酶的分子定向进化及其应用

酶的分子定向进化是20世纪90年代初兴起的一种蛋白质工程的新策略,是一种在生物体外模拟自然进化过程的、具有一定目的性的快速改造蛋白质的方法。该方法引起了生物催化技术领域的又一次革命。目前分子定向进化技术已被广泛应用于工业、农业及制药业等的相关领域。本文详细综述了酶的分子定向进化的概念、过程、基本策略及其核心技术,并着重介绍了酶的分子定向进化技术在提高酶的活力、稳定性、底物特异性和对映体选择性等几方面的应用及取得的相关成果。

乳制品常见致病菌选择性共增菌技术研究

以乳制品常见致病菌大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌为目标菌,研究6种基础培养基、2种培养模式、20种培养基添加剂对增菌的影响,并以无显著抑制效应的添加剂对背景微生物进行了抑菌效应研究,建立了一种选择性富集目标菌的ESS培养基。使用该培养基37℃静止培养16 h,可实现目标菌的共增菌,对可能影响目标菌检测的乳制品中其他致病菌有一定抑制效果。

浅谈微生物发酵中试的影响因素

微生物发酵中试是实验室小规模生产工艺路线打通后,在模拟工业化生产条件下所进行的工艺研究,以验证放大生产后原工艺的可行性,尽可能保证研发和生产时工艺的一致性.发酵中试放大的目的是验证、复审和完善实验室工艺所确定的反应条件,为正式生产提供数据.微生物发酵中试是产品研发到生产的必经之路,是连接研发和生产的纽带,不仅为产业化生产积累必要的经验及提供数据支持,同时也是降低产业化实施风险的有效措施.微生物发酵中试有诸多影响因素,因此研究并合理利用其影响因素具有重要意义.

非达霉素产生菌种子工艺研究

为了提高非达霉素的发酵产量及发酵稳定性,替代种子配方中的动物性原料,对非达霉素产生菌的种子培养温度、配方及工艺进行了研究。结果表明:种子最佳培养温度为30℃,多肽粉和酵母蛋白胨FP102可以替代原种子配方中的牛肉膏和蛋白胨两种动物性氮源。优化后的种子配方为玉米淀粉25g/L,酵母浸粉5g/L,多肽粉3g/L,酵母蛋白胨FP1025g/L,碳酸钙4g/L,pH7.0。确定二级种子工艺为一级种子30℃培养56h,0.1%~0.2%接种量接入二级种子培养基,30℃培养48h接入发酵培养基,在成功去除动物性原料的基础上,非达霉素产量较原种子工艺提高了12.3%。

GLP-1R激动剂在治疗2型糖尿病中的研究进展

2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)的患病率日益增加,胰岛素市场份额仍然占首位,GLP-1R激动剂市场份额不断增长,除治疗T2DM外还有减肥,心血管功能改善等多重获益。近几年在国内外治疗地位逐渐提升。本文综述了GLP-1R激动剂研发进展情况,长效及口服制剂,基础胰岛素复方制剂的开发是将来主要的研发方向。

霉酚酸酯的临床应用进展

霉酚酸酯作为第3类免疫抑制剂的主力之一,临床主要用于器官移植后预防急性排斥反应,提高移植器官的存活率。在众多免疫抑制剂中因霉酚酸酯具有选择性强、毒副作用小及复发率低等优势而广泛应用于临床。此外,霉酚酸酯常与其他类型免疫剂或激素联用,在自身免疫性疾病、并发症引起的肾炎、原发性肾病综合症、结节病、皮肤病及眼科疾病等方面带来很好的治疗效果。笔者从药代动力学和临床应用两个方面进行综述,为霉酚酸酯的进一步开发与合理利用提供依据。

20MnSi钢中非金属夹杂物的研究

为提高20MnSi钢的质量,研究了钢筋中夹杂物的状况,讨论了炼钢工艺对钢中夹杂物的影响以及夹杂物对钢筋性能的影响.

鲁迅“读书法”的启示

鲁迅先生之所以学富五车、著作等身。这自然与他远大的理想、高尚的品德以及把“别人喝咖啡的功夫”都用于刻苦钻研、笔耕不辍有关。而选择科学适用的读书方法，最大限度地提高读书质量。不能不说是一个重要的因素。

罗伊乳酸杆菌甘油脱水酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

迅速升温的生物柴油投资热导致了其副产物甘油的大量积累,这一现状使得开发和利用甘油生产各种精细化工产品备受关注。本实验通过构建基因工程菌来生物转化甘油生产3-羟基丙醛,为甘油下游产品的开发开辟了一条新途径。3-羟基丙醛是一种重要的化学中间体,同时也是一种有效的抗菌剂和生物组织的固定剂,在化学工业中具有广泛的应用前景。实验主要利用甘油脱水酶N末端序列,并根据NCBI中公布的甘油脱水酶的氨基酸序列设计了一对克隆引物,并以菌株罗伊乳酸杆菌Lactobacillus reuteri的基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得约为1.6kb的片段,将其克隆到T载体上进行测序,对测序结果进行分析,重新设计两端含有EcoRI和HindIII酶切位点的表达引物,利用PCR扩增得到了甘油脱水酶基因,该基因片段长度为1674bp,编码558个氨基酸。将所得片段定向克隆到pET28b载体中,并转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中。经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳,在约65kD处检测出一蛋白表达条带,另外还对该重组菌进行比活力测定,最高比活力可达1.14U/mg,比野生型菌株提高了86.88%。