白细胞介素7对非小细胞肺癌患者CD8＋ T细胞抗肿瘤活性的影响

目的观察并分析白细胞介素7（IL－7）对非小细胞肺癌（NSCLC）患者CD8＋ T细胞抗肿瘤活性的影响。方法入组2017年1—7月在郑州市中心医院就诊的27例NSCLC患者（肺癌组）和10例健康对照者（对照组）。分离肺癌组血浆、外周血单个核细胞（PBMCs）和肿瘤部位和非肿瘤部位的支气管肺泡灌洗液（BALF）及对照组血清和PBMCs，检测IL－7水平和IL－7受体CD127 mRNA相对表达量。使用重组IL－7刺激纯化的CD8＋ T细胞和原代NSCLC，观察细胞增殖、分泌细胞因子和IL－7信号通路相关蛋白的表达变化。建立CD8＋ T细胞和原代NSCLC细胞的直接/间接接触共培养系统，观察IL－7刺激对CD8＋ T细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能的变化。结果肺癌组外周血中IL－7水平显著低于对照组[1 731（1 364，2 536）比2 686（1 692，4 786）ng/L，P＝0.023]，肺癌组肿瘤部位分离的BALF中IL－7水平亦显著低于非肿瘤部位[（1 045（562，1 550）比1 599（1 166，2 107）ng/L，P＝0.006 9]。两组间CD127 mRNA相对表达量差异无统计学意义。IL－7刺激原代NSCLC细胞后对细胞增殖及分泌细胞因子无影响，但IL－7刺激可显著增加CD8＋ T细胞的增殖及干扰素γ和肿瘤坏死因子α的分泌，CD8＋ T细胞中信号传导及转录激活因子5的磷酸化和细胞因子信号抑制物3的表达亦明显升高。IL－7刺激还显著提升CD8＋ T细胞对原代NSCLC细胞的杀伤功能和非细胞杀伤功能。结论IL－7可增强NSCLC患者CD8＋ T细胞的抗肿瘤功能。

CD100对非小细胞肺癌患者单核细胞杀伤功能的调控作用

目的分析CD100对非小细胞肺癌(NSCLC)患者单核细胞杀伤功能的影响。方法入组2018年3—9月份在郑州中心医院就诊的35例NSCLC患者(NSCLC组)和13例健康对照者(对照组)。分离肺癌组外周血单个核细胞(PBMC)和肿瘤部位、非肿瘤部位的支气管肺泡灌洗液(BALF)及对照组PBMC,纯化PBMC和BALF中的单核细胞,流式细胞术检测单核细胞中膜结合型CD100(mCD100)和CD72表达。使用重组人CD100、抗CD72、重组人基质金属蛋白酶14(MMP14)或抗CD100抗体刺激NSCLC组肿瘤部位纯化的单核细胞,与NCI-H1882细胞共培养后检测靶细胞死亡比例,培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、颗粒酶A、颗粒酶B表达,单核细胞中CD16表达。组间比较采用t检验或配对t检验。结果外周血CD14^(+)mCD100^(+)细胞比例、CD14^(+)CD72^(+)细胞比例、CD100平均荧光强度(MFI)、CD72 MFI在NSCLC组和对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05),NSCLC组肿瘤部位CD14^(+)mCD100^(+)细胞比例、CD14^(+)CD72^(+)细胞比例、CD100 MFI、CD72 MFI均显著高于非肿瘤部位(P<0.05)。NSCLC组和对照组外周血纯化的单核细胞诱导NCI-H1882细胞死亡比例的差异无统计学意义[(13.95±3.16)%比(13.22±2.40)%,P=0.451],但肿瘤部位纯化的单核细胞诱导NCI-H1882细胞死亡比例低于非肿瘤部位的单核细胞[(11.61±2.81)%比(14.19±3.57)%,P=0.0087],肿瘤部位单核细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、颗粒酶A、颗粒酶B水平均低于非肿瘤部位单核细胞(P<0.05),单核细胞中CD16水平在两组间的差异无统计学意义(P=0.666)。重组人CD100刺激肿瘤部位纯化的单核细胞后,其诱导NCI-H1882细胞死亡的比例高于无刺激细胞(P<0.0001),TNF-α、IL-1β、颗粒酶A、颗粒酶B水平亦高于无刺激细胞(P<0.05),而抗CD72预处理的单核细胞再使用重组人CD100刺激,其诱导NCI-H1882细胞死亡比例和TNF-α、IL-1β、颗粒酶A、颗粒酶B水平均低于重组人CD100刺激的单核细胞(P<0.05)。重组人MMP14刺激肿瘤部位纯化的单核细胞后,CD14^(+)mCD100^(^(+))比例降低,可溶型CD100(sCD100)水平升高,其诱导NCI-H1882细胞死亡的比例和TNF-α、IL-1β、颗粒酶A、颗粒酶B水平高于无刺激单核细胞(P<0.05)。加入抗CD100后,sCD100水平低于MMP14刺激的单核细胞,其诱导NCI-H1882细胞死亡的比例和TNF-α、IL-1β、颗粒酶A、颗粒酶B水平低于MMP14刺激的单核细胞(P<0.05)。结论NSCLC患者肿瘤部位浸润单核细胞CD100脱落不全,导致单核细胞杀伤功能下降,MMP14可能通过促进mCD100脱落和sCD100生成提高肿瘤部位浸润单核细胞的杀伤功能。