超声微泡靶向基质金属蛋白酶抑制剂1下调的腺病毒治疗大鼠肝纤维化效果

目的分析超声微泡联合超声辐照介导基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)下调的腺病毒治疗肝纤维化的效果及机制。方法构建下调TIMP-1基因的重组腺病毒,制备重组腺病毒超声造影剂。建立大鼠肝纤维化模型,分为:模型组、腺病毒组(重组腺病毒)、腺病毒微泡组(重组腺病毒超声造影剂)、实验组(超声辐照+重组腺病毒超声造影剂)、超声腺病毒组(超声辐照+重组腺病毒)。24 h后处死大鼠,制备肝脏切片,观察各组EGFP的表达情况,分析转染率;Masson染色判断肝纤维化分期;运用单因素方差分析对比各组大鼠丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、羟脯氨酸(Hyp)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(CIV)、层粘连蛋白(LN)水平差异。Western blot检测各组大鼠TIMP-1、基质金属蛋白酶13(MMP-13)蛋白的相对表达含量。结果实验组转染率高于腺病毒组(q=3.418)、腺病毒微泡组(q=3.756)、超声腺病毒组(q=5.502),差异有统计学意义(P <0.05);病理检查可见实验组纤维化程度较轻且肝纤维化分级整体较低(P <0.01);对比各组血清学指标检测结果可知实验组大鼠ALT、AST、HA、LN、CIV、Hyp含量活性低于其余4组。Western blot显示,与其他各组相比,实验组大鼠TIMP-1蛋白表达更高,MMP-13蛋白表达更低。结论超声微泡联合超声辐照靶向TIMP-1下调的腺病毒治疗能抑制TIMP-1活性,改善肝纤维化程度,基因治疗具有潜在应用价值。

NLRC5调节转化生长因子-β1诱导的肝星状细胞活化及逆转对肝纤维化的影响

背景肝纤维化是多种慢性肝病的共同病理改变。在肝纤维化过程中,转化生长因子-β1(TGF-β1)高度表达,诱导肝星状细胞(HSC)活化并促进纤维化的进展。NLRC5作为最主要的核苷酸结合寡聚化结构域NOD样受体(NLRs)家族成员,是炎症途径中的重要负性调节因子。有证据表明,NLRC5是肝纤维化及其逆转的关键调节因子,可以通过调节炎症信号和肝纤维化反应参与肝纤维化的发展及逆转。目的探讨NLRC5在TGF-β1诱导的HSC活化及逆转中的作用,并分析其与肝纤维化的关系。方法2018年3—7月选取24只8周龄雄性C57BL/6小鼠(体质量15~20 g),根据随机数字表法分为实验组、正常对照组和逆转组,每组8只。实验组和逆转组建立肝纤维化模型,然后处死小鼠,进行HE、Masson染色和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组化,观察各组肝纤维化程度;检测小鼠肝组织NLRC5及其mRNA、磷酸化抑制蛋白αIκBα(P-IκBα)、IκBα、胞质p65、核p65水平。体外培养LX-2细胞,将培养的细胞分为对照组、TGF-β1组及TGF-β1+MDI组;检测各组LX-2细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原α1(Col1α1)及其mRNA水平,NLRC5及其mRNA水平。siRNA干扰NLRC5后,将激活的LX-2细胞分为NLRC5-siRNA组、Control-siRNA组及正常细胞组,检测NLRC5及其mRNA、α-SMA、Col1α1、P-IκBα、IκBα、胞质p65、核p65。结果HE染色结果显示正常对照组肝细胞索排列整齐,无坏死变性、炎性细胞浸润现象;实验组小鼠肝组织存在点状坏死和再生现象,可见脂肪变性、气球样变性;逆转组可见肝脏恢复红润,结构趋于正常。Masson染色结果显示与正常对照组相比,实验组小鼠镜下可见大量蓝色胶原纤维;而逆转组胶原纤维增生相比实验组有一定程度的改善。实验组小鼠肝组织中α-SMA阳性细胞比例高于正常对照组和逆转组(P<0.05)。实验组小鼠肝组织中NLRC5、NLRC5 mRNA水平高于正常对照组、逆转组(P<0.05)。实验组小鼠肝组织P-IκBα、核p65水平高于正常对照组及逆转组,胞质p65水平低于正常对照组及逆转组(P<0.05)。TGF-β1组LX-2细胞的α-SMA、Col1α1及其mRNA水平均高于对照组、TGF-β1+MDI组(P<0.05)。TGF-β1组LX-2细胞中NLRC5及其mRNA水平高于对照组、TGF-β1+MDI组(P<0.05)。NLRC5-siRNA组NLRC5水平(0.679±0.045)低于Control-siRNA组(1.260±0.071)(P<0.001)。NLRC5-siRNA组α-SMA、Col1α1及其mRNA水平低于ControlsiRNA组,高于正常细胞组(P<0.05)。NLRC5-siRNA组P-IκBα和核p65水平高于正常细胞组和Control-siRNA组,胞质p65水平低于正常细胞组和Control-siRNA组(P<0.05)。结论NLRC5可调节TGF-β1诱导的HSC活化和细胞外基质(ECM)合成,并可以调节和干扰与肝纤维化相关的关键过程,其可能通过核因子(NF)-κB信号通路在调节肝纤维化进展及逆转中起关键作用。

经胆管超声造影在超声引导下经皮肝穿刺胆道引流中的价值

目的探讨经胆管超声造影在经皮肝穿刺胆道引流术(PTCD)中的应用价值。方法回顾性分析2020年1月至2021年7月宁波市第二医院收治的210例胆道梗阻行超声引导下PTCD的患者,根据术中是否行经胆管超声造影分为对照组(101例)和造影组(109例),采用χ^(2)检验比较2组手术成功率、并发症发生率及退黄疗效的差异。结果2组手术成功率均为100%,造影组术后总的并发症发生率为8.3%(9/109),略高于对照组(5.0%,5/101),但2组差异无统计学意义(P>0.05)。退黄疗效方面,造影组退黄无效者3例(2.8%,3/109),对照组退黄无效者15例(14.9%,15/101),造影组退黄疗效优于对照组,差异具有统计学意义(χ^(2)=10.29,P=0.006)。结论PTCD术中应用IB-CEUS可以指导引流策略,获得更好的退黄疗效。

甲状腺微小乳头状癌颈部淋巴结转移的相关危险因素

目的探讨甲状腺微小乳头状癌(PTMC)颈部淋巴结转移及多个转移的相关危险因素。方法回顾性收集2016年1月至2019年12月在中国科学院大学宁波华美医院就诊,并行手术治疗的PTMC患者499例。记录患者性别、年龄等一般资料,PTMC原发灶超声特征、BRAF突变检测结果及手术病理结果等,淋巴结转移数量>5枚定义为淋巴结多个转移。采用单因素及多因素Logistic回归方法分析PTMC患者颈部淋巴结转移及多个转移的危险因素。结果颈部淋巴结转移率为41.9%(209/499),淋巴结多个转移率为7.4%(37/499)。Logistic回归分析显示,年龄<45岁(P=0.010,OR=1.663)、甲状腺球蛋白>7.89 ng/ml(P=0.017,OR=1.597)、结节≥7 mm(P=0.000,OR=2.120)、多发病灶(P=0.001,OR=2.052)、微钙化(P=0.028,OR=1.987)是颈部淋巴结转移的独立危险因素。209例PTMC淋巴结转移患者中,Logistic回归分析显示,结节≥7 mm(P=0.010,OR=3.227)、男性(P=0.039,OR=2.398)、多发病灶(P=0.006,OR=3.115)、被膜侵犯(P=0.032,OR=2.932)是颈部淋巴结多个转移的独立危险因素。结论PTMC患者有多个病灶、病灶直径≥7 mm,提示患者发生颈部淋巴结转移及多个转移的风险较高。术前超声评估为PTMC患者的临床治疗和预后评估提供了一定的参考依据。

超声引导下抽液联合高渗葡萄糖冲洗治疗乳腺癌术后皮下积液的临床价值

目的探讨超声引导下穿刺抽液+50%高渗葡萄糖冲洗对治疗乳腺癌根治术后皮下积液的可行性和临床应用价值。方法回顾性收集2019年1月至2021年3月在中国科学院大学宁波华美医院行单侧乳腺癌根治术或者改良根治术,并术后拔管后出现皮下积液的患者89例。完全随机分为常规抽液组(31例)、超声引导下穿刺抽液组(28例)和超声引导下穿刺抽液+50%高渗葡萄糖冲洗治疗组(30例)。采用单因素方差分析比较3组患者抽吸的总积液量、穿刺次数和治愈时间的差异,并采用SNK检验进行组间两两比较。结果超声引导穿刺抽液+50%高渗葡萄糖冲洗治疗组总积液量为(41.31±12.36)ml,穿刺次数为(2.83±0.79)次,治愈时间为(15.37±2.75)d,均低于常规抽液组[(50.67±12.10)ml,(4.61±1.12)次,(26.39±4.98)d],差异均具有统计学意义(P均<0.05);上述指标也均低于超声引导下抽液组[(44.69±15.72)ml,(3.36±1.25)次,(19.00±2.09)d],其中治愈时间比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论超声引导下穿刺抽液联合50%高渗葡萄糖冲洗治疗乳腺癌术后皮下积液有效,减轻了患者的痛苦,缩短了治疗时间。