应用微卫星DNA基因分型技术进行双生子卵型鉴定

目的 用微卫星 DNA基因扫描和分型技术建立双生子卵型鉴定法。方法 选取 6 9对同性别双生子、6对异性别双生子和 17对同胞对 ,抽提基因组 DNA。单盲设计 ,随机编号后 ,采用 9对荧光标记的、在中国人群中具有高度杂合度的短串联重复序列 (short tandem repeat,STR)引物 ,进行基因扫描和分型分析 ,根据这 9个 STR基因型的一致性来鉴别卵型。结果 9个 STR基因型完全一致的 6 3对受检者全部为同性别双生子。 6对异性别双生子和 17对同胞对的 STR基因型均不完全一致。另有 6对同性别双生子的 STR基因型也不完全一致。经计算采用 6个或 5个 STR位点判定同性别同卵双生的可信性分别大于99.6 %和 99%。采用全部 9个位点判定同性别同卵双生的可信性大于 99.95 %。结论 STR基因扫描和分型技术为在基因组水平上直接判别双生子卵型 ,提供了一种准确、可靠的鉴定方法 ,它还有快速、简便等优点。

人2号染色体一个高血压病易感基因的精细定位

运用荧光标记－半自动基因扫描分型技术，在中国上海人群中对一个高血压病易感基因位点进行精细定位．结果显示：２号染色体从１５７．１６～１６２．４６ｃＭ这一５．３ｃＭ的范围内，出现了一个持续的ＬＯＤ值高峰．该范围内所有ＬＯＤ值均在２．０以上，对应Ｐ值均小于０．００１．最大ＬＯＤ值为２．２４（Ｐ＝ ０．０００６７，１６０．５２ ｃＭ）．单点分析峰值在Ｄ２Ｓ１５１（ＬＯＤ＝１．８６， ＮＰＬ Ｚ＝ ２．６０）．另外，有多个位点存在传递不平衡．最终，将该易感基因定位于３ｑ１４－ｑ２３（Ｄ２Ｓ１５１－Ｄ２Ｓ２３７０），这与Ｓｔｏｌｌ等人用比较基因组法将大鼠数量性状位点（ＱＴＬ）定位于人类基因组所得结果一致．以上结果提示，在中国上海人群中，２号染色体２ｑ１４－ｑ２３这一区域值得进一步研究．

应用毛细管电泳技术进行高效、准确的微卫星位点自动基因组扫描

目的 探索适用于大规模基因组扫描的、真正自动化的微卫星基因分型实验方法。方法 应用多重 PCR将多个微卫星位点同时扩增 ,产物通过 Mega BACE毛细管电泳测序仪进行电泳 ,其结果由Genetic Profiler软件自动分析。观察 PCR效率不同时以及 PCR体系中盐离子对分型结果的影响。结果 通过 1次 PCR和电泳能得到 96个样品 10个位点的分型结果 ,且自动分型的结果精确、可靠。其基因分型的效率是平板电泳的两倍。结论 应用毛细管电泳和 Genetic Profiler自动分析软件进行微卫星基因组扫描效率高 ,节省了人力 ,有效地避免了人为差错 ,适用于基因作图、尤其是多基因疾病的基因定位、法医学及人类进化等研究。