亚抑制浓度庆大霉素诱导大肠埃希菌发生适应性耐药的研究

目的观察大肠埃希菌经亚抑制浓度的庆大霉素诱导后,其在体外是否发生适应性耐药,并对可能涉及的相关膜蛋白及小分子RNA的表达水平变化进行了研究。方法大肠埃希菌ATCC25922经亚抑制浓度的庆大霉素诱导后,测定其在含不同浓度的庆大霉素的肉汤中的生长曲线,观察其是否发生适应性耐药,并采用平板菌落计数法观察适应性耐药的发生情况,Realtime PCR比较大肠埃希菌诱导前后相关基因omp C、omp F、omp A、omp X、sox S及小RNA mic F的表达水平。结果大肠埃希菌ATCC 25922在第一次接触0.5×MIC的庆大霉素后,再接触0.5×MIC及1×MIC庆大霉素的MH肉汤中,均出现适应性耐药。而在含0.5×MIC的琼脂平板上,庆大霉素对受试菌的抑制率明显较对照菌高,显示大肠埃希菌在琼脂平板上生长也可发生适应性耐药。Real-time PCR结果显示:相对于对照组,受试组的膜蛋白基因omp F表达水平下调,而omp A、omp X及氧化应激反应相关基因sox S的表达水平则明显上调,omp C和mic F的表达没有明显变化。结论本论文证实了大肠埃希菌在亚抑制浓度的庆大霉素诱导后,可发生适应性耐药现象。发生适应性耐药的机制可能与膜蛋白omp F表达下降,omp X及omp A上调有关。

小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌脂磷壁酸释放的作用研究

目的:探讨小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-Resistance Staphylococcus aureus,MRSA)脂磷壁酸(Lipoteichoic acid,LTA)的释放作用。方法:采用微量肉汤稀释法测定小檗碱对临床分离的MRSA的最低抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)。酶联免疫法测定MRSA经小檗碱处理后的LTA含量,设置TritonX-100为阳性对照组,阴性对照组不加药。结果:小檗碱对MRSA分离株的MIC值为32μg·ml-1。随着培养时间的增长,各组细菌释放的LTA含量均有上升。与0.02%的Triton X-100相比,8μg·ml-1的小檗碱在各时间点对金黄色葡萄球菌LTA的促释放作用更强。结论:小檗碱可明显促进MRSA的LTA释放,该作用可能与其改变MRSA对β-内酰胺类抗生素耐药性有关。