从转录组学角度探讨薏苡仁不同组分对脾虚水湿不化大鼠水盐转运的影响

目的:借鉴基因芯片技术,以性味药理学理论为指导,探讨薏苡仁不同组分对利湿作用的主要机制。方法:以薏苡仁不同拆分组分对脾虚水湿模型大鼠进行治疗,对空肠组织进行全基因表达谱检测,对GO分子功能的Transporter activity功能注释到的基因进行主成分分析和聚类分析,比较各治疗组疗效和可能机制。结果:薏苡仁蛋白、多糖和脂肪油对脾虚水湿大鼠Transporter activity功能具有明显调节作用;而相关基因团以Slc26a、Slc5a、Slc13a、AQP3、AQP7、Fabp6等为主;它们对转运活性基因调节具有共性,可能具有共同的作用位点和作用途径;淀粉对脾虚水湿模型大鼠Transporter activity功能改善较弱。结论:薏苡仁调节健脾利湿大鼠模型转运功能的物质可能存在于蛋白、多糖和脂肪油中,淀粉(残渣)中健脾利湿的功能较弱。

上焦水饮内停大鼠模型的建立与评价

目的探索建立符合中医病证特点的上焦水饮内停大鼠模型,并进行生物学特征研究。方法将40只大鼠随机分为空白对照组和模型组,每组20只。模型组给予异丙肾上腺素(ISO)腹部皮下注射,第1天20 mg/kg、第2天10 mg/kg、第3天5 mg/kg、从第4天开始3 mg/kg,1次/d,连续17 d,观察2周,空白对照组腹部皮下注射等量生理盐水。第34天开始模型组行气管插管手术,术后寒冷刺激7 d。结果与空白对照组比较,模型组大鼠肺通透指数明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);肺泡灌洗液回抽量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);肺干湿比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);心脏器重量及脏器指数显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)、肺脏器重量及脏器指数有上升趋势;肌酸激酶(CK)表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠HE染色显示肺泡壁结构异常,多数肺泡腔内充满粉红色蛋白性液体,呈均质状;部分心肌细胞有嗜酸性变性和(或)坏死的病理改变。结论实验结果表明,上焦水饮内停证动物模型造模方法简单、客观,符合中医病症特点。

借鉴基因芯片技术,以性味药理学理论为依据,探讨薏苡仁不同拆分组分对脾虚水湿不化模型大鼠oxidoreductase activity的影响

目的:借鉴基因芯片技术,探讨薏苡仁拆分组分健脾渗湿作用时对能量代谢的影响。方法:根据本项目组建立的方法对薏苡仁组分拆分和动物模型建立,以中焦空肠的基因变化为研究指标,探讨各组分对空肠oxidoreductase activity的影响。结果:模型动物存在明显的能量代谢障碍,薏苡仁各组分均可以改善这种障碍,但其作用靶点可能并不一致。结论:建议在使用薏苡仁治疗脾虚疾病时,以麸炒方式炮制,以提高疗效。

薏苡仁及其拆分组分对脾虚水湿不化模型大鼠胃肠功能的影响

目的:研究薏苡仁及其拆分组分对脾虚水湿不化模型大鼠胃肠功能的影响。方法 :采用高脂低蛋白饲料饲养+负重游泳复合因素诱导8周,建立脾虚水湿不化大鼠模型,造模后给予薏苡仁各组分进行干预,干预14 d,观察大鼠一般状况,并测定小肠推进率、胃排空率,血浆胃泌素、胃动素、血管活性肠肽、生长抑素的含量变化,评价薏苡仁不同组分对大鼠胃肠功能的影响。结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠胃排空延迟、小肠推进速度下降,血浆胃泌素、血管活性肽、生长抑素水平显著升高(P<0.01)、胃动素水平显著降低(P<0.01)。经薏苡仁及其拆分组分治疗后,以上各指标均有不同程度的恢复。结论:薏苡仁及其拆分组分能改善脾虚水湿不化模型大鼠胃肠功能,其作用机制可能与调节血液中紊乱的胃肠激素趋于正常水平有关。

细胞因子对脾虚水湿不化大鼠模型影响的曲线拟合分析

目的:探讨细胞因子对脾虚水湿不化大鼠模型综合影响的数学模型问题。方法:采用"饮食不节+久居水湿"的方法建立脾虚水湿不化大鼠模型,以PLS-DA法建立模型综合评价指标并计算主元得分,并对细胞因子与主元得分进行Linear、Quadratic及Cubic曲线拟合。结果:对11个大鼠脾虚水湿不化描述的指标进行PLS-DA综合评价,共提取一个有效主元成分,该主元得分与IL-4、IL-2和IFN-γ均具有良好的相关关系(r>0.5,P<0.05);对IL-2、IL-4和IFN-γ与主元得分进行Linear、Quadratic及Cu]bic曲线拟合,结果发现,3种拟合方程中,IL-2、IFN-γ拟合方程均具有统计学意义(P<0.05),但R^2均小于0.4,这说明方程对结果的解释效果一般;但IL-4的Quacratic及Cubic曲线拟合不仅方程具有统计学意义(P<0.05),且R^2>0.6,方程对结果的解释效果好。结论:IL-4对脾虚水湿不化的影响并不呈线性,而符合Quadratic或Cubic方程,IL-4在脾虚水湿不化的发生过程中具有重要作用。

薏苡仁不同组分干预脾虚水湿不化大鼠细胞间隙基因变化

目的:探讨薏苡仁不同组分对脾虚水湿不化模型大鼠空肠extracellular space组件的影响。方法:以高脂低蛋白饮食+游泳建立脾虚水湿不化大鼠模型,基因芯片技术进行空肠全基因组测定,以Quick-GO注释到的extracellular space组件进行PCA分析。结果:模型组和正常对照组具有非常清楚的差异,模型组主要出现了Sepp1、Lamc2、Csn1s1、Mmp8、Ccl20、Apoe、Apoa5、Pyy、Ccl19、Np4基因的上调和Gnrh1、Col6a3基因的下调,薏苡仁水煎液和各拆分组分均能够对模型大鼠的差异基因进行调节,改善机体微环境,主要起作用的基因是Col6a3、Sepp1、Lamc2、Gnrh1、Myoc、Csn1s1、Mmp8、Ccl20、Arg1、Apoe等。结论:脾虚水湿不化的运化失常应该是以物质由小肠上皮细胞向其他组织器官运送过程的异常为主,薏苡仁各组分的治疗都可使失衡的细胞微环境得到改善。