1,25-二羟维生素D_(3)通过糖酵解途径促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的:探讨1,25-二羟维生素D_(3)(VD_(3))对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:取体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞,随机分为6组:对照组、2-脱氧葡萄糖(2-DG,葡萄糖抑制剂)组、1μmol/L VD_(3)组、10μmol/L VD_(3)组、2-DG+1μmol/L VD_(3)组和2-DG+10μmol/L VD_(3)组。药物干预6组细胞48 h后,以葡萄糖摄取测定试剂盒检测细胞的葡萄糖摄取量、ATP试剂盒检测细胞中ATP含量和乳酸试剂盒检测细胞的乳酸水平,WB法检测MCF-7细胞中细胞色素C(Cyt c)和凋亡相关蛋白(Bcl-2、BAX、PARP1、caspase9和caspase3)的表达水平。结果:与对照组比较,VD_(3)干预后,MCF-7细胞的凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01),同时细胞的葡萄糖摄取量、ATP含量及乳酸水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),Cyt c、BAX、PARP1、caspase9及caspase3蛋白表达量明显升高(均P<0.05),Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.05或P<0.01);VD_(3)联合2-DG干预后,各组细胞检测指标的变化更为明显(P<0.05或P<0.01)。结论:VD_(3)可通过抑制人乳腺癌MCF-7细胞的糖酵解过程并以线粒体的Cyt c途径促进细胞凋亡。

蟛蜞菊内酯通过抑制JAK2/STAT3信号通路诱导人肺腺癌A549细胞凋亡

目的探讨蟛蜞菊内酯对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响及作用机制。方法不同浓度蟛蜞菊内酯(0、5、10、20、40μmol/L)作用于A549细胞12、24、48 h,MTT检测细胞的增殖情况。将细胞分为对照组,甲氨蝶呤组(2μg/mL甲氨蝶呤),蟛蜞菊内酯组(20μmol/L蟛蜞菊内酯)。流式细胞术检测细胞凋亡和周期,Western blot检测剪切的半胱氨酸/天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Janus激酶2(JAK2)、p-JAK2、信号转导与转录激活因子3(STAT3)和p-STAT3蛋白表达水平。结果蟛蜞菊内酯呈时间和剂量依赖性抑制A549细胞的增殖,其中20μmol/L蟛蜞菊内酯处理24 h即可显著抑制A549细胞增殖。与对照组比较,蟛蜞菊内酯组和甲氨蝶呤组细胞凋亡率和G_2期细胞比例显著升高(均P<0.01),促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Bax显著上调(均P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2显著下调(均P<0.01),p-JAK2和p-STAT3水平显著降低(均P<0.01)。结论蟛蜞菊内酯可诱导肺腺癌A549细胞凋亡,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活有关。

抑制PRR11基因对胰腺癌细胞SW1990行为的影响

目的:研究Proline-rich protein 11(PRR11)对胰腺癌(Pancreatic cancer)和SW1990细胞的影响。方法:用RTPCR和免疫组化检测PRR11在67例胰腺癌组织和胰腺癌旁组织样本中的表达情况;用RT-PCR的方法检测4种胰腺癌细胞中PRR11的表达,筛选出PRR11表达量最高的SW1990细胞。随机将SW1990细胞分成3组:对照组(Con组),敲减PRR11空载组(si-NC组),敲减PRR11组(siRNA-PRR11组),敲减PRR11组对PRR11进行敲减,用RT-PCR的方法检测Caspase 3、B淋巴细胞瘤-2基因(BCL2)在SW1990细胞中的表达;Transwell检测SW1990细胞的迁移能力。结果:在胰腺癌组织的免疫组化结果中,呈现有大量呈黄褐色的阳性细胞和组织,PRR11在癌旁组织的表达显著低于胰腺癌组织。PRR11在si-PRR11组的表达显著低于对照组和si-NC组。与对照组比较,Caspase 3在si-PRR11组的表达显著升高,BCL2的表达显著降低,对照组和si-NC组没有显著性差异。与对照组比较,si-PRR11组SW1990细胞的迁移能力显著降低。结论:PRR11是影响胰腺癌发生和发展的关键基因之一,PRR11的研究将为胰腺癌的致病机制和治疗提供一定的理论基础。

N-乙酰转移酶2基因多态性与骨肉瘤易感性的关系

目的:研究N-乙酰转移酶2(NAT2)基因多态性与骨肉瘤易感性的关系。方法:取骨肉瘤患者血清标本,采用PCR-RFLP检测NAT2基因的多态性,只观察M1、M2、M3 3个突变基因,观察NAT2基因型和等位基因的分布、慢乙酰化和快速乙酰化基因型在群体之间的分布,分析NAT2基因多态性和骨肉瘤临床特征之间的关系。结果:2010年1月至2015年9月期间共纳入126例骨肉瘤患者作为实验组,同时期的健康体检者119例作为对照组。在对照组中,NAT2基因型出现的频率(纯合野生型WT/WT,杂合突变体WT/MX,纯合突变体Mx/MX)分别为30.95%、50.79%、18.25%;在实验组分别为47.06%、46.22%、6.72%。两组的频率差异有统计学意义(P<0.05)。NAT2快速乙酰化基因型者患骨肉瘤的风险是慢乙酰化基因型者的1.782倍(P<0.05)。与快速乙酰化基因型骨肉瘤患者相比,慢速乙酰化基因型患者的肿瘤体积较小(P=0.008),肿瘤分化程度较低(P=0.011),更不易发生远处转移(P=0.001)。结论 :NAT2基因多态性的快速乙酰化基因型可能是骨肉瘤的一个危险因素。

姜黄素通过调控miR-141-3p表达对肾癌Caki-1细胞增殖和凋亡的作用

目的研究姜黄素通过调控miR-141-3p表达对肾癌Caki-1细胞增殖和凋亡的影响。方法将人肾癌Caki-1细胞分为对照组、miR-141-3p mimics组(转染miR-141-3p mimics)、mimics-NC组(转染mimics阴性对照序列)、20μmol/L姜黄素组(20μmol/L姜黄素处理)、20μmol/L姜黄素+miR-141-3p mimics组(转染miR-141-3p mimics,并用20μmol/L姜黄素处理)。RT-qPCR法检测各组胃癌细胞miR-141-3p mRNA表达,CCK-8试剂盒检测细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测细胞上皮细胞-间质细胞转化(EMT)标志蛋白E钙粘蛋白(E-cadherin)、N型钙粘蛋白(N-cadherin)和间质标志物波形蛋白(Vimentin)表达。结果与对照组比较,miR-141-3p mimics组和20μmol/L姜黄素组细胞增殖率降低(P<0.01),细胞凋亡率、miR-141-3p mRNA表达、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.01),N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P<0.01);与20μmol/L姜黄素组比较,20μmol/L姜黄素+miR-141-3p mimics组细胞增殖率降低(P<0.01),细胞凋亡率、miR-141-3p mRNA表达、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.01),N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P<0.01)。结论姜黄素可上调miR-141-3p mRNA表达,并与高表达miR-141-3p协同作用抑制肾癌细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与EMT标志蛋白表达相关。

结肠EB病毒阳性的炎性滤泡树突细胞肉瘤1例

患者男,52岁。因结肠镜检查提示息肉行内镜息肉切除术。镜下观察:肿瘤细胞在炎性病变背景中散在分布,形成束状、层叠状。肿瘤细胞梭形或卵圆形,有丰富的胞质,轻度嗜酸,细胞境界清楚,细胞核长形,染色质絮状或颗粒状,小而清晰的核仁,核膜薄,细胞学特征温和。免疫组织化学染色瘤细胞CD21、CD23、CD35和D2-40均阳性,原位杂交:EB病毒编码的RNA肿瘤细胞阳性。病理诊断为结肠EB阳性的炎性滤泡树突细胞肉瘤。

IL-38、IL-22和IL-17与乳腺癌发展的相关性研究

探讨IL-38、IL-22和IL-17对乳腺癌发展的影响。收集34例乳腺癌患者手术前和手术后血液及27例体检健康女性血液,检测血清中的IL-38、IL-22和IL-17水平,对术前血清IL-38与IL-22和IL-17进行相关性分析并分析IL-38与乳腺癌临床病理参数之间的关系。采用不同浓度IL-38、IL-22和IL-17处理人乳腺癌MCF-7细胞,测定其细胞活力。随后分为对照组、IL-38组、IL-38+IL-22组、IL-38+IL-17组和IL-38+IL-22+IL-17组,检测其细胞活力、凋亡情况,并采用RT-PCR检测各组PCNA、Bax和Bcl-2的mRNA表达量。结果显示患者术前血清IL-38水平显著低于对照组,术后升高,与术前相比差异有统计学意义。患者术前血清IL-22和IL-17水平显著高于健康女性,术后血清IL-22和IL-17水平显著低于术前患者。患者术前血清IL-38浓度与血清IL-22和IL-17浓度均成负相关(r=-0.445,P=0.008;r=-0.498,P=0.003)。术前血清IL-38浓度与患者年龄无关,与肿瘤直径、组织学分级和淋巴结转移有关。由此表明IL-38可能与IL-17和IL-22在乳腺癌的进程中发挥相反的作用。进一步的细胞结果表明,IL-38抑制MCF-7细胞活力,促进凋亡,而IL-22和IL-17发挥相反作用。RT-PCR结果表明,IL-38促进Bax mRNA的表达,抑制PCNA和Bcl-2 mRNA的表达,而IL-22和IL-17发挥相反的作用。本研究表明IL-38抑制乳腺癌的发展,IL-22和IL-17促进乳腺癌的发展。

体外研究青霉素对小鼠外周血小板活性与功能的影响

目的研究青霉素对血小板活性、寿命及黏附相关功能的影响。方法分离C57BL/6J小鼠外周血小板,使用10、50、100、500、1000、5000 U/mL青霉素处理24 h,MTT法检测血小板活性,计算半数抑制浓度(IC50);ELISA法检测IC50的青霉素对血小板中蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)、β血小板球蛋白(β-thromboglobulin,β-TG)、超氧化物歧化酶2(Superoxide dismutase 2,SOD2)、血小板第4因子(Platelet factor 4,PF4)和血小板内皮细胞黏附分子-1(Platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1)含量的影响。结果随着青霉素浓度的增大,血小板数目逐渐减少,血小板存活率逐渐降低,IC50值为985.68 U/mL。与对照组比较,青霉素组的PKA、β-TG、SOD2、PF4和PECAM-1的含量显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论青霉素可能通过降低PKA、SOD2、β-TG、PF4和PECAM-1含量,进而显著降低血小板存活率,抑制血小板活性及其聚集功能。