肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶和CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的检测及其耐药性

目的了解浙江省金华市中心医院临床分离肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶和CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率及其耐药性。方法采用纸片扩散法(K-B)检测肺炎克雷伯菌对18种常用抗菌药物的敏感性。按美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的ESBLs表型确证试验检测;聚合酶链反应(PCR)检测菌株中的质粒AmpC酶基因和CTX-M型ESBLs基因。并对阳性扩增产物进行测序明确其基因亚型;接合试验了解质粒AmpC酶基因和ESBLs基因的可转移性;肠杆菌科细菌基因间重复一致序列(ERIC-PCR)分析菌株的同源性。结果 101株肺炎克雷伯菌中35.6%(36/101)的菌株ESBLs表型确证试验阳性,其中77.8%(28/36)的菌株含CTX-M型ESBL基因,以CTX-M-15和CTX-M-14基因型为主。11.9%(12/101)的菌株产质粒AmpC酶基因,DNA测序证实为DHA-1型质粒AmpC酶。5.9%(6/101)的菌株同时产质粒AmpC酶和ESBLs。结论我院存在同时产质粒AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌的流行,质粒AmpC基因型别主要为DHA-1型,ESBLs基因型别主要为CTX-M-14或CTX-M-15型。耐药基因可通过接合的方式从供体菌转移至敏感细菌,临床上应加强对此类菌株的监测。

GEN-S血细胞分析仪异常细胞报警的可信性分析

目的 探讨COULTERGEN S血细胞分析仪异常细胞报警的可信性。方法 将 5 77例GEN S血细胞分析仪报警幼稚细胞 (Blasts)、未成熟粒细胞 (Imm .NE)、异型淋巴细胞 (VariantLY)或有核红细胞 (NRBC)的标本作血涂片 ,经瑞特 姬姆萨混合染色后镜检找异常细胞 ,无异常报警的 2 0 0例标本为对照组 ,分析仪器对异常细胞报警的可信性。结果 有Blasts和Imm .NE报警的真阳性率分别达 6 8.8%和 34.9% ,假阴性率为 0 ;有VariantLY和NRBC报警的真阳性率分别为 10 .5 %和 2 2 % ,假阴性率分别为 3.0 %和 1.5 %。结论 仪器对异型淋巴细胞和有核红细胞的报警并不理想 ,而对幼稚细胞和未成熟粒细胞的报警有较高的可信性。因此 。

表皮葡萄球菌在慢性鼻-鼻窦炎患者中生物膜的表达

目的研究表皮葡萄球菌生物膜在慢性鼻-鼻窦炎(CRS)患者鼻黏膜中的表达情况。方法将临床手术中获取的180例慢性鼻-鼻窦炎患者内镜手术黏膜样本,根据细菌培养结果将其分为4组,分别为表皮葡萄球菌生长组79例,其他葡萄球菌生长组33例,阴性杆菌生长组27例,细菌培养阴性组41例,所有样本均行标准的扫描电子显微镜方法检测。结果表皮葡萄球菌生长组79例全部观察到生物膜的存在,表达率为100%(79/79),其他葡萄球菌生长组为75.8%(25/33),阴性杆菌生长组为77.8%(21/27),细菌培养阴性组为41.5%(17/41)。后3组分别与表皮葡萄球菌组比较,P值均<0.01。结论表皮葡萄球菌在CRS患者生物膜形成中起重要作用。

金华市中心医院2009年细菌耐药性监测

目的了解金华市中心医院2009年临床分离菌对各类抗菌药物的耐药性。方法纸片扩散法(Kirby-Bauer法)检测临床分离菌对各类抗菌药物的敏感性,判断标准参照2007年版CLSI文件。结果临床分离2224株细菌中,革兰阴性菌占75.7%,革兰阳性菌占24.3%。甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)和凝固酶阴性的葡萄球菌(MRCNS)分别占51.2%(74/143)和91.5%(193/211),其中仍有74.3%的MRSA对磺胺甲噁唑敏感,88.4%的MRCNS对利福平敏感。肠球菌属中屎肠球菌的检出率52.1%(49/94),首次高于粪肠球菌的检出率25.5%(24/94)。屎肠球菌对多数测试药的耐药率高于粪肠球菌,但对氯霉素的耐药率相反。大肠埃希菌和克雷伯菌中ESBLs检出率分别为53.8%(252/468)和43.1%(187/434)。不动杆菌属对头孢哌酮/舒巴坦较敏感(耐药率12%),对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为52.4%、60.2%;铜绿假单胞菌对两者的耐药率分别为9.6%、9%。米诺环素对嗜麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌有良好的抗菌活性,敏感率均高于95%。出现7株泛耐药的铜绿假单胞菌和5株泛耐药的鲍曼不动杆菌。结论我院细菌的耐药现状比较严峻,未发现对万古霉素耐药的粪及屎肠球菌。但对泛耐药的不发酵糖革兰阴性杆菌的增多,应引起重视,并及早采取防控措施。

652例患者尿路感染病原菌及其耐药性分析

目的了解泌尿系统感染病原菌的分布及对常用抗菌药物的耐药情况,为临床治疗尿路感染提供依据。方法对金华市中心医院2006年1月至2008年8月住院及门诊患者尿培养分离的细菌(删除重复菌株)进行菌株鉴定和药敏分析。结果共分离到细菌652株,其中革兰阴性菌405株(62.1%),革兰阳性菌163株(25.0%),真菌84株(12.9%)。产β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别达47.4%和46.4%。屎、粪肠球菌对高浓度庆大霉素耐药率分别达83.3%和60.0%,对高浓度链霉素耐药率分别达56.7%和36.7%;耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)达77.8%,呈现对抗菌药物的多重耐药。结论金华市中心医院中段尿培养检出病原菌种类复杂,以革兰阴性细菌居多,细菌耐药率高,临床医生应根据中段尿培养和药物敏感结果合理使用抗菌药物。

我院脑膜败血伊丽莎白菌的临床分布、产酶情况及耐药性分析

目的:探讨我院脑膜败血伊丽莎白菌的临床分布、产酶情况及耐药特征,为临床治疗和预防感染提供参考。方法:回顾性分析我院2011-2015年脑膜败血伊丽莎白菌致医院感染患者的临床资料,采用全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定,采用纸片扩散(K-B)法进行药敏试验,采用K-B法、双纸片增效法、改良三维试验法进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC)、金属β-内酰胺酶(MBL)的表型确证。结果:共检出脑膜败血伊丽莎白菌76株,主要来源于痰液标本(75.0%),其患者主要来自于重症医学科(57.9%);76株脑膜败血伊丽莎白菌对亚胺培南、美罗培南、多黏菌素B、妥布霉素、庆大霉素、阿米卡星、头孢吡肟等7种抗菌药物的耐药率为100%,对利福平、复方磺胺甲噁唑等及3种含酶抑制剂的耐药率均<30%,对万古霉素、米诺环素的耐药率为0;58株细菌产ESBLs(76.3%),47株细菌产MBL(61.8%),未检出细菌产AmpC。结论:脑膜败血伊丽莎白菌可导致免疫力低下患者发生医院感染;该菌具有较高的耐药水平,可能与ESBLs、MBL高检出率有关;万古霉素与米诺环素是治疗该菌感染的首选药物。

基于数字化管理的临床微生物实验室信息管理平台再造

通过对临床微生物实验室信息管理平台的数字化再造,实现了临床微生物实验室业务流程全过程数字化和信息的有效管理,并加强了实验室在实验室质量管理、细菌耐药分析管理和医院感染管理中的数据挖掘能力。

临床微生物实验室菌株管理系统的开发应用

介绍了一种实验室自主开发并成功应用在实际工作中的临床微生物实验室菌株管理系统。该系统包括系统登陆模块、用户管理模块、菌株信息字段管理模块、基础数据表管理模块、信息录入模块、菌株检索及复苏使用模块、菌株复苏使用记录查询模块。应用这一管理系统对临床菌株进行管理,可以有效提高菌株管理工作的规范性和工作效率,同时,可通过追踪临床菌株的使用情况为公共卫生安全提供有力保障。

系统性红斑狼疮伴发感染菌群及耐药性分析

目的了解系统性红斑狼疮（SLE）住院患者的感染菌群及耐药情况，指导临床诊断、治疗。方法对2008年10月～2013年10月在金华市中心医院住院的SLE患者发生感染的菌株、耐药情况进行分析。结果432例患者中158例发生感染，感染发生率为36．6％；共培养到84株细菌，分布部位依次为呼吸道（40．5％）、泌尿生殖道（28．4％）、胃肠道（13．3％）；菌株构成比中以革兰阴性菌多见（41．7％），较常见的细菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及表皮葡萄球菌，还有6例结核菌感染，2例死亡病例均合并有深部真菌感染。细菌药敏试验结果显示耐药菌株比例较高。结论对SLE患者应及早使用有效抗生素，须重视对真菌的预防，同时不要忽视结核病。

1486例女性泌尿生殖道支原体感染及药敏分析

目的了解浙江省金华市女性泌尿生殖道支原体感染情况并对常用抗菌药物进行药敏分析。方法对1486例疑似泌尿生殖道感染的女性患者做支原体检查并进行解脲支原体（Uu）、人型支原体（Mh）的培养鉴定及9种药物的药敏试验。结果 1486例中共有858例支原体培养阳性,阳性率为57.7%,其中单纯Uu感染680例,单纯Mh感染24例,Uu＋Mh双重感染154例。在9种常用抗菌药物中,美满霉素和强力霉素的敏感率均在90%以上。结论女性支原体感染以Uu感染为主,年龄主要集中在21~40岁。美满霉素和强力霉素可作为治疗支原体感染的首选药物,氧氟沙星、左旋氧氟沙星和罗红霉素已不适合作为经验用药的选择。

六年血培养真菌分布和耐药性变迁

近年来．院内真菌菌血症的发生率日益增高，尤其在ICU病房。真菌菌血症临床表现不典型、早期诊断困难、病死率高，及早识别高危患者并实施早期经验性治疗有望改善预后，但易导致深部真菌菌株的改变及耐药性增加圆。本次研究回顾性分析2003～2005年、2006～2008年两个时间段血培养中检出的53株真菌分布和耐药性变迁。现将结果报告如下。

检验科信息系统建设对患者满意度的影响

目的探讨检验科信息系统建设对门诊患者满意度的影响。方法完善和优化检验科信息系统建设,系统投入使用后随机抽取门诊患者填写满意度调查问卷,采用Likert五级评定法计分,运用SPSS17.0软件对所获数据进行统计学描述及相关性检验。结果检验方便性满意度与检验科信息系统建设前中后三个季度具有显著相关性,三个季度分别为(3.7±0.6)分,(4.3±0.8)分,(4.3±0.8)分。信息系统建设中期整体满意度均值最低,仅为(3.5±0.5)分。结论我院通过检验科信息系统的建设,显著缩短了门诊病人就诊的时间,给病人复诊与疾病治疗带来了极大的方便,提高了门诊患者的满意度。

三种不同检测方法在女性淋病患者中的应用价值

目的探讨三种不同的淋球菌检测方法在女性泌尿生殖道淋球菌感染检测中的应用价值。方法对本院妇科门诊女性疑似淋病患者153例的标本采用直接涂片法,用分离培养法,实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)进行淋球菌检测,对结果进行分析。结果以培养法为金标准,直接涂片法的检测灵敏度为63.0%(46/73),特异度为97.5%(78/80);SAT检测灵敏度为95.9%(70/73),特异度为88.8%(71/80)。结论疑似女性淋病患者淋球菌检测中直接涂片法具有简便、快捷、直观的特点,但灵敏度低。培养法耗时较长,不利于急诊病人的快速诊断,且对取样,运送要求较高,但可同时检测药敏结果。SAT法灵敏度及特异度高,能有效提高检出率,对女性疑似病例具有很好的补充作用,为实验室检测淋球菌提供了新方法。

慢性鼻-鼻窦炎患者细菌生物膜形成与细菌培养的相关性研究

目的探讨细菌生物膜在慢性鼻-鼻窦炎患者鼻黏膜中的表达与细菌培养的相关性。方法实验组获取90例慢性鼻-鼻窦炎患者手术黏膜样本,对照组获取5例鼻中隔偏曲患者及10例健康志愿者钩突黏膜样本,所有样本均行细菌培养及扫描电子显微镜检查。分析细菌生物膜表达与细菌培养的相关性。结果 90例实验组患者中,64例观察到细菌生物膜的存在(阳性率71.1%)并且其中有60例细菌培养阳性,检出率最高的细菌是表皮葡萄球菌占41.7%(25/60)。另26例实验组患者及15例对照组患者均未观察到细菌生物膜,也未培养出需氧或厌氧菌。细菌培养与细菌生物膜间的Pearson相关系数为0.901(P=0.000)。结论慢性鼻-鼻窦炎患者鼻黏膜中细菌生物膜表达与细菌培养阳性结果呈高度相关。

85例慢性鼻窦炎患者鼻粘膜病原学及耐药特点研究

目的:了解慢性鼻窦炎相关病原学状况及病原耐药特点。方法:筛选临床确诊的慢性鼻窦炎病例85例,预处理后,内镜下无菌操作采集病变鼻粘膜及分泌物同时进行需氧菌、厌氧菌、苛养菌、真菌培养,并检测其特定的耐药机制和表型。结果:85例患者标本共分离相关病原菌34株,其中葡萄球菌以凝固酶阴性葡萄球菌最多(10株),且MRS占83.3%;革兰阴性杆菌13株,其中6株为大肠埃希菌,且4株产ESBLs。另检出厌氧菌3株,嗜血杆菌2株,未发现致病奈瑟菌和真菌。

7506例血培养病原菌分布和耐药性分析

目的了解我院2003-2008年血培养中阳性标本的病原菌分布和耐药性。方法用WHONET5.3软件对6年血培养结果进行回顾性统计分析。结果6年共检出革兰阴性菌441例,革兰阳性菌300例,真菌53例,厌氧菌3例,复数菌7例;各占总数的54.85%、37.31%、6.59%、0.37%和0.87%。革兰阴性菌敏感性较好的药物为亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦;革兰阳性菌敏感性较好的药物为万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺。结论应加强疑似败血症患者血液中病原菌的检测。并根据药效结果及时调整用药。

医院感染肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药性分析

目的了解医院感染肺炎克雷伯菌的临床分布及对常用抗菌药物的耐药性,为临床预防肺炎克雷伯菌相关医院感染及合理选用抗菌药物提供依据。方法收集2012年1月~2014年12月医院感染患者临床标本中分离到的肺炎克雷伯菌,利用西门子WalkAway96全自动微生物分析仪进行菌种鉴定和药敏试验,采用CLSI推荐的ESBLs表型确证试验、三维试验、Hodge试验分别对ESBLs酶、AmpC酶和KPC型碳青霉烯酶进行检测,数据分析采用WHONET5.6和MDR1.0。结果 1014株肺炎克雷伯菌主要分布在重症监护病房（19.92%）和新生儿病房（11.34%）,主要来源于呼吸道标本（52.27%）和尿液标本（17.16%）。肺炎克雷伯菌对不同抗菌药物呈不同程度的耐药性,其中对亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星的耐药率最低（均低于7.4%）,对哌拉西林的耐药率最高（81.76%）。1014株肺炎克雷伯菌中,35.11%为产ESBLs菌株,15.98%为产AmpC酶菌株,5.03%为产KPC酶菌株,50.98%为多重耐药菌株。结论医院感染肺炎克雷伯菌的耐药性日趋严重,监测肺炎克雷伯菌的耐药趋势及产酶情况对指导临床用药有重要意义。

医院感染肠球菌的临床分布及耐药性分析

目的探讨肠球菌属细菌临床分离情况及耐药性特征,为临床合理使用抗菌药物及控制感染提供依据。方法回顾性分析1220株引起医院感染的肠球菌属细菌。采用Walk Away 96全自动微生物分析仪做菌株鉴定和药敏试验,采用MIC法筛检高水平氨基糖苷类耐药菌株,采用WHONET 5.6进行数据分析。结果共检出1220株肠球菌,其中粪肠球菌675株,占55.3%,屎肠球菌445株,占36.5%,肠球菌属细菌在各临床标本中的分布以尿液为主,占57.5%。屎肠球菌总体耐药率较高,其中对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率均超过90%,明显高于粪肠球菌对这4种抗菌药物的耐药率(<17%)。粪肠球菌对奎奴普丁/达福普汀的耐药率为100.0%,而屎肠球菌的耐药率为12.6%。两种细菌均未发现对万古霉素耐药菌株,但发现3株耐利奈唑胺的粪肠球菌。粪肠球菌对高水平庆大霉素耐药菌株和高水平链霉素耐药菌株的筛检率分别为54.1%和27.3%,而屎肠球菌的筛检率分别为58.2%和56.9%。结论肠球菌属细菌对常用抗菌药物的耐药情况不容乐观,监测肠球菌属的临床分布及耐药状况对临床治疗肠球菌属细菌感染具有重要的指导意义。

连续10年的鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药谱变迁

目的调查2005年1月~2014年12月鲍曼不动杆菌耐药谱变迁和来源分布,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法收集我院2005年1月~2014年12月临床标本中分离到的鲍曼不动杆菌,利用法国梅里埃公司的ATB自动鉴定仪和西门子Walk Away96全自动微生物分析仪进行菌种鉴定和药敏试验,数据分析采用WHONET5.6和MDR1.0。结果 10年中共分离到鲍曼不动杆菌1175株,分离菌株数和分离率呈不断增加趋势,鲍曼不动杆菌主要来源于呼吸道标本占80.0%,对17种抗菌药物的耐药率呈逐年上升趋势,上升最明显的是哌拉西林,从11.8%上升到82.6%,其次是碳青霉烯类抗菌药物,从0%上升至〉45%。多重耐药菌株和泛耐药菌株的检出也呈上升趋势,MDR-AB和XDR-AB分别从5.9%和0开始逐年升高,最高达65.6%和45.5%。结论连续监测鲍曼不动杆菌的来源分布和耐药变迁,对临床感染控制和治疗具有重要的意义。