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抗程序性死亡因子-1与OK432联合治疗在小鼠肝细胞肝癌中的抗肿瘤作用
1
作者
胡丁文
解刚强
+3 位作者
袁蒙蒙
胡舜冰
应瑞琼
张永辉
《中华实验外科杂志》
CAS
2024年第7期1475-1478,共4页
目的观察抗程序性死亡因子-1(PD-1)与OK432联合治疗在小鼠肝细胞肝癌中的抗肿瘤作用, 并探索其抗肿瘤机制。方法 8~10周龄C57BL/6雄性小鼠分别构建H22小鼠肝癌皮下移植瘤模型和腹水瘤模型, 监测小鼠肿瘤大小和生存, 流式细胞术、ELISPO...
目的观察抗程序性死亡因子-1(PD-1)与OK432联合治疗在小鼠肝细胞肝癌中的抗肿瘤作用, 并探索其抗肿瘤机制。方法 8~10周龄C57BL/6雄性小鼠分别构建H22小鼠肝癌皮下移植瘤模型和腹水瘤模型, 监测小鼠肿瘤大小和生存, 流式细胞术、ELISPOT和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测腹水中干扰素γ(IFN-γ)、CD8^(+)T、NK和程序性死亡因子配体1(PD-L1)^(+)细胞, 评价肿瘤微环境中免疫活化与淋巴细胞浸润;使用NK1.1和CD8a抗体清除荷瘤小鼠NK和CD8^(+)T细胞, 监测小鼠生存, 评价CD8^(+)T和NK细胞在治疗中的作用。生存统计使用Log-rank检验, 组间计量数据统计采用One-way ANOVA方法。结果 OK432+抗PD-1组与CON组、OK432组和抗PD-1组比较肿瘤生长显著抑制(F=19.000, P<0.01);OK432+抗PD-1组小鼠中位生存期35 d显著长于CON组的15 d、OK432组的21 d和抗PD-1组的21 d(χ^(2)=21.680, P<0.01)。OK432+抗PD-1组IFN-γ斑点数量[(319.7±48.4)个]远多于CON组[(8.8±8.9)个]、OK432组[(173.2±38.6)个]和抗PD-1组[(172.2±18.9)个, F=82.330, P<0.01];OK432+抗PD-1组腹水中CD8^(+)T和NK细胞比例分别为(14.57±2.52)%和(6.52±1.43)%远高于CON组[(1.35±0.46)%和(0.85±0.54)%]、OK432组[(8.62±2.87)%和(4.04±0.7)%]、抗PD-1组[(5.57±2.23)%和(2.86±1.37)%, CD8^(+)T:F=31.240, P<0.01和NK:F=23.870, P<0.01];OK432+抗PD-1组腹水中IFN-γ浓度为(1 434±407) pg/ml, 显著高于CON组[(306±151) pg/ml]、OK432组[(1 180±565) pg/ml]和抗PD-1组[(649±130) pg/ml, F=9.837, P<0.01];OK432+抗PD-1组腹水中PD-L1^(+)细胞的比例为(22.68±5.43)%, 显著高于CON组[(2.09±0.64)%]、OK432组[(15.16±3.17)%]和抗PD-1组[(9.03±0.97)%, F=37.670, P<0.01]。NK或CD8^(+)T细胞清除后OK432+抗PD-1+抗NK1.1组和OK432+抗PD-1+抗CD8a组小鼠生存期分别为32 d和21 d、CON组18 d、OK432+抗PD-1组34 d, OK432+抗PD-1+抗NK1.1组与OK432+抗PD-1组比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.004, P>0.05), OK432+抗PD-1+抗CD8a组与OK432+抗PD-1组比较差异有统计学意义(χ^(2)=14.520, P<0.01)。结论 OK432与抗PD-1联合治疗能够显著抑制小鼠肝癌移植瘤的生长, 延长小鼠生存期, 增强抗PD-1治疗的有效性;OK432与抗PD-1联合治疗抗肿瘤作用主要依赖于CD8+T细胞。
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关键词
肝细胞癌
OK432
抗程序性死亡因子-1
原文传递
单纯疱疹病毒1型的分离与鉴定
2
作者
袁蒙蒙
应瑞琼
+4 位作者
李亚龙
李睿
张玉薇
刘广芝
张永辉
《中华实用诊断与治疗杂志》
2024年第4期348-353,共6页
目的从口唇疱疹患者疱液中分离鉴定1株单纯疱疹病毒1型(HSV-1),并比较其与HSV-1(F)在卵巢癌细胞中的细胞毒性、病毒复制及诱导免疫活化能力。方法从口唇疱疹患者疱液样本中分离得到1株病毒,经基因测序、透射电镜形态学鉴定,将其命名为HS...
目的从口唇疱疹患者疱液中分离鉴定1株单纯疱疹病毒1型(HSV-1),并比较其与HSV-1(F)在卵巢癌细胞中的细胞毒性、病毒复制及诱导免疫活化能力。方法从口唇疱疹患者疱液样本中分离得到1株病毒,经基因测序、透射电镜形态学鉴定,将其命名为HSV-1(YMM)。分别用感染复数(MOI)=1、0.1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)感染SKOV3、ES2、ID8细胞,48h时采用结晶紫染色法、CCK-8法检测细胞活力以评价病毒的细胞毒性;分别用MOI=0.1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)感染Vero细胞,12、24、36、48、60、72h时测定病毒滴度以评价病毒复制能力;分别用MOI=1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)感染SKOV3细胞,24h时采用实时荧光定量PCR法检测干扰素(IFN)-α、IFN-βmRNA相对表达量,并进行比较。结果经病毒基因测序和形态学鉴定,成功分离出直径为100~125nm的球形包膜病毒HSV-1(YMM),基因序列与HSV-1(Sammple11-DOCK8)(MN401208.1)100%匹配。MOI=1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)对SKOV3、ES2、ID8细胞均有明显毒性作用;MOI=0.1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)对SKOV3、ES2、ID8细胞的毒性作用均明显小于MOI=1;MOI=1或0.1的HSV-1(YMM)与HSV-1(F)对SKOV3、ES2、ID8细胞的毒性作用均无明显差异。MOI=1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)感染SKOV3、ES2、ID8细胞48h时细胞活力均低于MOI=0.1(P<0.05);MOI=1或0.1的HSV-1(YMM)与HSV-1(F)感染SKOV3、ES2、ID8细胞48h时细胞活力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。感染Vero细胞12、24、36、48、60h时HSV-1(YMM)病毒滴度与HSV-1(F)比较差异均无统计学意义(P>0.05),72h时HSV-1(YMM)病毒滴度[(7.4±4.6)×10^(7)PFUs/mL]高于HSV-1(F)[(2.3±0.5)×10^(7)PFUs/mL](t=2.857,P=0.046);HSV-1(YMM)和HSV-1(F)感染Vero细胞12~48h,随时间延长病毒滴度逐渐升高。HSV-1(YMM)感染SKOV3细胞后IFN-α、IFN-βmRNA相对表达量(11.9±7.8、24.1±3.8)均高于HSV-1(F)(4.1±2.5、12.2±2.2)(t=3.353,P=0.005;t=6.638,P=0.001)。结论从口唇疱疹患者疱液样本中分离的HSV-1(YMM)与HSV(F)的细胞毒性相近,HSV-1(YMM)病毒复制能力及诱导卵巢癌细胞表达Ⅰ型IFN的能力更强。
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关键词
单纯疱疹病毒1型
细胞毒性
病毒复制
Ⅰ型干扰素
卵巢癌细胞
原文传递
单孔腹腔镜联合超声引导微波消融术治疗子宫腺肌瘤效果观察
被引量:
1
3
作者
应瑞琼
和晓利
+2 位作者
贾琳琳
段少博
李睿
《中华实用诊断与治疗杂志》
2023年第9期943-947,共5页
目的观察子宫腺肌瘤患者行单孔腹腔镜联合超声引导微波消融术治疗的近期疗效,探讨其安全性。方法2020年4月—2021年12月河南省人民医院诊治子宫腺肌瘤患者15例(合并肠粘连5例,盆腔粘连3例,输卵管系膜囊肿2例,卵巢囊肿2例,深部浸润性子...
目的观察子宫腺肌瘤患者行单孔腹腔镜联合超声引导微波消融术治疗的近期疗效,探讨其安全性。方法2020年4月—2021年12月河南省人民医院诊治子宫腺肌瘤患者15例(合并肠粘连5例,盆腔粘连3例,输卵管系膜囊肿2例,卵巢囊肿2例,深部浸润性子宫内膜异位症2例),均行单孔腹腔镜联合超声引导微波消融术,记录手术情况,术后并发症发生情况。比较术前及术后3、6、12个月子宫、腺肌瘤体积,血红蛋白、糖类抗原125(CA125)水平及视觉模拟评分(VAS)评分。术后随访,评价治疗效果。结果(1)15例手术均顺利,术中生命体征平稳,术后子宫造影提示消融完全,腺肌瘤内均无血流信号、瘤体均无强化。术后均未发生肠道、膀胱等周围脏器损伤的严重并发症;术后发生下腹痛、阴道排液>10 d各1例,均经对症处理后缓解。(2)术后3、6、12个月子宫体积[100.07(50.00,188.70)、69.26(45.21,157.22)、68.99(36.90,135.39)cm^(3)]、子宫腺肌瘤体积[26.56(18.78,48.60)、22.66(2.62,30.07)、13.63(0.35,26.56)cm3]均小于术前[165.45(94.08,244.66)、47.00(27.90,96.98)cm^(3)](P<0.05)。(3)术后6、12个月血红蛋白[(125.30±3.13)、(131.50±3.40)g/L]水平均高于术前[(103.40±5.66)g/L](P<0.05),术后3、6、12个月CA125[(23.38±4.25)、(10.27±0.86)、(7.72±0.76)u/mL]、VAS评分[(5.47±0.52)、(2.40±0.58)、(1.80±0.61)分]均低于术前[(85.82±21.74)u/mL、(8.13±0.54)分](P<0.05)。(4)术后3个月评定疗效,疗效非常显著8例,显著3例,有效3例,无效1例,总有效率为93%。结论单孔腹腔镜联合超声引导微波消融术可缩小子宫腺肌瘤患者子宫体积、腺肌瘤体积,减轻疼痛,纠正贫血,降低CA125水平。
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关键词
子宫腺肌瘤
微波消融术
单孔腹腔镜
超声造影
原文传递
题名
抗程序性死亡因子-1与OK432联合治疗在小鼠肝细胞肝癌中的抗肿瘤作用
1
作者
胡丁文
解刚强
袁蒙蒙
胡舜冰
应瑞琼
张永辉
机构
河南科技大学第一附属医院肝胆胰外科
河南省人民医院妇科
河南科技大学医学院
河南大学河南省干细胞分化与调控重点实验室
河南省人民医院河南省干细胞临床转化国际联合实验室
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
2024年第7期1475-1478,共4页
基金
河南省科技攻关(212102310462、222102310119、232102310039)
河南省医学科技攻关计划联合共建项目(LHGJ20220046)。
文摘
目的观察抗程序性死亡因子-1(PD-1)与OK432联合治疗在小鼠肝细胞肝癌中的抗肿瘤作用, 并探索其抗肿瘤机制。方法 8~10周龄C57BL/6雄性小鼠分别构建H22小鼠肝癌皮下移植瘤模型和腹水瘤模型, 监测小鼠肿瘤大小和生存, 流式细胞术、ELISPOT和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测腹水中干扰素γ(IFN-γ)、CD8^(+)T、NK和程序性死亡因子配体1(PD-L1)^(+)细胞, 评价肿瘤微环境中免疫活化与淋巴细胞浸润;使用NK1.1和CD8a抗体清除荷瘤小鼠NK和CD8^(+)T细胞, 监测小鼠生存, 评价CD8^(+)T和NK细胞在治疗中的作用。生存统计使用Log-rank检验, 组间计量数据统计采用One-way ANOVA方法。结果 OK432+抗PD-1组与CON组、OK432组和抗PD-1组比较肿瘤生长显著抑制(F=19.000, P<0.01);OK432+抗PD-1组小鼠中位生存期35 d显著长于CON组的15 d、OK432组的21 d和抗PD-1组的21 d(χ^(2)=21.680, P<0.01)。OK432+抗PD-1组IFN-γ斑点数量[(319.7±48.4)个]远多于CON组[(8.8±8.9)个]、OK432组[(173.2±38.6)个]和抗PD-1组[(172.2±18.9)个, F=82.330, P<0.01];OK432+抗PD-1组腹水中CD8^(+)T和NK细胞比例分别为(14.57±2.52)%和(6.52±1.43)%远高于CON组[(1.35±0.46)%和(0.85±0.54)%]、OK432组[(8.62±2.87)%和(4.04±0.7)%]、抗PD-1组[(5.57±2.23)%和(2.86±1.37)%, CD8^(+)T:F=31.240, P<0.01和NK:F=23.870, P<0.01];OK432+抗PD-1组腹水中IFN-γ浓度为(1 434±407) pg/ml, 显著高于CON组[(306±151) pg/ml]、OK432组[(1 180±565) pg/ml]和抗PD-1组[(649±130) pg/ml, F=9.837, P<0.01];OK432+抗PD-1组腹水中PD-L1^(+)细胞的比例为(22.68±5.43)%, 显著高于CON组[(2.09±0.64)%]、OK432组[(15.16±3.17)%]和抗PD-1组[(9.03±0.97)%, F=37.670, P<0.01]。NK或CD8^(+)T细胞清除后OK432+抗PD-1+抗NK1.1组和OK432+抗PD-1+抗CD8a组小鼠生存期分别为32 d和21 d、CON组18 d、OK432+抗PD-1组34 d, OK432+抗PD-1+抗NK1.1组与OK432+抗PD-1组比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.004, P>0.05), OK432+抗PD-1+抗CD8a组与OK432+抗PD-1组比较差异有统计学意义(χ^(2)=14.520, P<0.01)。结论 OK432与抗PD-1联合治疗能够显著抑制小鼠肝癌移植瘤的生长, 延长小鼠生存期, 增强抗PD-1治疗的有效性;OK432与抗PD-1联合治疗抗肿瘤作用主要依赖于CD8+T细胞。
关键词
肝细胞癌
OK432
抗程序性死亡因子-1
Keywords
Hepatocellular carcinoma
OK432
Programmed death 1 antibody
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
单纯疱疹病毒1型的分离与鉴定
2
作者
袁蒙蒙
应瑞琼
李亚龙
李睿
张玉薇
刘广芝
张永辉
机构
河南省人民医院郑州大学人民医院妇科
河南大学人民医院河南省人民医院妇科
河南省干细胞临床转化国际联合实验室
河南省免疫细胞与干细胞治疗工程技术研究中心
河南省干细胞分化与调控重点实验室
出处
《中华实用诊断与治疗杂志》
2024年第4期348-353,共6页
基金
河南省科技攻关计划项目(212102310462,222102310119,232102310039)
河南省医学科技攻关计划联合共建项目(LHGJ20220046)
2020年度留学人员科研择优项目([2020]70号)。
文摘
目的从口唇疱疹患者疱液中分离鉴定1株单纯疱疹病毒1型(HSV-1),并比较其与HSV-1(F)在卵巢癌细胞中的细胞毒性、病毒复制及诱导免疫活化能力。方法从口唇疱疹患者疱液样本中分离得到1株病毒,经基因测序、透射电镜形态学鉴定,将其命名为HSV-1(YMM)。分别用感染复数(MOI)=1、0.1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)感染SKOV3、ES2、ID8细胞,48h时采用结晶紫染色法、CCK-8法检测细胞活力以评价病毒的细胞毒性;分别用MOI=0.1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)感染Vero细胞,12、24、36、48、60、72h时测定病毒滴度以评价病毒复制能力;分别用MOI=1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)感染SKOV3细胞,24h时采用实时荧光定量PCR法检测干扰素(IFN)-α、IFN-βmRNA相对表达量,并进行比较。结果经病毒基因测序和形态学鉴定,成功分离出直径为100~125nm的球形包膜病毒HSV-1(YMM),基因序列与HSV-1(Sammple11-DOCK8)(MN401208.1)100%匹配。MOI=1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)对SKOV3、ES2、ID8细胞均有明显毒性作用;MOI=0.1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)对SKOV3、ES2、ID8细胞的毒性作用均明显小于MOI=1;MOI=1或0.1的HSV-1(YMM)与HSV-1(F)对SKOV3、ES2、ID8细胞的毒性作用均无明显差异。MOI=1的HSV-1(YMM)和HSV-1(F)感染SKOV3、ES2、ID8细胞48h时细胞活力均低于MOI=0.1(P<0.05);MOI=1或0.1的HSV-1(YMM)与HSV-1(F)感染SKOV3、ES2、ID8细胞48h时细胞活力比较差异均无统计学意义(P>0.05)。感染Vero细胞12、24、36、48、60h时HSV-1(YMM)病毒滴度与HSV-1(F)比较差异均无统计学意义(P>0.05),72h时HSV-1(YMM)病毒滴度[(7.4±4.6)×10^(7)PFUs/mL]高于HSV-1(F)[(2.3±0.5)×10^(7)PFUs/mL](t=2.857,P=0.046);HSV-1(YMM)和HSV-1(F)感染Vero细胞12~48h,随时间延长病毒滴度逐渐升高。HSV-1(YMM)感染SKOV3细胞后IFN-α、IFN-βmRNA相对表达量(11.9±7.8、24.1±3.8)均高于HSV-1(F)(4.1±2.5、12.2±2.2)(t=3.353,P=0.005;t=6.638,P=0.001)。结论从口唇疱疹患者疱液样本中分离的HSV-1(YMM)与HSV(F)的细胞毒性相近,HSV-1(YMM)病毒复制能力及诱导卵巢癌细胞表达Ⅰ型IFN的能力更强。
关键词
单纯疱疹病毒1型
细胞毒性
病毒复制
Ⅰ型干扰素
卵巢癌细胞
Keywords
herpes simplex virus type 1
cytotoxicityvirus replication
typeⅠinterferonovarian carcinoma cell
分类号
R446.5 [医药卫生—诊断学]
原文传递
题名
单孔腹腔镜联合超声引导微波消融术治疗子宫腺肌瘤效果观察
被引量:
1
3
作者
应瑞琼
和晓利
贾琳琳
段少博
李睿
机构
河南大学人民医院
河南省人民医院
河南省人民医院
出处
《中华实用诊断与治疗杂志》
2023年第9期943-947,共5页
基金
2020年度留学人员科研择优项目(豫人社办函[2020]70号)
河南省医学科技攻关计划联合共建项目(LHGJ20200024)。
文摘
目的观察子宫腺肌瘤患者行单孔腹腔镜联合超声引导微波消融术治疗的近期疗效,探讨其安全性。方法2020年4月—2021年12月河南省人民医院诊治子宫腺肌瘤患者15例(合并肠粘连5例,盆腔粘连3例,输卵管系膜囊肿2例,卵巢囊肿2例,深部浸润性子宫内膜异位症2例),均行单孔腹腔镜联合超声引导微波消融术,记录手术情况,术后并发症发生情况。比较术前及术后3、6、12个月子宫、腺肌瘤体积,血红蛋白、糖类抗原125(CA125)水平及视觉模拟评分(VAS)评分。术后随访,评价治疗效果。结果(1)15例手术均顺利,术中生命体征平稳,术后子宫造影提示消融完全,腺肌瘤内均无血流信号、瘤体均无强化。术后均未发生肠道、膀胱等周围脏器损伤的严重并发症;术后发生下腹痛、阴道排液>10 d各1例,均经对症处理后缓解。(2)术后3、6、12个月子宫体积[100.07(50.00,188.70)、69.26(45.21,157.22)、68.99(36.90,135.39)cm^(3)]、子宫腺肌瘤体积[26.56(18.78,48.60)、22.66(2.62,30.07)、13.63(0.35,26.56)cm3]均小于术前[165.45(94.08,244.66)、47.00(27.90,96.98)cm^(3)](P<0.05)。(3)术后6、12个月血红蛋白[(125.30±3.13)、(131.50±3.40)g/L]水平均高于术前[(103.40±5.66)g/L](P<0.05),术后3、6、12个月CA125[(23.38±4.25)、(10.27±0.86)、(7.72±0.76)u/mL]、VAS评分[(5.47±0.52)、(2.40±0.58)、(1.80±0.61)分]均低于术前[(85.82±21.74)u/mL、(8.13±0.54)分](P<0.05)。(4)术后3个月评定疗效,疗效非常显著8例,显著3例,有效3例,无效1例,总有效率为93%。结论单孔腹腔镜联合超声引导微波消融术可缩小子宫腺肌瘤患者子宫体积、腺肌瘤体积,减轻疼痛,纠正贫血,降低CA125水平。
关键词
子宫腺肌瘤
微波消融术
单孔腹腔镜
超声造影
Keywords
uterine adenomyoma
microwave ablation
single-port laparoscopy
contrast-enhanced ultrasound
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗程序性死亡因子-1与OK432联合治疗在小鼠肝细胞肝癌中的抗肿瘤作用
胡丁文
解刚强
袁蒙蒙
胡舜冰
应瑞琼
张永辉
《中华实验外科杂志》
CAS
2024
0
原文传递
2
单纯疱疹病毒1型的分离与鉴定
袁蒙蒙
应瑞琼
李亚龙
李睿
张玉薇
刘广芝
张永辉
《中华实用诊断与治疗杂志》
2024
0
原文传递
3
单孔腹腔镜联合超声引导微波消融术治疗子宫腺肌瘤效果观察
应瑞琼
和晓利
贾琳琳
段少博
李睿
《中华实用诊断与治疗杂志》
2023
1
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