黄连素通过改善肠道炎症与黏膜屏障损伤抗肝纤维化的研究

目的探讨黄连素改善四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠肠道黏膜屏障功能损伤与肝纤维化的作用机制。方法选取24只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、黄连素低剂量组(100 mg/kg)和黄连素高剂量组(200 mg/kg),构建CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型。免疫荧光染色观察肝脏与肠道巨噬细胞募集和浸润;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察细胞形态结构;天狼星红染色观察肝脏胶原沉积;生化检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)与内毒素含量;实时荧光定量PCR检测肝脏炎症因子、纤维化因子与肠道紧密连接因子的mRNA水平。使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人结肠腺癌细胞(Caco-2)屏障功能损伤模型,通过测定跨膜电阻(trans-epithelial electrical resistance,TEER)检测细胞通透性变化;实时荧光定量PCR检测Caco-2细胞紧密连接因子与炎症因子mRNA的表达水平。结果动物实验结果显示,与模型组相比黄连素能有效减少肠道巨噬细胞浸润与炎症反应,增加肠道紧密连接因子mRNA的表达水平,改善肠道组织结构及其黏膜屏障功能损伤,减少血清内毒素含量。从而缓解肝脏炎症,减少肝组织损伤与胶原沉积,降低血清ALT含量与肝脏纤维化因子的mRNA表达水平,改善CCl4诱导的小鼠肝损伤与纤维化。细胞实验结果显示,黄连素可有效降低Caco-2细胞炎症因子mRNA表达水平,上调紧密连接因子的表达水平,改善LPS诱导的屏障功能损伤。结论黄连素可通过减少肠道巨噬细胞浸润与炎症反应,保护肠道黏膜屏障功能,抑制细菌内毒素渗漏进入肝脏,从而缓解肝脏炎症,改善CCl4诱导的小鼠肝纤维化。