CCL2与M2巨噬细胞在慢性应激患者结直肠癌中表达及其相关性研究

目的 在慢性应激患者结直肠癌中,探究CCL2对M2巨噬细胞极化的影响及其意义。方法 采用生物信息学方法,预测CCL2与结直肠癌肿瘤分期、患者预后的相关性;利用免疫组织化学法,检测结直肠癌组织中CCL2和M2巨噬细胞标记物CD163的表达情况;Western Blot检测结直肠癌组织中CCL2、M2巨噬细胞标记物CD163、M1巨噬细胞标记物CD80的表达情况。统计分析CCL2、CD80和CD163在慢性应激和非应激的结直肠癌患者组织的表达差异及其相关性。结果 CCL2与M2巨噬细胞标记物CD163在慢性应激患者结直肠癌组织中显著高表达,且存在显著正相关。结论 在慢性应激的结直肠癌患者中,CCL2有可能通过影响M2巨噬细胞的极化,从而影响患者预后。

功能性消化不良成年小鼠模型的制备方法

背景:制备适宜的功能性消化不良小鼠模型能够为后续临床治疗和用药研究提供可靠的动物模型。目的:运用联合多因素方法造模制备成年小鼠功能性消化不良模型。方法:60只昆明小鼠随机分为空白对照组和模型组,每组30只。空白对照组小鼠每日灌胃2%蔗糖溶液0.2 mL,持续8 d。模型组在经典碘乙酰胺造模方法联合间日给食的基础上,放入水箱中持续游泳20 min,1 h后给予左旋精氨酸溶液5.7 g/kg灌胃,持续5 d,从第6天开始给予冷大黄水煎液2.9 g/kg灌胃3 d。观察小鼠行为学变化及光镜下病理形态学变化来确定成模效果。实验方案经承德医学院动物实验伦理委员会批准(批准号为CDMULAC-20191113-011)。结果与结论:与对照组相比,模型组小鼠出现了毛发不光、拱背、体质量呈现下降趋势等特征变化,小肠推进率与胃内容物排空率均有下降现象,光镜下观察胃组织、肠组织切片显示有轻度损伤现象;提示在成年小鼠中运用联合多因素造模方法能够成功制备功能性消化不良模型,并且此种方法所制备的动物模型小鼠没有明显坏死、糜烂等器质性病变,说明此种制备成年功能性消化不良小鼠模型的方法可行。

改良缝挂法构建小鼠胃原位移植瘤模型及评估

胃癌在消化系统肿瘤中致死率位居第3位^([1-2]),早期通常无明显症状,多数患者发现时病情已进展到中晚期^([3])。尽管胃癌已在多模式治疗方面取得进展,但复发依然常见^([4])。目前,胃癌体内研究常采用动物皮下移植瘤模型,但因胃癌具有特殊的肿瘤微环境^([5]),其内多种基质细胞、生长因子相互作用直接或间接地影响肿瘤的发生和发展[6],因此关于胃癌的研究不能脱离肿瘤微环境及神经内分泌系统等独立进行瘤体组织研究。

慢性应激介导Plexin A1-JAK2-STAT3通路刺激VEGF分泌促进胃癌血管生成

目的 探究异丙肾上腺素(ISO)模拟的慢性应激通过神经丛素A1-蛋白酪氨酸激酶2-信号转导与转录激活因子3(Plexin A1-JAK2-STAT3)通路对胃癌血管生成的影响。方法 利用慢病毒或通路抑制剂分别干扰MGC-803胃癌细胞中Plexin A1的表达或JAK2-STAT3信号通路,再联合利用20μmol/L浓度的ISO作用MGC-803细胞12 h后,收集细胞培养液,采用放射免疫法检测MGC-803细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)水平;用MGC-803细胞培养液进一步培养血管内皮细胞EA.hy926,分别利用CCK-8法、Transwell法、血管形成实验检测EA.hy926细胞的增殖、迁移和成管能力;Western印迹检测EA.hy926细胞中Plexin A1、VEGF受体2(VEGFR2)蛋白表达。结果 慢病毒干扰MGC-803细胞Plexin A1后,细胞VEGF分泌水平明显降低;干扰了Plexin A1表达的MGC-803细胞培养液培养EA.hy926细胞后,EA.hy926细胞中VEGFR2和Plexin A1表达明显减少,同时EA.hy926细胞增殖、迁移和成管能力显著降低;抑制MGC-803细胞中JAK2-STAT3信号通路,细胞VEGF分泌水平明显降低;利用MGC-803细胞培养液培养的血管内皮细胞EA.hy926的增殖、迁移和成管能力显著降低。结论 慢性应激通过胃癌细胞Plexin A1-JAK2-STAT3信号通路刺激VEGF分泌,促进胃癌血管生成。