核桃内生真菌抗氧化菌株的筛选及其代谢产物活性研究

本试验以29株核桃内生真菌为研究对象,采用总还原力(FRAP法)及DPPH·清除试验评价其代谢产物的抗氧化能力,从中筛选出高活性菌株,并对该菌株发酵液进行浓缩萃取,研究各萃取物的抗氧化活性。结果表明,供试29株菌的代谢产物都表现出一定的抗氧化活性,其中菌株LTS-6-6(Pyrenochaeta)为高活性菌株。该菌株发酵液乙酸乙酯萃取物(EAE)显示了较强的抗氧化活性,对DPPH·的EC 50为7μg/mL,总还原力为527.59±10.66 mg V C/g,总酚和总黄酮含量分别达到641.14±7.50 mg没食子酸/g、100.30±8.44 mg芦丁/g。该结果表明,核桃内生真菌代谢产物具有一定的抗氧化活性,是寻找天然抗氧化活性物质的良好资源。

核桃(Juglandaceae)种仁、叶、花粉抗氧化活性及成分鉴定

为综合开发核桃生物资源,研究了7种不同溶剂提取的不同种类核桃种仁、叶及其花粉提取物的抗氧化活性,并鉴定其抗氧化成分。采用DPPH和ABTS^+自由基清除能力以及FRAP还原能力评价其抗氧化活性,并测定总酚、总黄酮含量,采用高分辨质谱仪鉴定样品抗氧化活性成分。结果表明,供试7种溶剂中60%丙酮提取物抗氧化活性较高。山核桃叶的DPPH(IC50=0.156 mg/mL)和ABTS+(IC50=0.131 mg/mL)自由基清除能力及还原能力(62.17 mg VC/g)较其他品种核桃叶强。‘西林3号’核桃不同部位抗氧化活性测定显示,DPPH和ABTS+自由基清除力及FRAP还原力顺序从强到弱为:内种皮>叶>花粉>带皮种仁>去皮种仁。利用LC-MS从‘西林3号’内种皮及其核桃叶、KT-J02核桃叶、山核桃叶等4个供试样品的60%丙酮提取物中共鉴定出17种抗氧化活性成分,其中酚类9种,黄酮类8种,槲皮素和汉黄芩素为4种供试样品共有成分。山核桃叶中鉴定出13种成分,其中4种仅存在与山核桃中,即没食子酸、3-咖啡酰奎宁酸、表儿茶素没食子酸酯和对香豆酸;‘西林3号’和KT-J02核桃叶分别有1种成分仅存在于其中,为没食子酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖和儿茶素。内种皮中鉴定出6种成分,鞣花酸仅存在于内种皮中。

不同施肥处理对核桃产量品质及土壤肥力的影响

以‘香玲’核桃为研究对象,施肥试验共设不施肥,单施化肥,化肥和有机肥,化肥和生物有机肥,化肥、有机肥和生物有机肥5个处理,通过分析核桃产量品质、土壤肥力及微生物数量对不同施肥处理的响应。结果表明:随着施肥年限的延长,核桃产量逐年上升,且化肥、有机肥和生物有机肥增产率最高,可达101%。有机肥配施还可改善核桃品质,其中化肥、有机肥和生物有机肥混合配施效果最佳,蛋白质、谷氨酸、不饱和脂肪酸、微量元素Zn、Fe含量分别可达18.0%、3.65%、93.1%、225.1 mg/kg和34.9 mg/kg。土壤含水率、速效氮、磷、钾含量和土壤微生物数量在不同肥料配比间表现为化肥、有机肥和生物有机肥>化肥和生物有机肥>化肥和有机肥>单施化肥>不施肥,因此化肥、有机肥和生物有机肥混合配施效果最佳,可显著提高核桃产量品质,增加土壤肥力,能满足高产、稳产、优质和可持续发展目标。

核桃内生真菌SYS-5-2的鉴定及其抑菌活性

选取实验室保存的核桃内生真菌SYS-5-2,对其进行形态学和分子生物学鉴定,并通过生长速率法综合评价该菌株发酵产物的抑菌活性。结果表明,综合形态学分类方法和基于ITS序列基础上的系统发育分析,核桃内生真菌SYS-5-2鉴定为裂褶菌属。菌株SYS-5-2发酵产物对供试的6种植物病原菌均有不同程度的抑菌效果;液体发酵产物浓缩倍数越大,抑菌率越高,且相同浓度下,供试液B的抑菌效果整体优于供试液A;固体发酵产物中,乙酸乙酯和正丁醇相萃取物对水稻纹枯和苹果腐烂病原菌均表现出较好的抑菌效果,抑菌率均>90%;不同浓度的乙酸乙酯萃取物对6种病原菌的抑菌效果不同,浓度20 mg·mL^-1时,对水稻纹枯病原菌的抑菌率已达到81.25%,80 mg·mL^-1时,完全抑制了水稻纹枯病原菌的生长,IC 50仅为10.28 mg·mL^-1,而对其他病原菌的IC 50都在33.19~43.47 mg·mL^-1。

核桃内生真菌LTS-6-6代谢产物的体外抗氧化活性及对油脂氧化稳定性的影响

以核桃内生真菌LTS-6-6为研究对象,通过ABTS自由基清除法、羟基自由基清除法及Fe3+还原能力测定等明确其代谢产物不同极性萃取物的体外抗氧化活性;采用Schaal烘箱法,以油脂过氧化值、酸值作为指标,测定添加高活性萃取物对菜(籽)油氧化稳定性的影响。研究结果表明,4种萃取物中,乙酸乙酯萃取物(Ethyl acetate extract,EAE)显示出较强的抗氧化活性,其对ABTS自由基、羟基自由基有较强清除能力(清除率≥80%),清除率高出石油醚萃取物(Petroleum ether extract,PEE)71.39%;EAE总酚和总黄酮含量为643.71 mg没食子酸/g和102.05 mg芦丁/g。添加0.02%EAE处理的菜(籽)油,在70℃下储藏8 d的过氧化值、酸值分别为5.88 mmol/kg、达到0.85 mg/g。由阿伦尼乌斯公式预测,在菜(籽)油中添加0.02%EAE时,20℃下储藏期为256 d,与空白组相比,延长192 d,说明添加EAE有效抑制了菜(籽)油氧化酸败。