每组8只,腹腔注射40%四氯化碳6周建立肝纤维化模型,同时给予相应药物干预6周;另取8只大鼠作为正常组,予以生理盐水(1mL/100g)干预6周。给药结束后,检测肝功能及肝脏组织病理学变化,免疫组化法检测肝组织α-SMA蛋白表达,Westernblot法检测肝组织CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达。利用网络药理学预测和枢消积方防治肝纤维化相关靶点及信号通路,并通过ELISA、RT-qPCR、Westernblot法对相关靶点和信号通路进行验证。结果与正常组比较,模型组大鼠肝组织胶原沉积,汇管区炎症细胞浸润,血清ALT、AST、TBIL、ALP水平升高(P<0.01),肝组织α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白水平表达升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组肝组织炎症及胶原沉积均改善,血清ALT、AST、TBIL、ALP水平降低(P<0.01),和枢消积方高剂量组和秋水仙碱组肝组织α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达降低(P<0.05)。网络药理学显示,和枢消积方防治肝纤维化核心靶点主要为Akt1、TP53、VEGFA、IL-1β,可通过调控PI3K/Akt、TNF-α、IL-17等通路发挥改善肝纤维化作用。与正常组比较,模型组大鼠肝组织PI3K、AktmRNA表达,TNF-α、IL-1β、IL-6水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt1蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,和枢消积方高剂量组和秋水仙碱组肝组织PI3K、AktmRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),各给药组肝组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt1蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论和枢消积方可减轻肝纤维化大鼠肝脏炎症反应,从而发挥改善肝纤维化作用,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路相关。

益气活血法抗肝纤维化作用机制的研究概况

肝纤维化是慢性肝病发展为肝硬化或原发性肝癌的关键,减轻或逆转肝纤维化成为近年研究热点。中医药在抗肝纤维化方面具有调控肝星状细胞、平衡细胞外基质、抑制上皮间质转化等作用,本文就中医对肝纤维化的认识、病因病机,以及对近年来中医益气活血法治疗肝纤维化的研究概况进行综述,以期为临床应用及后续研究提供支持及依据。