植物叶肉细胞内果糖1.6——二磷酸酶(FDPase)的电镜细胞化学定位法

本义在探讨果糖1.6—二磷酸酶(FDPase,EC3.1.3.11)细胞化学反应条件的基础上,初步建立了植物叶肉细胞内FDPase的电镜细胞化学定位法。本研究表明:FDPase的最适pH约为8.6;最适底物浓度约为1mM;mg～(+2)是FDPase活性绝对必需的;FDPase是一种膜束缚酶,它特异性地定位于叶绿体的类囊体膜。

腺苷环化酶的细胞化学定位研究(光学显微镜和电子显微镜):事实和假像

本工作对大鼠肾及小鼠十二指肠等进行了光学显微镜下腺苷环化酶的细胞化学研究;并在大鼠肾、颌下腺及肝等组织进行了电镜细胞化学定位的观察。采用ATP和特异性底物AMP-PNP显示腺苷环化酶的活性。实验结果表明:(1)温育在含有和不含有底物的孵育液中,电镜下均观察到在组织的相同部位呈现出黑色电子密度沉淀,这种沉淀物的出现对戊二醛固定较为敏感。光学显微镜下,经不加底物的孵育液温育的切片均为阴性反应。(2)孵育液内加入腺苷环化酶的激活剂(氟化钠)或抑制剂(四氧嘧啶),其反应沉淀物的出现均无明显变化。(3)在碱性磷酸酶含量较高的组织(肾、十二指肠)中,以AMP-PNP为底物,在光学显微镜下观察到有碱性磷酸酶反应的干扰。(4)组织小块或冰冻切片经煮沸加热处理后,在光学显微镜和电镜下均不出现沉淀物。我们的实验结果进一步对R-H氏显示腺苷环化酶的细胞化学方法的有效估价表示怀疑。