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聚-γ-谷氨酸合成酶复合体A的原核表达及其多克隆抗体的制备
1
作者
刘建奎
应明杰
+3 位作者
魏春华
余丽芸
何晓
杰
孙留霞
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009年第1期5-8,共4页
以pgsBCA质粒为模板对已知的pgsA进行PCR扩增,得到长度为1 116 bp的片段。将获得的PgsA基因连接到pQE-30表达载体,转化大肠埃希菌后用IPTG诱导其表达,经SDS-PAGE和Westernblot分析,均可见约42 ku目的蛋白带。通过Ni-NTA agarose纯化,获...
以pgsBCA质粒为模板对已知的pgsA进行PCR扩增,得到长度为1 116 bp的片段。将获得的PgsA基因连接到pQE-30表达载体,转化大肠埃希菌后用IPTG诱导其表达,经SDS-PAGE和Westernblot分析,均可见约42 ku目的蛋白带。通过Ni-NTA agarose纯化,获得较高纯度的重组蛋白,经基因定量仪测定其浓度可达1.5 mg/mL;以其免疫新西兰兔获得免疫血清,Western blot分析证实,该重组蛋白具有良好的反应原性,用间接ELISA检测抗体效价可高达1∶12 800。结果表明,成功获得了pgsA的多克隆抗体。
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关键词
聚-γ-谷氨酸合成酶复合体
多克隆抗体
间接ELISA
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题名
聚-γ-谷氨酸合成酶复合体A的原核表达及其多克隆抗体的制备
1
作者
刘建奎
应明杰
魏春华
余丽芸
何晓
杰
孙留霞
机构
黑龙江八一农垦大学动物科技学院
黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009年第1期5-8,共4页
基金
大学生创新工程项目
研究生创新课题
文摘
以pgsBCA质粒为模板对已知的pgsA进行PCR扩增,得到长度为1 116 bp的片段。将获得的PgsA基因连接到pQE-30表达载体,转化大肠埃希菌后用IPTG诱导其表达,经SDS-PAGE和Westernblot分析,均可见约42 ku目的蛋白带。通过Ni-NTA agarose纯化,获得较高纯度的重组蛋白,经基因定量仪测定其浓度可达1.5 mg/mL;以其免疫新西兰兔获得免疫血清,Western blot分析证实,该重组蛋白具有良好的反应原性,用间接ELISA检测抗体效价可高达1∶12 800。结果表明,成功获得了pgsA的多克隆抗体。
关键词
聚-γ-谷氨酸合成酶复合体
多克隆抗体
间接ELISA
Keywords
PgsA
polyclonal antibody
indirect ELISA
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
Q559 [生物学—生物化学]
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作者
出处
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1
聚-γ-谷氨酸合成酶复合体A的原核表达及其多克隆抗体的制备
刘建奎
应明杰
魏春华
余丽芸
何晓
杰
孙留霞
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2009
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