浙江磐安地区啮齿动物嗜吞噬细胞无形体感染研究

目的调查浙江省磐安地区啮齿动物无形体属嗜吞噬细胞无形体的自然感染状况,了解其分子生物学特性。方法在浙江省磐安地区低山田地里捕获多种啮齿动物230只(黄胸鼠、社鼠、褐家鼠、小林姬鼠、黄毛鼠、青毛鼠、大林姬鼠、白腹巨鼠、针毛鼠、黑线姬鼠和松鼠);解剖取肝脾;提取DNA,用巢式PCR扩增无形体属16SrRNA片段;PCR产物测序,并进行Blast同源性比较,最后采用MEGA4.0软件与GenBank登录的其它无形体属种株进行系统发生分析。结果 230只啮齿动物中,1只黄胸鼠、1只褐家鼠和2只白腹巨鼠肝脾标本检出无形体属16SrRNA片段,磐安地区野鼠无形体属立克次体的自然感染率为1.7%。3份阳性标本PCR产物测序,序列比对分析表明,从褐家鼠同时检出分别与嗜吞噬细胞无形体和浙江无形体株ZJ05/2009完全一致的序列,黄胸鼠和1只白腹巨鼠的序列与浙江无形体株ZJ05/2009完全一致。结论浙江省磐安地区野鼠检出致病性无形体属核酸,存在无形体属不同种株的复合感染感染。提示可能存在无形体病自然疫源地,需要进一步密切关注致病性无形体的人群感染情况。

2005-2010年浙江省磐安县病媒生物监测结果分析

目的掌握浙江省磐安县主要病媒生物种群密度及其消长规律,为控制病媒生物的危害提供科学依据。方法采用诱蚊灯法监测蚊密度,笼诱法监测蝇密度,粘捕法监测蜚蠊密度,夹夜法监测鼠密度。结果 2005-2010年磐安县蚊类平均密度为2.04只(/灯·h),以淡色/致倦库蚊为优势蚊种,占捕获总数的71.81%;蝇密度指数为1.83只/笼,优势种为家蝇和大头金蝇,分别占捕获总数的52.62%和37.81%;蜚蠊密度为0.91只/张,优势种为德国小蠊,占捕获总数的92.10%;鼠密度为0.89%,优势种为针毛鼠,占捕获总数的37.60%。蚊和蝇5月开始活动,蚊类于7月达到高峰,蝇类6-8月达到高峰;蜚蠊和鼠全年均有活动,3-10月蜚蠊密度较高,鼠密度高峰一般出现在9月。结论基本掌握了磐安县病媒生物的种群构成和季节消长规律。

2007-2009年浙江省磐安县钩端螺旋体病宿主动物监测分析

目的了解浙江省磐安县野鼠、牛、猪、鸭和青蛙钩端螺旋体带菌情况。方法对野鼠鼠肾、牛中段尿、猪肾、鸭肾和青蛙肾等进行钩端螺旋体菌株的分离培养。结果 2007-2009年磐安县共分离培养到钩端螺旋体菌8株,经鉴定均为黄疸出血群。野鼠分离培养到7株,带菌率为2.13%;青蛙分离到1株,带菌率为0.33%;牛中段尿、猪肾和鸭肾未分离出钩端螺旋体菌。不同鼠种的带菌率社鼠8.33%、黄胸鼠3.03%。结论野鼠为磐安县钩端螺旋体病的主要传染源,黄疸出血群为主要的感染菌群。

伯氏疏螺旋体5S～23S rRNA和ospA基因在浙江省鼠标本检测中的应用

目的探索5S^23S rRNA和ospA基因序列在伯氏疏螺旋体检测中的应用,了解浙江省鼠中感染伯氏疏螺旋体状况。方法用PCR方法,检测磐安县100只鼠标本中5S^23S rRNA和ospA基因特异片段。对检测到的阳性结果进行测序。结果检测100只鼠标本,其中3只鼠标本伯氏疏螺旋体的5S^23S rRNA基因片段为阳性,5只鼠标本伯氏疏螺旋体的ospA基因片段为阳性,与参考核酸序列基本一致。结论利用ospA和5S^23S rRNA基因能从标本中检测到伯氏疏螺旋体。

浙江中部地区鼠类中检出莱姆病螺旋体感染

目的:了解浙江省中部地区鼠类中莱姆病的感染情况。方法:采用巢式PCR对采集的野鼠肝脾标本进行莱姆病伯氏疏螺旋体5s-23s核糖体DNA间隔区片段分析。结果:从101份标本中检出阳性结果10份,分别来自社鼠、黄胸鼠、针毛鼠、褐家鼠和黑线姬鼠,并以社鼠中的检出率最高。除一个序列可能为新的基因型外,其余均与伯氏疏螺旋体法雷氏基因型高度相似。结论:在浙江中部地区检出莱姆病疏螺旋体感染尚属首次。综合历年的调查结果,社鼠可能是莱姆病的重要宿主,伯氏疏螺旋体法雷氏基因型在浙江占优势,并可能存在其他基因型。今后应继续加强野生动物中莱姆病病原体的监测,密切关注莱姆病人群发病状况。

浙江省鼠中巴尔通体rpoB基因系统进化分析

目的初步了解巴尔通体在浙江省鼠群中携带状况及流行特征,为制定预防措施提供依据。方法 2009年8月于浙江省磐安县捕鼠101只,提取其肝、脾DNA后,选择巴尔通体属rpoB基因进行PCR扩增,并对所得产物进行测序及进一步的系统进化分析。结果 2009年在磐安县捕获的101只鼠中肝脾标本检出巴尔通体rpoB基因阳性1例,其中黄胸鼠中巴尔通体分离率为4.3%;此分离株与格雷汉巴尔通体(GenBank序列号:AB426694.1)处于同一进化分支上(自展值为96%)。结论在浙江省鼠群中存在巴尔通体感染,分离株种属为格雷汉巴尔通体。

InvA-PCR应用于磐安县钩端螺旋体病检测的研究

目的:针对InvA-PCR方法检测钩端螺旋体病的研究。方法:根据侵袭蛋白A基因(InvA)与卫生行业标准推荐的引物G1/G2对比,进行特异性与灵敏度研究,并应用于磐安鼠标本钩端螺旋体PCR检测。对磐安县2009分离菌株进行钩端螺旋体InvA-PCR和LS-PCR鉴定。结果:InvA-PCR具有较高的灵敏度和特异性,该引物可特异性扩增致病性钩端螺旋体DNA,对本实验所用的其他细菌不扩增。2009年分离的钩端螺旋体菌株进行PCR鉴定结果与血清学鉴定结果相符。对鼠标本进行InvA-PCR检测,InvA-PCR检测阳性率为5%。与卫生行业标准推荐的引物G1/G2对比,符合率为100%。结论:InvA-PCR检测方法可灵敏、特异地检测致病性钩端螺旋体,能正确有效地反应野生动物带毒率,为控制钩端螺旋体病提供依据。

浙江大盘山脉鼠类中巴贝西原虫的分子流行病学调查

本文旨在了解浙江省大盘山脉鼠类感染巴贝西原虫的流行病学情况。捕获大盘山脉磐安县区域的鼠类共231份,取肝脾标本进行PCR检测。所检测到的PCR阳性结果进行序列测定,并进行分析。从231份鼠肝脾标本中检测发现3例DNA阳性片段,来自针毛鼠和社鼠。核酸序列分析显示与巴贝西原虫DNA片段高度相似。利用PCR方法检测到巴贝西原虫DNA,提示浙江大盘山脉存在鼠类感染巴贝西原虫的状况。