紫外分光光度法研究β-环糊精对共轭亚油酸的包合作用

目的研究β-环糊精(β-CD)对共轭亚油酸(CLA)的包合作用。方法利用紫外分光光度法测定CLA和β-CD的结合比、包合常数和其他热力学常数。结果 CLA和β-CD的包合比为1∶1,包合物的吸光度随β-CD浓度的增加而增加,包合形成常数K值随温度的升高而增大,ΔH和ΔS均大于0。结论 CLA与β-CD结合力较强,升温有利于包合反应的进行。β-CD与CLA形成包合物的驱动力是多种作用力共同作用的结果,其中最主要的作用力为疏水作用。

CYP450酶内源性生物标志物的研究进展

CYP450酶广泛参与药物的I相代谢过程,CYP450酶活性受到基因、性别、年龄、疾病等多种因素的影响,CYP450酶活性直接影响经CYP450酶代谢药物的体内代谢过程。测定CYP450酶活性有助于了解药物在体内的代谢情况,预测药物疗效和不良反应。测定CYP450酶活性的方法主要有外源性探针药物法和内源性生物标志物法,前者广泛应用于临床,但需要服用探针药物,后者无需额外服用药物,安全性和依从性更高。本文综述了CYP1A2、CYP2A6、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A等6种重要CYP450酶亚型内源性生物标志物的研究进展。

LC-MS/MS法同时测定人尿液中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松的浓度

目的建立同时测定人尿液样本中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松浓度的LC-MS/MS方法。方法分别以d4-氢化可的松和d4-6β-羟基氢化可的松为内标,尿液样本加入含内标的甲醇处理后分析。色谱柱为Waters CORTECS C18+柱(2.1 mm×50 mm,2.7μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.6 mL·min^-1。质谱条件采用电喷雾正离子源,扫描方式为多重反应监测,用于定量分析的检测离子分别为m/z 363.2→121.1(氢化可的松)、m/z 367.2→121.1(d4-氢化可的松)、m/z 379.2→325.2(6β-羟基氢化可的松)、m/z 383.2→328.2(d4-6β-羟基氢化可的松)。结果氢化可的松及6β-羟基氢化可的松在1.00~300 ng·mL^-1和5.00~1500 ng·mL^-1内线性良好,定量下限分别为1.00 ng·mL^-1和5.00 ng·mL^-1,批内和批间精密度均<15%,准确度在-6.9%~5.7%范围内,基质效应为95.6%~106.0%,提取回收率为97.2%~108.3%。尿液样本室温放置10 h、反复冻融3次及-80℃冰冻4个月稳定性良好,待测溶液进样器放置24 h稳定。结论该研究建立的分析方法灵敏、准确,样本前处理简便、快捷,可用于人尿液样本中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松浓度的测定,为人体CYP3A4活性的评价提供可靠的检测方法。

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中伏立康唑及其氮氧化代谢物浓度

目的:建立快速测定人血浆中伏立康唑及其主要代谢物伏立康唑-N-氮氧化物浓度的HPLC-MS/MS方法,用于人体药代动力学研究。方法:以伏立康唑和伏立康唑-N-氮氧化物的D3同位素为内标,血浆样品经蛋白沉淀后,用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm)和API 4000质谱仪进行正离子模式电喷雾离子化分析。流速为0.6 mL·min^-1,以甲醇为有机相,0.1%甲酸为水相,按一定程序进行梯度洗脱。结果:伏立康唑和伏立康唑-N-氮氧化物在10.00~8000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,该方法的特异性、批内/批间精密度、准确度、介质效应、提取回收率、稳定性和稀释可靠性符合相关要求。结论:建立了一种准确、简便、可靠的HPLC-MS/MS分析方法,成功应用于健康中国人静脉注射4 mg·kg^-1伏立康唑后的药代动力学研究。

7-酮基胆固醇诱导心肌细胞凋亡的作用研究

目的研究不同浓度的7-酮基胆固醇(7-ketocholesterol,7-keto)对心肌细胞凋亡的影响。方法采用荧光染料Hoechst33342染核的方式观察7-keto对心肌H9C2细胞凋亡形态学的影响,采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测7-keto对心肌H9C2细胞LDH释放的作用。结果 Hoechst33342形态学观察结果显示:7-keto 25μmol/L时,细胞开始呈现数目减少,形态改变如核浓缩和DNA碎裂的凋亡形态。50μmol/L和100μmol/L时,一个光镜视野下,细胞密度极度下降,DNA荧光碎片增多。LDH定量分析结果显示:7-keto 25μmol/L,50μmol/L和100μmol/L浓度依赖性的增加LDH的释放量。结论 7-keto诱导心肌细胞发生凋亡,其作用可能与增加LDH的释放有关。

LC-MS/MS法测定人血浆中安妥沙星的浓度及盐酸安妥沙星片在健康人体的药代动力学研究

目的用LC-MS/MS法测定人血浆中安妥沙星的浓度,并研究口服盐酸安妥沙星片后安妥沙星在人体内的药代动力学特征。方法血浆样本经乙腈沉淀蛋白后,以奥硝唑为内标。色谱柱:Agilent Poroshell 120 SB-C18(2.1 mm×50mm,2.7μm),流动相:乙腈-5 mmol·L^(-1)甲酸铵(含0.1%甲酸)=12∶88,流速:0.4 m L·min^(-1)。12名健康受试者单剂量空腹口服盐酸安妥沙星400 mg,采集不同时间点血样,用LC-MS/MS法测定人血浆中安妥沙星的浓度,并用DAS2.1.1和Excel 2003软件计算主要药代动力学参数。结果安妥沙星在0.01~15.00μg·m L^(-1)内线性良好,准确度、批内和批间精密度均小于15%,在测定过程中稳定性符合要求。安妥沙星单次给药400 mg后的主要药代动力学参数:Cmax为(3.57±0.54)μg·m L^(-1),tmax为(2.25±0.92)h,t1/2为(11.76±1.64)h,AUC0-t为(60.38±7.47)μg·m L^(-1)·h。结论该方法可用于测定人血浆中安妥沙星的浓度,并可用于研究盐酸安妥沙星片在人体内的药代动力学特征。