餐厨垃圾微生物发酵生产生物饲料的研究

以含水量60%的餐厨垃圾为原料,研究了对其用微生物(热带假丝酵母Candida tropicalis、啤酒酵母Sac-charomyces cerivisiae、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis)发酵生产生物饲料的工艺条件。确定最佳工艺条件为:餐厨垃圾添加1.5%的尿素,以热带假丝酵母∶啤酒酵母∶枯草芽孢杆菌=1∶1∶1混合菌作为种子液,接种量2%,30℃发酵48h后,50℃烘干。在此条件下所得发酵产物的粗蛋白含量达到28%,比原来增加了4.5%,枯草芽孢杆菌及总酵母菌含量分别在5.2×109 cfu.g-1和8.4×108 cfu.g-1以上,发酵产物有芳香气味,适口性强,具有蛋白饲料和微生态制剂的双重特性。

红曲霉菌株的分离鉴定及产红曲色素发酵条件优化

从市售红曲发酵产品中成功分离得到15株红曲霉纯培养菌株,其中一株肉眼观察高产红色素,通过形态特征观察,确定该红曲霉菌株为红色红曲菌(Monascus ruber),命名为RP-1。对红曲霉RP-1的液体摇瓶发酵工艺进行了初步研究,结果发现:当接种量为15%、培养基初始pH值为6.0时,最有利于红曲色素的合成。

嗜水气单胞菌菌蜕的制备及其对银鲫的口服免疫

菌蜕系统是一个自身具有佐剂性质的新型疫苗体系，不含细胞质内容物但具有细菌的完整表面抗原结构，可诱导机体的体液、细胞免疫应答及增强黏膜免疫反应。本研究通过将带有裂解基因E的质粒pElysis转化至嗜水气单胞菌J-1株中，对AhJ-1（pElysis）进行温度诱导，温度从28℃升至42℃，每隔15min检测菌液的OD600值，测定其溶菌动力学，并做无菌检验，用扫描电镜观察裂解后的细菌形态，研究其作为口服疫苗对银鲫的效果。结果显示，通过温度诱导，嗜水气单胞菌J—1（pElysis）OD值在诱导30min后开始持续下降，75min时开始趋于平稳，到120min溶菌效率达99．99％，诱导16h后进行无菌检验，证实其无活菌。扫描电镜观察绝大部分菌体经诱导后形成菌蜕，细胞两端有溶菌通道。动物试验表明，用菌蜕口服免疫的银鲫，在第5周产生较高的凝集抗体，达到2^7，并能维持2周；而甲醛灭活苗组为2^6，维持时间仅一周；生理盐水对照组效价仅2。攻击试验表明，菌蜕疫苗组和甲醛灭活疫苗组对嗜水气单胞菌强毒株J-1的攻击均有保护作用，其相对保护率分别为16／20（78．95％）和12／20（57．9％），显示菌蜕疫苗比普通灭活疫苗能更有效地激活机体的免疫保护。

提升药学微生物学实验教学效果的实践

通过艺术细菌制作、多媒体实验记录、大创实验、结合生活和社会热点及新药研发的实验等多种方法,提升药学微生物学实验的教学效果。

西红花酸胶囊微生物限度检查方法学验证研究

目的:建立西红花酸胶囊微生物限度检查方法。方法:按2005年版中国药典,用大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌、金葡菌、黑曲霉和白色念珠菌对3批次西红花酸胶囊进行微生物限度检查方法学验证试验。结果:采用常规法,仅有枯草芽胞杆菌试验组平均回收率为59%,其余各菌株试验组回收率均大于70%;采用培养基稀释法,所有验证菌试验组回收率均大于70%;控制菌检查试验组采用常规法,检出了大肠埃希菌。结论:本项研究提供了一个适用于西红花酸胶囊微生物限度检查的方法。

铜绿假单胞菌临床分离株耐药性及质粒分析

对从临床分离的铜绿假单胞菌进行耐药性分析及质粒分析,为临床合理使用抗生素提供依据。对临床收集的56株铜绿假单胞菌,通过K-B纸片扩散法进行耐药性测定;并通过碘淀粉法和酸法测定β-内酰胺酶;提取质粒进行琼脂糖电泳鉴定。临床分离株对头孢西丁、头孢呋辛、呋喃妥因、利福平、万古霉素等的耐药性达到了100%,对卡那霉素、红霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、复方新诺明、头孢噻肟、头孢哌酮、阿奇霉素、头孢曲松、哌拉西林等抗生素耐药性介于62.5%~96.4%之间,环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南耐药性较低介于21.4%~25%之间,铜绿假单胞菌对多黏菌素耐药性最低,仅为1.8%;通过碘淀粉法和酸法,56株中有37株β-内酰胺酶阳性菌株,占总菌株的66%;质粒鉴定结果显示,所有菌株均含有1个大约为20 kb的质粒。铜绿假单胞菌临床分离株具有较广的耐药谱,且多数能产β-内酰胺酶;所有菌株都含1个20 kb的大型质粒,可能与其耐药性相关,提示消除质粒可能降低其耐药性。

黄连对鸡源大肠杆菌质粒消除作用的研究

以煎煮法制备的黄连提取液,在对鸡大肠杆菌多重耐药临床分离株测定最小抑菌浓度的基础上,进行了耐药质粒(R质粒)消除试验,通过影印平板法筛选质粒消除菌株。结果表明,黄连提取液对鸡源多重耐药大肠杆菌耐药性有一定的消除作用,其消除率跟作用时间有一定关系,24 h和48 h的耐药性消除率分别达到4.5%和13.25%。