丁苯酞注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响

目的探讨丁苯酞(NBP)注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3表达的影响。方法清洁级健康SD大鼠60只,按照随机数字表法分成假手术组(Sham组)、IR组以及NBP组各20只,另将NBP组根据NBP的用药剂量分成小剂量组(20 mg/kg)6只、中剂量组(40 mg/kg)7只、大剂量组(80 mg/kg)7只。采用Zea-longa线栓法制作大鼠局灶性IR模型,对比各组大鼠的脑梗死体积及凋亡细胞数,各组大鼠的caspase-3表达以及NBP组大鼠经不同剂量NBP处理后的caspase-3表达。结果 NBP组和IR组脑梗死体积及凋亡细胞数均明显高于Sham组,NBP组明显低于IR组(P<0.05)。NBP组和IR组皮质和海马的caspase-3阳性细胞数均明显多于Sham组,NBP组明显少于IR组(P<0.05)。中剂量及大剂量组皮质和海马的caspase-3阳性细胞数均明显少于小剂量组,大剂量组明显少于中剂量组(P<0.05)。结论NBP对于大鼠局灶性IR损伤具有较好的保护作用,还可有效降低caspase-3的表达,值得临床重视。

丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注后NF-κB与p38MAPK表达的影响

目的探讨丁苯酞(NBP)注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注(I/R)损伤后核转录因子-κB(NF-κB)与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达的影响。方法清洁级健康SD大鼠100只,根据随机分组法分成5组:假手术组(Sham组)、I/R组、NBP小剂量组(20mg·Lkg^(-1))、NBP中剂量组(40mg·Lkg^(-1))和NBP大剂量组(80mg·Lkg^(-1))各20只。采用Zea-longa线栓法制作大鼠局灶性IR模型,使用TTC染色法检测各组大鼠的脑梗死体积,苏木精-伊红染色法检测各组大鼠的脑梗死病理变化,利用Western blotting方法检测各组大鼠的NF-κB与p38MAPK表达以及NBP组大鼠经不同剂量NBP处理后的NF-κB与p38MAPK表达。结果 NBP组和IR组脑梗死体积明显高于Sham组,NBP组明显低于I/R组(P<0.05)。I/R组和Sham组相比,细胞排列紊乱,细胞数目减少,细胞间隙增宽,甚至严重的出现核固缩。I/R组和NBP组比Sham组中的p-NF-κB与p-p38MAPK表达升高(P<0.05)。结论 NBP能够抑制大鼠脑组织中磷酸化NF-B和磷酸化p38MAPK蛋白水平增加,减轻脑I/R损伤。

川蛭通络胶囊通过抑制神经炎症和氧化应激治疗小鼠脑缺血再灌注损伤

川蛭通络胶囊(CZTL)具有活血化瘀、益气通络的功效,用于中风病中经络(脑梗死)恢复期血瘀气虚证,并在临床中得到广泛应用,但其现代药理学作用机制仍不清晰。该研究通过线栓法建立小鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型,探讨CZTL治疗缺血性脑中风的药效和作用机制。小鼠按体质量随机分为假手术组、模型组和CZTL组,CZTL组连续3 d按0.3 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃CZTL,最后1次灌胃1 h后,模型组和CZTL组行MCAO/R手术。再灌注24 h后,检测CZTL对小鼠神经学评分、脑梗死面积、脑水肿及脑组织病理学,同时检测脑组织匀浆活性氧自由基(ROS)、丙二醛(MDA)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性;利用Western blot技术检测脑组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Toll样受体4(TLR 4)以及磷酸化核因子-κB亚基P65(p-NF-κB P65)的表达。结果显示,CZTL显著降低MCAO/R小鼠神经学评分、脑水肿以及脑梗死面积,改善脑组织病理学,抑制脑组织ROS、MDA、IL-6、IL-1β以及TNF-α的分泌,提高SOD的活性,抑制脑组织促凋亡蛋白Bax的表达,促进抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,并同时抑制炎症相关蛋白TLR4的表达和NF-κB P65的磷酸化。以上结果表明,CZTL对MCAO/R小鼠具有显著的保护作用,且这种保护作用与CZTL抑制神经炎症、抵抗脑组织氧化应激密切相关。

基于网络药理学与分子对接技术探讨川蛭通络胶囊干预微循环障碍的机制研究

目的基于网络药理学与分子对接技术探讨川蛭通络胶囊干预微循环障碍的作用机制。方法通过TCMSP数据库及文献检索收集川蛭通络胶囊化学成分信息;在PubChem、SwissTargetPrediction、GeneCards等数据库收集化学成分作用靶点及微循环障碍靶点;利用DAVID数据库对共有靶点进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;使用Cytoscape软件构建相关网络图,筛选主要成分、靶点进行分子对接研究。结果共整理得到川蛭通络胶囊的150个成分及其对应的480个靶点,微循环障碍靶点154个,二者共同靶点32个,富集分析发现共同靶点主要参与血压调节、缺氧应答等生物过程,以及催乳激素信号通路、Janus激酶(Janus kinase,JAK)-信号传导和转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)信号通路、缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)信号通路、脂肪细胞因子信号通路、肾素-血管紧张素系统等信号通路。分子对接结果显示,亚麻油酸乙酯、木犀草素、丹酚酸J等成分能与前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)、血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)、凝血因子2(coagulation factor 2,F2)等靶点良好对接。结论川蛭通络胶囊可能是通过亚麻油酸乙酯、木犀草素、丹酚酸J等关键成分作用于PTGS2、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、STAT3、ACE、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HMOX1)、F2等靶点改善氧化应激、减轻炎性反应,从而干预微循环障碍。