丙泊酚神经发育毒性的机制研究进展

丙泊酚是一种常用的静脉麻醉药,在小儿麻醉中的应用逐渐增多。丙泊酚在发挥麻醉作用的同时可能对婴幼儿生长发育产生影响。丙泊酚的神经发育毒性可能涉及抑制神经干细胞存活与增生、影响突触发育和可塑性、钙超载和线粒体异常分裂等多种机制。因此,深入研究和评估丙泊酚对中枢神经系统发育的影响已成为目前麻醉领域的研究重点。未来,应充分认识丙泊酚的神经毒性作用,采取及时有效的预防和治疗措施,不断提高小儿麻醉安全性。

小胶质细胞与脓毒症脑病的研究进展

脓毒症脑病(SAE)以脑功能障碍为主要特征,是脓毒症患者的常见并发症,严重影响预后和生存质量。近期研究发现,小胶质细胞作为中枢神经系统内的免疫细胞,在脓毒症条件下可发生炎性改变,促进中枢炎症反应和SAE的发展。以小胶质细胞作为靶点可能为治疗SAE提供新的思路和方向。本文简述小胶质细胞的特性及其与SAE的关系,分析小胶质细胞活化对中枢神经系统的影响,探讨调节小胶质细胞的信号通路,并对其未来临床应用进行了展望。

mTOR-自噬通路对脓毒症小鼠海马小胶质细胞表型的影响

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-自噬通路对脓毒症小鼠海马小胶质细胞表型的影响。方法54只雄性ICR小鼠,按照随机数字表法分为3组(n=18):假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)和脓毒症+mTOR抑制剂雷帕霉素组(CLP+Ra组)。Sham组只进行开腹手术操作;CLP组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症小鼠模型;CLP+Ra组于造模前6h腹腔注射雷帕霉素(1.5mg/kg)。于造模后24h各组取6只,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测海马组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-10和转化生长因子(TGF)-β水平;采用免疫荧光染色法检测海马组织切片离子钙接头蛋白分子(Iba)-1/CD86和Iba-1/CD206阳性细胞数量;采用蛋白免疫印迹法测定海马组织mTOR磷酸化(p-mTOR)水平、自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和Beclin-1表达情况。结果与Sham组比较,CLP组TNF-α、IL-1β、IL-10和TGF-β水平升高,Iba-1/CD86和Iba-1/CD206阳性细胞数量增加,p-mTOR水平上调,LC3Ⅱ和Beclin-1表达下调(均P<0.05)。与CLP组比较,CLP+Ra组TNF-α和IL-1β水平降低,IL-10和TGF-β水平升高,Iba-1/CD86阳性细胞数量减少,Iba-1/CD206阳性细胞数量增加,p-mTOR水平下调,LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调(均P<0.05)。结论mTOR-自噬通路通过调节小胶质细胞表型转化,影响脓毒症小鼠海马炎症反应。

p38MAPK信号转导通路在七氟烷后处理减轻乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用

目的评价p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号转导通路在七氟烷后处理减轻乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法健康新生SD大鼠，日龄1～3d，处死后取心室肌组织，培养心肌细胞，随机分为7组：对照组（C组）于CO2培养箱中持续培养3h；缺氧复氧组（AR组）细胞缺氧2h，复氧1h；七氟烷后处理组（SP组）细胞缺氧2h，复氧开始即刻更换为3％七氟烷饱和的DMEM培养液，孵育20min，再更换为无血清DMEM培养液，继续复氧40min；七氟烷后处理＋SB203580组（SP＋SB组）于七氟烷后处理同时加入SB203580（p38MAPK特异性抑制剂）至5μmol／L，孵育20min；七氟烷后处理＋二甲亚砜组（SP＋DMSO组）于七氟烷后处理同时加入0．1％DMSO，孵育20min；SB203580组（SB组）于复氧开始时加入SB203580至5μmol／L，孵育20min；二甲亚砜组（DMSO组）于复氧开始即刻加入0．1％DMSO，孵育20min。各组细胞分别接种于24孔培养板（1ml／孔）、35mm培养皿（5ml／皿）和50ml培养瓶（8ml／瓶）中，每组12孔、6皿和6瓶。于复氧结束后，采用比色法测定细胞培养液乳酸脱氢酶（LDH）活性；采用台盼蓝排斥实验测定细胞存活率；采用流式细胞仪测定细胞凋亡率；采用Western blot法测定磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）表达水平。结果与C组比较，其余各组LDH活性升高，细胞存活率降低，细胞凋亡率升高，AR组、SP组、SP＋SB组、SP＋DMSO组和DMSO组p-p38MAPK表达上调（P〈0．05）；与AR组比较，SP组、SP＋SB组和SP＋DMSO组LDH活性降低，细胞存活率升高，细胞凋亡率降低，p-p38MAPK表达上调（P〈0．05）；与SP组比较，SP＋SB组、SB组和DMSO组LDH活性升高，细胞存活率降低，细胞凋亡率升高，p-p38MAPK表达下调（P〈0．05）。结论七氟烷后处理可通过激活p38MAPK信号转导通路减轻乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤。

氢对LPS致BV-2小胶质细胞炎症反应的影响及自噬在其中的作用

目的评价氢对LPS致BV-2小胶质细胞炎症反应的影响及自噬在其中的作用。方法体外培养BV-2小胶质细胞,接种于6孔板或96孔板,采用随机数字表法分为4组(n=24):对照组(C组)、脂多糖组(LPS组)、富氢液培养基组(H组)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(3-MA组)。C组应用10%胎牛血清MEM培养基培养24 h;LPS组加入LPS终浓度1μg/ml孵育24 h;H组加入LPS终浓度1μg/ml,培养基更换为富氢液培养基终浓度0.6 mmol/L孵育24 h;3-MA组加入3-甲基腺嘌呤终浓度2 mmol/L,其余处理同H组。采用CCK-8法检测细胞存活率;采用ELISA法测定上清液TNF-α、IL-6、IL-10和转化生长因子-β(TGF-β)浓度;采用流式细胞术测定离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)+^细胞、Iba-1^+CD86^+细胞和Iba-1^+CD206^+细胞百分比;采用Western blot法检测微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、LC3Ⅱ、Bcelin-1和p62表达水平,并计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。结果4组细胞存活率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与C组比较,LPS组、H组和3-MA组TNF-α、IL-6、IL-10和TGF-β浓度升高,Iba-1^+细胞、Iba-1^+CD86+细胞和Iba-1^+CD206^+百分比升高,LPS组和3-MA组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin-1表达下调,p62表达上调,H组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin-1表达上调,p62表达下调(P<0.05);与LPS组比较,H组TNF-α和IL-6浓度降低,IL-10和TGF-β浓度升高,Iba-1^+和Iba-1^+CD86+细胞百分比降低,Iba-1^+CD206^+细胞百分比升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin-1表达上调,p62表达下调(P<0.05),3-MA组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与H组比较,3-MA组TNF-α和IL-6浓度升高,IL-10和TGF-β浓度降低,Iba-1^+细胞和Iba-1^+CD86+细胞百分比升高,Iba-1^+CD206^+细胞百分比减少,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值和Beclin-1表达下调,p62表达上调(P<0.05)。结论氢减轻LPS致BV-2小胶质细胞炎症反应的机制与增强自噬,抑制小胶质细胞活化有关。

七氟醚预处理联合后处理对新生大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响

目的评价七氟醚预处理联合后处理对新生大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响。方法健康新生SD大鼠，1～3d龄，处死后取心室肌组织，分离心肌细胞，将心肌细胞于DMEM培养液中培养，细胞密度3×105个／ml，接种于24孔培养板（1ml/孔）、35mm培养皿（5ml／皿）或50ml培养瓶（8ml／瓶），采用随机数字表法，将其随机分为9组（n=24）：正常对照组（C组）常规培养160min；缺氧复氧组（A／R组）、七氟醚预处理组（S1组）、七氟醚预处理＋SB203580组（S1＋SB组）、七氟醚后处理组（S2组）、七氟醚后处理＋SB203580组（S2＋SB组）、七氟醚预处理＋七氟醚后处理组（S3组）、七氟醚预处理＋七氟醚后处理＋SB203580组（S3＋SB组）和SB203580组（SB组）均进行缺氧120min，复氧20min。S1组、S1＋SB组、S3组和S3＋SB组缺氧前用2．5％七氟醚孵育20min，S1＋SB组和S3＋SB组七氟醚预处理同时加入5μmol／Lp38丝裂原激活蛋白激酶（p38MAPK）特异性抑制剂SB203580；S2组、S2＋sB组、s3组和s，＋sB组复氧开始时采用2．5％七氟醚孵育20min，S2＋SB组和S3＋SB组于七氟醚后处理同时加入5μmol／LSB203580；SB组缺氧前20min和复氧开始时均用5μmol／LSB203580孵育20min。复氧结束时测定细胞培养液乳酸脱氢酶活性、细胞存活率和细胞凋亡率，分别于七氟醚预处理结束和后处理结束时测定磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）表达水平。结果与C组比较，其余各组乳酸脱氢酶活性和细胞凋亡率升高，细胞存活率降低（P〈0．05）；与A／R组比较，S1组、S2组和S3组LDH活性和细胞凋亡率降低，细胞存活率升高（P〈0．05）；S1组、S2组和S3组间上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；SB203580可取消七氟醚预处理、后处理及二者联合应用时心肌保护效应（P〈0．05）。七氟醚预处理和后处理均可上调p-p38MAPK表达，且二者联合应用时上调p-p38MAPK表达的效应并未增强，SB203580可取消其上调p—p38MAPK表达的效应（P〈0．05）。结论七氟醚预处理联合后处理减轻新生大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤效应与单独一种措施的效应相似，其机制与二者均通过p38MAPK信号转导通路发挥心肌保护作用有关。

腹腔镜手术治疗卵巢良性肿瘤期间使用右美托咪定麻醉和全身麻醉的进展

通常情况下,生殖器官在一定程度上均是肿瘤的好发部位,而卵巢作为女性的主要生殖器官之一,它的良性肿瘤发病率约占女性总生殖器官良性肿瘤的25.0%~33.3%,且基本上不受年龄限制。右美托咪定(DEX)作为一种常见的处方药,它的作用主要是镇静,适用于全身麻醉的手术患者气管插管和机械通气时的镇静。与既往的麻醉药物相比,它的分布半衰期、消除半衰期及与蛋白质的结合率均更高,这与它属选择性α2-肾上腺素受体激动剂的属性相关[1-2],二室模型是DEX的主要药物动力学变化模型。既往研究数据[3]表明,DEX与分布于不同组织中的α2-肾上腺素受体结合后不仅可使去甲肾上腺素的释放得到抑制,使血浆中的儿茶酚胺浓度降低,而它通过抑制中枢交感神经而发放冲动在一定程度上还可增强迷走神经活性和交感神经张力得以抑制[4]。

高压氧预处理对冠状动脉搭桥术后认知功能及血清miR-146a、miR-572表达水平的影响

目的探讨高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)预处理对冠状动脉搭桥术(coronary artery bypass grafting,CABG)后认知功能障碍(post operative cognitive dysfunction,POCD)及血清miR-146a、miR-572表达水平的影响。方法选取2017年5月至2018年10月天津医科大学第二医院心血管外科拟行择期冠状动脉搭桥术62例患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和HBO组,每组31例。对照组常规围手术期处理,HBO组在手术前给予HBO预处理,术后对2组患者认知功能、生活质量、血清miR-146a和miR-572水平及POCD发生率进行比较。结果CABG术后,对照组Newman量表智力测试、顺向数字复述、逆向数字复述、故事回忆及连线时间5个维度评分均较术前明显下降(P<0.05);对照组生活质量量表的生理机能、精神状况和社会功能3个维度评分均显著低于HBO组(P<0.05);对照组患者血清miR-146a水平明显高于HBO组,血清miR-572水平明显低于HBO组(P<0.05);对照组POCD发生率(38.7%)显著高于HBO组(9.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论HBO预处理可有效维持CABG术后患者血氧浓度,降低血清miR-146a水平,提高miR-572水平,减少POCD的发生,提高患者术后生活质量。

氢减轻小鼠脓毒症相关性脑病的机制:海马小胶质细胞表型转化

目的探讨氢减轻小鼠脓毒症相关性脑病的机制与海马小胶质细胞表型转化的关系。方法成年雄性ICR小鼠88只,6~8周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为4组(n=22):假手术组(Sham组)、假手术+氢气组(Sham+H2组)、脓毒症相关性脑病组(SAE组)和脓毒症相关性脑病+氢气组(SAE+H2组)。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备小鼠脓毒症模型,假手术组仅进行相关的开腹操作。Sham+H2组和SAE+H2组分别于CLP术后1和6 h时吸入含2%氢气的空气1 h。于CLP术后24h处死小鼠,取海马组织标本,采用ELISA法测定海马组织TNF-α、IL-6、转化生长因子-β(TGF-β)和IL-10水平,采用Western blot法检测海马诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)表达水平,于CLP术后4~8 d时行Morris水迷宫实验。结果与Sham组比较,SAE组和SAE+H2组TNF-α、IL-6、TGF-β和IL-10水平升高,iNOS和Arg-1表达上调,逃避潜伏期延长,靶象限活动时间比率和穿越原平台次数减少(P<0.05);与SAE组比较,SAE+H2组TNF-α、IL-6水平和iNOS表达下调,TGF-β、IL-10水平和Arg-1表达上调,逃避潜伏期缩短,靶象限活动时间比率和穿越原平台次数增加(P<0.05)。结论氢可促进海马小胶质细胞表型由M1向M2转化,减轻小鼠脓毒症相关性脑病。