固定化胰蛋白酶活力的测定方法探讨

对自制的固定化胰蛋白酶(Immobilization Trypsin,ITP)分别经过冷冻干燥、真空干燥后定量测定其酶活力,与由湿态直接定量法(DQA)测定的活力进行比较。试验表明,直接定量方法测定的酶活力比前两者高,而且操作简单。

不同载体固定化胰蛋白酶酶学特性的研究

目的:研究以壳聚糖、复合硅胶、阴离子交换树脂为载体固定化胰蛋白酶的酶学特性。方法:通过测定不同载体固定化胰蛋白酶的活力得其最适反应温度值、最适反应pH值和米氏常数(Km)值。结果:以壳聚糖、复合硅胶、阴离子交换树脂为载体制备固定化胰蛋白酶的最适反应温度分别为70℃、60℃、60℃;最适反应pH值分别为7.5、8.0、8.0;表观米氏常数K’m分别为22.72mg/ml、25.12mg/ml、29.04mg/ml。结论:与游离酶相比,固定化胰蛋白酶均表现出一定的热稳定性、酸碱稳定性,利于工业化生产。

不同载体固定化胰蛋白酶的条件研究

试验分别选用壳聚糖、复合硅胶、阴离子交换树脂为载体制备固定化胰蛋白酶,通过正交试验优化确定不同载体的酶固定条件。研究表明,三种载体固定胰蛋白酶时的酶活回收率依次为81.9%、80.1%、44.8%。