人骨髓间质干细胞作为骨、软骨组织工程种子细胞的实验研究

目的 :探讨经体外扩增、诱导分化的人骨髓间质干细胞(humanbonemarrowmesenchymalstemcells,hMSC)作为组织工程化骨、软骨种子细胞的可行性。方法 :体外分离、培养、扩增hMSC ,以流式细胞仪检测hMSC的表面抗原。诱导hMSC向成骨细胞、软骨细胞分化。以倒置显微镜和电子显微镜观察细胞的形态 ;以组织化学、免疫组织化学和RT PCR ,检测成骨细胞、软骨细胞的特异性标志物。结果 :分离得到的细胞可表达hMSC的特异抗原 ,在体外扩增 15代以上 ,其形态及表面抗原保持不变。成骨诱导培养的细胞上清液中ALP的含量高于对照组 (P <0 .0 5 )。成骨及成软骨诱导的细胞形态均由成纤维样梭形向多边形转变。透射电镜观察可见大量扩张的粗面内质网、高尔基体及线粒体。扫描电镜观察可见经成骨诱导后的细胞表面有钙盐沉积 ,成软骨诱导的细胞表面有胶原样突起。成骨诱导培养后 ,可见碱性磷酸酶 (ALP)染色、Ca结节染色、胶原 Ⅰ (COL Ⅰ )及骨钙素 (osteocalcin ,OC)免疫组化染色阳性 ,同时RT PCR检测COL Ⅰ、OCmRNA表达阳性。成软骨诱导后 ,甲苯胺蓝染色见细胞周围有大量的异染性基质 ,免疫组化和RT PCR检测COL Ⅱ表达阳性。结论 :hMSC在体外可大量扩增。在特定培养液诱导下 ,可向成骨细胞及软骨细胞转化 ,可作为骨。

人骨髓间质干细胞的优化培养

目的 探索人骨髓间质干细胞 (mesenchymal stem cells,MSCs)的优化培养条件。 方法 应用不同条件 ,研究原代培养方法、接种密度、首次换液时间、培养基、血清浓度及种类对细胞生长的影响 ,并以选定的条件培养、扩增 MSCs,扩增后向成骨细胞和软骨细胞诱导。 结果 在其它条件不变的前提下 ,密度梯度分离法优于全骨髓法 ,2 .5× 10 5/ cm2是人 MSCs原代培养的适宜接种密度 ,原代第 5天首次换液为最佳换液时间 ,DMEM培养基优于 α- MEM培养基 ,血清 C为适宜的血清 ,10 %为适宜的血清浓度。所选条件培养的 MSCs可在体外扩增 15代以上 ,形态保持不变 ,并具有良好的分化潜能。 结论 建立了人 MSCs的体外优化培养条件 ,为其在组织工程方面的应用作出了新的探索。

人骨髓间质干细胞库的初步建立

目的探讨建立生物学性状稳定的人骨髓间质干细胞(humanmarrowmesenchymalstemcells,hMSCs)库的可行性,为组织工程种子细胞的来源作初步探索。方法对分离得到的hMSCs采用液氮低温冻存,并在一定时间复苏培养,以流式细胞仪检测其表面抗原,在诱导培养基中对其行成骨和成软骨诱导培养,光镜、电镜观察细胞的形态,采用组织化学、免疫组织化学及分子生物学的方法检测成骨和成软骨诱导的特异标志物:碱性磷酸酶、型胶原、型胶原及骨钙素,研究其生物学性状。结果从骨髓中分离得到了纯度达96%以上的hMSCs,复苏后的hMSCs形态和表面抗原保持不变,可继续扩增10代以上,倍增时间40h。复苏后第2、6、10代hMSCs均保持较强的向软骨细胞、成骨细胞的分化能力。结论初步建立了hMSCs库,可为骨及软骨组织工程提供较好的种子细胞。

免疫应激对不同品种仔猪免疫功能的影响

[目的]探讨免疫应激对莱芜猪、鲁莱猪及大约克夏断奶仔猪免疫功能的影响。[方法]分别选用12头体重为(13.6±0.5)kg的莱芜猪、鲁莱猪和大约克夏猪,采用2×3因子设计:免疫应激(注射LPS或生理盐水),品种类型(莱芜猪、鲁莱猪和大约克夏猪)。试验第1天,分别给每品种中的6头猪注射200μg/kg.BW的LPS,其余6头注射生理盐水作为对照,并进行猪瘟疫苗接种。注射LPS后的第2、7和14天,采血测定其淋巴细胞转化率;注射LPS前1天、注射LPS后第7天和第14天,测定其猪瘟抗体水平。[结果]猪在LPS刺激后的第2天,其淋巴细胞转化率显著高于生理盐水组(P<0.01),莱芜猪的淋巴细胞转化率显著高于大约克夏猪(P<0.05);免疫应激对不同品种仔猪的猪瘟抗体水平无差异性影响。[结论]LPS能够有效刺激不同品种猪的细胞免疫机能,并且不同品种仔猪免疫应答能力有差异。

胎儿骨髓间质干细胞的获得和诱导成软骨培养

目的:研究胎儿骨髓间质干细胞(MSCs)体外分离、培养、扩增并向软骨细胞表型转化,探究新的组织工程化软骨种子细胞的来源。方法:从引产胎儿(家属自愿捐献)髂骨获得骨髓,体外培养从骨髓中获得的MSCs,以流式细胞仪检测细胞表面抗原。将传代后的MSCs在诱导培养液中培养,检测软骨细胞的特异性标志物。结果:从胎儿骨髓得到的细胞表达MSCs的表面标志物,并可在体外培养、扩增,诱导后细胞变为多伪足的多边形细胞,扫描电镜见细胞表面有丰富的交联,透射电镜观察见大量粗面内质网、高尔基体、线粒体。甲苯胺蓝染色见细胞内有异染性基质(免疫组化和RT-PCR检测COLⅡ表达阳性。结论:胎儿MSCs可作为软骨组织工程的较理想的种子细胞。

人骨髓间质干细胞向成骨细胞分化的形态学研究

目的:研究人骨髓间质干细胞(hMSCs)体外培养并向成骨细胞表型转化过程中的形态学改变。方法:在成骨特定诱导培养液中培hMSCs。在相差显微镜和电子显微镜下观察细胞形态,苏木精-伊红染色观察形态,组织化学法检测碱性磷酸酶(ATP)、Ca结节染色,免疫组化检测Ⅰ型胶原(COLⅠ)、骨钙素(OC)表达。结果:诱导培养的hMSCs形态由成纤维样梭形向多边形转变,透射电镜观察见大量扩张的粗面内质网、高尔基体、线粒体和钙盐沉积,扫描电镜见细胞表面有大量钙盐颗粒。诱导培养后7,14,21d可见ALP染色、COLⅠ免疫组化染色阳性,诱导培养后14,21d可见OC免疫组化染色、Ca结节染色阳性。结论:hMSCs在特定培养液诱导下可表现为典型的成骨细胞形态,可作为骨组织工程的种子细胞。

我国电弧炉炼钢节能技术概况

近年来我国电弧炉炼钢产量不断增加,但是由于我国电炉钢生产所需废钢和电能成本较高,电炉钢在粗钢总产量中所占比重不断下降,到2008年降至10%左右,远低于世界约30%的平均水平。分析了电弧炉炼钢过程中能量的构成,得出电弧炉炼钢的能源供应包括电能和辅助能源;重点介绍了我国电弧炉炼钢节能技术的概况,包括电弧炉容量大型化、优化炉料结构技术、节电技术、强化冶炼技术、余热利用技术等五个方面。

150t 20MVALF钢包炉的供电研究

对某钢厂150 t LF钢包炉的电气特征和供电曲线进行了研究分析,绘出了LF炉20 MVA变压器各级电压下的电气特性曲线图,利用各级电压的电气运行特性建立了LF炉的电气运行圆图;根据LF炉电气运行约束条件得出了各级电压下的许用电流工作点,绘出了在LF炉实际生产过程中可用的典型供电曲线,得到了LF操作各个阶段合理的供电曲线和吹氩流量。通过研究,最终制定出150 t 20 MVA LF钢包炉合理的供电制度,对该公司大吨位钢锭的精炼生产具有重要的指导意义。

电磁搅拌对小方坯连铸生产45#钢组织和成分偏析的影响

研究了电磁搅拌对小方坯连铸生产45#钢低倍组织和碳成分偏析的影响,通过试验分析表明,经过电磁搅拌后,铸坯内部质量明显提高,结晶组织更加致密;铸坯碳成分偏析程度在外弧侧比内弧侧严重,可以通过合理降低连铸钢水过热度、适度提高搅拌电流和搅拌频率加以改善。

免疫应激对不同品种仔猪免疫功能影响

l材料与方法1．1试验动物试验分别选用莱芜猪、鲁莱猪和大约克夏断奶仔猪12头，平均体重（13．6±0．5）kg，健康状态良好。饲养于青岛农业大学单胃动物代谢室，室内温度（15±2）℃。1．2试剂LPS（大肠杆菌血清型055：B5）、刀豆蛋白A（ConA）、四甲基偶氮唑盐（mr）均为Sigma产品；RPMI．1640培养基为Hyelone产品；淋巴细胞分层液为中国医学科学院天津血液研究所产品；纯化灭活的猪瘟致敏醛化蹂酸化绵羊红细胞，

动力学因素对拜尔法赤泥使用CO_2脱钠的影响

使用温室气体CO2对铝业固体废弃物拜尔法赤泥进行脱钠,分析了赤泥粒度、反应时间和赤泥浆搅拌速率3个动力学因素对脱钠率的影响。研究结果表明,赤泥粒度对脱钠率影响十分显著,其他因素影响不显著;脱钠最佳工艺参数为:赤泥粒度2 000目、反应时间90 min和搅拌速率600 r/min;最优工艺下的脱钠率为77.39%,残余Na2O含量为2.37%;赤泥浆中钠碱物质的扩散是影响赤泥脱钠的限制性因素,较小的赤泥粒度能够促进钠碱物质的扩散,建议以后的脱钠技术研究应考虑将赤泥细磨至2000目。

40tEBTEAF-LF-VD-铸锭工艺冶炼模具钢H13的洁净度分析

试验用热作模具钢H13(/%:0.36~0.38C、0.36~0.38Mn、0.89~0.91Si、0.007~0.010P、0.006~0.011s、5.10~5.15Cr、1.12~1.18Mo、0.84~0.89V)的冶炼工艺流程为40 t偏心炉底出钢电弧炉-钢包炉精炼-VD处理4.65 t铸锭工艺。通过对各冶炼工序钢水的总氧和氮含量-T[O]和[N]的分析以及钢中夹杂物的形貌和组成的分析,研究了该工艺流程生产的H13钢的洁净度。结果表明,经LF-VD精炼后H13钢中的平均总氧含量-T[O]为22×10^(-6),平均氮含量-[N]为95×10^(-6);Φ200 mm锻坯中夹杂主要以脱氧产物氧化铝为主,同时含有硫化锰等硫化物和偏析产生的氮化物;夹杂物尺寸集中在5μm左右,较大尺寸的夹杂物为10μm左右。采用该流程冶炼的H13钢可以满足对该钢种洁净度的要求。

新兴细胞生物学技术-组织微阵列研究进展

肿瘤相关基因的研究在肿瘤病理学中占有重要的地位,新兴的细胞生物学技术-组织微阵列,具有批量性、快速性、准确性等特点,为肿瘤相关基因的研究提供了一种全新的方法。从组织微阵列技术的原理、主要优势、应用、研究进展、存在的问题和展望等方面作一综述。

不同浓度藻酸钙复合软骨细胞体外培养的实验研究

为探寻复合软骨细胞生长的最佳藻酸钙浓度,将传代培养的、细胞终浓度为1×107/mL的软骨细胞复合藻酸钠凝胶,然后滴入浓度分别为100、200、300、400、500mmol/L的氯化钙溶液中,固化15min形成藻酸钙凝珠,于体外培养7d后,行HE染色及Masson’s三色染色,结果显示软骨细胞与固化剂氯化钙浓度为100、200、300mmol/L的藻酸钙凝胶复合良好并能在其中保持活性及分裂能力;而在氯化钙浓度为400mmol/L和500mmol/L的藻酸钙凝胶中,软骨细胞的活性及分裂能力明显下降.因此固化剂氯化钙的浓度可以提高到300mmol/L,该浓度不仅对软骨细胞的生长无影响,而且能适当提高藻酸钙凝胶的机械强度,可以作为一种较理想的软骨组织工程支架材料.

150吨桶型钢包吹氩制度的反应工程学

以150吨桶型钢包为研究对象,建立水力模型,以电导法测定钢包内的混匀时间,讨论吹气位置、气体流量、径深比、气液密度比等对钢液混匀时间的影响,同时用数值模拟的方法对流场进行计算.结果表明,位置距炉底圆心2R/3处单孔吹气混匀时间最短,为最佳吹气位置;双孔吹气距中心R/2+R/2处,且沿直径对称分布时的混匀时间次之,结合钢包炉的电气特征分析,得出LF各操作阶段合理的吹氩流量.

喉全切除气管食管分路发音重建的防误咽术

目的 观察喉全切除气、食管分路发音重建防误咽术的效果。方法 1991年 10月～2 0 0 1年 5月对 79例T3、T4喉癌患者喉全切除术中行气、食管分路发音重建防误咽术 ,在食管前壁和气管后壁做一个长约 0 8～ 1 2cm发声口 ,同时保留环状软骨宽度 1 2cm ,长度 2 0cm做成软骨黏膜瓣防误咽檐 ,气管膜部向前外与皮肤缝合 ,做成防误咽斜度。结果 79例患者中有 71例患者获得良好发声 ,71例患者中有 6 5例防误咽成功 ,6例失败。 6 5例患者随访 1年以上 ,均无误呛。 79例患者术后T3、T4期 3年生存率分别是 6 6 7% (14 / 2 1)和 6 4 9% (2 4 / 37)。T3、T4期 5年生存率分别是 6 / 10和5 0 0 % (10 / 2 0 )。结论 气、食管分路发音重建防误咽术能有效地防止误咽。

结晶器电磁搅拌在小方坯连铸上的应用

简要介绍了结晶器电磁搅拌在福建三钢炼钢厂5#小方坯连铸机上的应用.理论分析并结合福建三钢的冶炼条件选择结晶器电磁搅拌,在长期的生产实践过程中对结晶器电磁搅拌参数进行优化,实践表明对减轻品种钢的碳偏析以及减少中心疏松和提高产品的低倍质量均有明显的效果.为进一步发挥电磁搅拌在冶金生产中的作用,提出有必要在现有的结晶器电磁搅拌的基础上增加末端电磁搅拌系统.

多分力矢量喷管试验台的开发设计和研究

为满足现代航空工业的需要 ,研究了一种发动机喷管试验台的设计问题 ,试验台使用六分量测力天平来测定矢量喷管的推力性能 ,并采用地轴单元校的方法计算天平的工作公式 .此天平系统结构简单 ,使用灵活 .本文研究可用于飞机发动机推力转向的矢量喷管试验台的可行性设计方案 .

免疫应激对不同品种猪氨基酸消化率的影响

通过注射大肠杆菌脂多糖(LPS)构建免疫应激模型,旨在探讨免疫应激对不同品种猪氨基酸消化率的影响。分别选用6头体重为32±3.6kg莱芜猪、鲁莱猪和大约克夏猪,采用2×3因子设计(免疫应激*品种类型),实施回肠末端T型瘘管手术。试验猪单栏饲养,术后经过14天适应期,进行氨基酸代谢试验。结果表明:在所测定的16种氨基酸中,除了半胱氨酸和组氨酸,免疫应激降低了不同品种猪的氨基酸的回肠表观消化率(P<0.01)(P<0.05);大约克猪对总氨基酸的回肠表观消化率的降低量高于鲁莱猪和莱芜猪(P<0.05)。

低速风洞旋转天平试验装置的设计

应用旋转天平使飞机模型在风洞里模拟飞机尾旋时的旋转运动 ,并测量出旋转模型上的气动力 ,从而对飞机的尾旋特性进行分析、预测 ,这是研究飞机尾旋特性的有效方法之一。较为详细地介绍了低速风洞旋转天平的工作原理及结构设计。