血清肝纤维化标志物与慢性丁型肝炎肝纤维化程度关系的探讨

目的探讨ALT、HBV DNA及血清纤维化标志物透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)与慢性丁型肝炎(CHD)患者肝纤维化程度的关系。方法收集2008年3月至2013年1月在广州市第八人民医院肝病科住院并未曾接受任何抗病毒治疗的CHD患者28例,检测患者血清中ALT、HBV DNA和纤维化标志物(HA、LN、PⅢP及CⅣ)的水平,并行肝活组织检查检测肝组织纤维化分期。HBe Ag阳性与阴性组间计量资料比较采用t检验,计数资料比较采用χ2检验,不同纤维化分期间比较采用非参数检验中的Kruskal-Wallis检验;相关性分析采用Spearman等级相关分析。结果 HBe Ag阳性与HBe Ag阴性组患者间肝纤维化程度差异无统计学意义(χ2=0.129,P=0.720)。肝纤维化S1、S2及S≥3 3组间HA及LN水平差异有统计学意义(Z值分别为12.035、8.457,P值分别为0.002、0.015),其中S≥3组患者水平最高[HA:(169.4±166.3)ng/ml,LN:(149.2±85.1)ng/ml]且与S1、S2组比较差异均存在统计学意义(P值均<0.05),而3组间其他实验室指标ALT、HBV DNA、PⅢP及CⅣ水平差异均无统计学意义(P值均>0.05)。肝纤维化分期与HA、LN、PⅢP及CⅣ水平呈正相关(r值分别为0.512、0.472、0.451、0.454,P值分别为0.005、0.011、0.016、0.015)。结论 HA、LN水平可能作为评估CHD患者肝纤维化程度的血清学指标。

抗病毒治疗中人类免疫缺陷病毒-1单纯及合并丙型肝炎病毒感染相关细胞因子水平的变化

由于HIV-1和HCV有共同的传播途径,HIV-1/HCV合并感染引起的慢性肝脏疾病也成为HIV-1感染者死亡的主要原因之一.既往研究发现,HCV是通过激发持续免疫介导的反应引起肝脏损害.而HIV-1也可直接侵犯人体的免疫系统.当两种病毒合并感染时,发生肝硬化的危险增加,肝脏纤维化的进程明显加速,快者可从最初感染HCV起6～10年即发展至肝硬化[1].既往研究发现,细胞因子可能参与HIV活化,在调节免疫应答和维持免疫平衡方面具有重要作用[2-3].既往很多研究已证实HIV感染导致细胞因子失调,Th1细胞因子IL-2和γ干扰素普遍减少,而Th2细胞因子IL-4、IL-10、促炎细胞因子和TNF是增加的.而Attar等[4]也发现丙型肝炎患者病情向肝硬化、腹水等进展的过程中伴随着细胞因子的变化.但目前,对HIV 1单纯感染、HIV 1/HCV合并感染和健康人群血浆中有关细胞因子变化的比较并不多,因此展开此方面的研究很有必要.

前列地尔辅助治疗乙型肝炎肝硬化的效果及对血清炎性因子的影响

目的探讨前列地尔辅助治疗乙型肝炎肝硬化的效果及对血清炎性因子的影响。方法将2016年6月~2017年6月我院收治的80例乙型肝炎肝硬化患者,按系统随机化法分为A组和B组各40例。A组在常规治疗基础上配合使用替比夫定治疗,B组在A组基础上给予前列地尔进行辅助治疗,对两组治疗3个月后的临床有效率、治疗前后乙肝病毒DNA水平及白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-22(IL-22)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)等炎症因子水平进行比较分析。结果 B组临床总有效率为90.00%,高于A组(67.50%),差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后乙肝病毒DNA水平均低于治疗前,但治疗后两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组hsCRP、IL-6和IL-22水平均低于治疗前,且B组上述指标水平均低于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论前列地尔对乙型肝炎肝硬化患者具有较好辅助治疗作用,能有效控制患者乙肝病毒DNA水平和hs-CRP、IL-6和IL-22等炎性因子水平。

巴曲亭辅助治疗肺结核咯血的可行性及安全性

目的探究巴曲亭辅助治疗肺结核咯血的疗效及安全性。方法选取2015年12月—2016年12月在本院诊断并治疗的肺结核伴咯血患者68例,随机分为治疗组34例与对照组34例,对照组采用常规治疗及止血方案,治疗组在对照组的基础上予以巴曲亭治疗,对比两组的治疗有效率及并发症(胸闷胸痛、恶心呕吐、腹泻腹痛、头晕头痛)情况。结果治疗组治疗有效率显著高于对照组(97.06%和79.41%,χ~2=5.100;P=0.023),治疗组的胸闷胸痛、恶心呕吐、腹泻腹痛、头晕头痛并发症发生率均显著低于对照组(χ~2=5.314,6.275,5.757,6.581;P=0.021,0.012,0.016,0.010)。结论巴曲亭辅助治疗肺结核疗效肯定,并能降低并发症的发生率。

外源性IL-15、IL-21对HIV-1感染者T淋巴细胞增殖的影响

目的探讨外源性细胞因子IL-15、IL-21对HIV-1感染者T淋巴细胞增殖的影响。方法研究对象为24例已接受高效抗逆转录病毒治疗(HAART)及25例未经HAART的HIV-1感染者(HAART组及HAART-nave组)。以HIV-1P24编码区的氨基酸序列人工合成的12个肽段组成的肽段库作为特异性抗原表位,另添加外源性细胞因子IL-15或者IL-21,对两组研究对象的外周血单个核细胞(PBMC)进行体外刺激培养,采用羧乙基锗倍半氧化物(CFSE)对PBMC进行示踪染色;流式细胞仪检测刺激后的淋巴细胞的增殖情况。结果 HAART-nave组和HAART组中CD4+及CD8+T细胞的增殖百分率,两组的组内比较可见,IL-21刺激的实验组(IL-21组)和IL-15刺激的实验组(IL-15组)均显著高于相应对照组(P均为0.000);HAART组CD8+T细胞增殖水平,IL-15组及IL-21组均明显高于HAART-nave组(Z=-2.394,P=0.017;Z=-2.130,P=0.033);HAART组与HAART-nave组中实验分组IL-15组及IL-21组CD4+细胞增殖情况比较差异均无统计学意义。结论外源性IL-15、IL-21均能促进HIV-1感染者HARRT治疗前及治疗后CD4+及CD8+T淋巴细胞的增殖;且两种因子对CD8+T淋巴细胞增殖的作用HAART治疗后大于HAART治疗前。

登革热的实验室早期诊断

目的建立登革热实验室早期诊断方法。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测登革病毒(DENV)NS1抗原,实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测DENV RNA并分型,对2014年广东省暴发流行期间疑似登革热的病例进行实验室早期诊断,并对两种检测方法进行比较分析。结果272例研究对象中267例临床诊断为登革热,DENV NS1抗原阳性245例,阳性率为90.1%(245/272);DENV RNA阳性256例,阳性率为94.1%(256/272)。256例核酸阳性病例中DENV-1型224例,占87.5%(224/256);DENV-2型15例,占5.9%(15/256);DENV-1型和DENV-2型同时阳性17例,占6.6%(17/256)。两种方法检出的符合率为93.0%(253/272)。结论2014年广东省登革热暴发流行主要以DENV-1为主,同时存在DENV-2型散在流行及少数DENV-1型和DENV-2型合并感染;ELISA方法检测DENV NS1抗原及Real-time PCR检测DENV RNA的两种检测方法,有助于登革热的早期检出。

外源性IL-15/IL-10受体阻断剂对HIV-1感染者T细胞体外增殖的影响

目的探讨白介素10(IL-10)受体阻断剂(Anti-IL-10R)或/和外源性IL-15(单独或联合)对HIV-1感染者T淋巴细胞增殖的影响。方法纳入50例HIV-1感染者作为研究对象,接受抗病毒治疗组(HAART组)及未接受抗病毒治疗组(HAART-na?ve组)病例分别为27例及23例。以HIV-1 P24编码区的氨基酸序列人工合成的13个肽段组成的肽段库作为特异性抗原刺激表位,采用羧乙基锗倍半氧化物(CFSE)对外周血单个核细胞(PBMC)示踪染色,在Anti-IL-10R及外源性IL-15(单独或联合)存在条件下,与PBMC共培养,流式细胞仪检测T淋巴细胞增殖情况。结果 HAART组及HAART-na?ve组,Anti-IL-10R、IL-15、Anti-IL-10R/IL-15刺激孔的CD4^+及CD8^+T的中位增殖倍数分别与对照孔比较,CD4^+T细胞的结果分别为:0.98(P=0.45),1.06(P=0.18);1.24(P=0.006),1.27(P=0.06);1.05(P=0.314),1.08(0.003),CD8^+T细胞增殖倍数分别为:0.94(P=0.45),1.17(P=0.177);1.96(P=0.000),1.37(P=0.000);1.49(P=0.000),1.34(P=0.000)。在HAART组中,CD4^+T细胞增殖与Anti-IL-10R相关(r_s=0.195,P=0.021),CD8^+T细胞增殖与IL-15相关(r_s=0.717,P<0.0001)。在HAART-na?ve组中,CD4^+及CD8^+T细胞增殖均与IL-15相关(r_s=0.341,P=0.003;r_s=0.876,P<0.0001)。无论HAART组还是HAART-na?ve组,CD4^+T细胞和CD8^+T细胞增殖与CD4、CD8、Th/Ts及HIV-1病毒载量均无明显相关性。结论外源性IL-15能促进HIV-1感染者T淋巴细胞体外增殖,并且经HAART治疗后这一作用似乎更强;IL-10R阻断剂可能对HIV-1感染者的CD4^+T淋巴细胞有潜在的体外促活化及增殖作用。

人类免疫缺陷病毒-1单纯及合并丙型肝炎病毒感染中人类免疫缺陷病毒-1特异性T淋巴细胞免疫应答

目的了解单纯感染HIV-1及合并感染HCV时HIV-1特异性T淋巴细胞免疫应答的特点。方法单纯HIV-1感染者26例和HIV-1／HCV合并感染者23例，采用免疫磁珠分选技术从外周血单个核细胞（PBMC）中分选出CD4＋T淋巴细胞及CD8＋T淋巴细胞，采用酶联免疫斑点测定（ELISPOT），以HIV-1P24编码区的氨基酸序列人工合成12个重叠肽段组成的肽段库作为特异性抗原表位，测定CD4＋T淋巴细胞、CD8＋T淋巴细胞及PBMC的IFN-7分泌细胞频数；实时荧光定量PCR检测HIV-1RNA。组间比较采用单因素方差分析及Mann-WhitneyU检验，Spearman评价组间相关性。结果单纯HIV-1感染者的HIV-1抗原特异性CD4＋T淋巴细胞中位数为25斑点形成细胞（SFC）／10。细胞，显著低于CD8＋T淋巴细胞的38SFC／10。细胞（F=4．592，P=0．037）及PBMC的53SFC／10^6细胞（F=5．436，P=0．025）。HIV-1／HCV合并感染者的HIV-1抗原特异性CD4＋T淋巴细胞（中位数为5SFC／10^6细胞，Z=2．432，P=0．015）、CD8＋T淋巴细胞（中位数为5SFC／10^6细胞，Z=-1．996，P=0．046）及PBMC（中位数为10SFC／10。细胞，Z=2．306，P=0．021）的应答频数显著低于单纯HIV-1感染者。结论在HIV-1感染中，CD4＋T淋巴细胞能对HIV-1产生-定的特异性免疫应答，但是其强度弱于CD8＋T淋巴细胞；合并HCV感染可能体HIV-1臆诳者的H1V-1特异性T淋巴细胞应答强度下调。

登革热伴出血与伴出疹患者实验室检查的特征分析

目的分析比较2014年广东省登革热暴发流行期间登革热伴出血与登革热伴出疹患者的实验室检查特征。方法将广州市第八人民医院收治的51例登革热伴出血与151例登革热伴出疹的住院患者纳入研究，采用实时荧光PCR方法检测登革病毒（DENV）核酸，ELISA测定DENV的IgM和IgG抗体，流式细胞术检测CD3^＋／CD4^＋／CD8^＋淋巴细胞亚群；比较两组研究病例的实验室资料，并进行统计学分析。结果登革热伴出血患者的中性粒细胞、AST、血浆凝血酶原时间、活化部分凝血酶时间和尿蛋白阳性率分别为（56．77±19．11）×10^9L、80．00（45．00，109．00）U／L、13．40（12．85，13．95）S、47．50（42．90，53．20）S和44．7％，均高于登革热伴出疹患者，差异有统计学意义（t=2．591，Z=2．495、3．184、2．435，Х^2=9．786，P均〈0．05或〈0．01）；登革热伴出血患者的单核细胞、嗜酸性粒细胞、CD4^＋、CD8^＋、PLT、凝血酶原活动度和血浆纤维蛋白原分别为（9．79±4．96）×10^9L、[0．10（0．00，1．00）]×10^9L、372（220，585）个／μL、258（155，466）个／μL、[53．00（32．00，82．00）1×10^9／L、[93．55（86．57，102．66）]％和2．48（2．04，2．92）g/L，均低于登革热伴出疹患者，差异有统计学意义（t=-2．045，Z=-4．054、-1．962、-2．676、-3．806、-2．876和-2．111，P均〈0．05或〈0．01）。登革病毒IgM抗体阳性166例（83-42％），IgG抗体阳性33例（16．58％）。89例患者DENV核酸分型分析显示，DENV-1感染81例（91．01％），DENV．2感染3例（3．37％），DENV-1和DENV-2混合感染4例（4．49％），DENV-3感染1例（1．12％）。另外，51例登革热伴出血患者中重症登革热9例（17．65％），151例登革热发热伴出疹的患者中重症登革热2例（1．32％），差异有统计学意义（Х^2=16．684，P〈0．01）。结论2014年广东省登革热暴发流行中，大部分登革热患者为初次的DENV-1感染；登革热伴出血患者在凝血功能、肝肾功能及免疫功能等方面明显较登革热伴出疹患者差；在临床上，应警惕发热伴出血患者发展为重症登革热。