雏鸡源致病性奇异变形杆菌的鉴定与药敏试验

为了鉴定致雏鸡死亡病原菌,从无菌采集病死雏鸡肝脏组织中分离到1株病原菌。采用常规鉴定方法、16S rRNA PCR和致病性试验等方法,分离菌株被鉴定为致病性奇异变形杆菌。采用K-B药敏纸片法对分离菌株进行药敏试验,结果显示,分离菌株对头孢克肟、头孢曲松、环丙沙星、丁胺卡那霉素、林可霉素5种药物高度敏感;对其他药物有不同程度耐药性。

血清4型禽腺病毒Hexon-Penton串联蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

为了获得血清4型禽腺病毒(FAdV-4)六邻体蛋白(Hexon)和五邻体蛋白(Penton)的串联蛋白及其多克隆抗体血清,采用PCR方法从因FAdV-4致死的鸡肝脏中扩增出Hexon基因和Penton基因,使用重叠PCR将Hexon基因和Penton基因串联,得到Hexon-Penton(HP)串联基因,将HP基因导入表达载体pET32a(+),获得重组质粒pET32a-HP,将其转化表达菌株BL21经IPTG诱导表达,得到HP原核蛋白,经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,HP原核蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体血清。SDS-PAGE分析显示,HP原核蛋白分子质量约为108 ku,Western Blot结果显示,HP原核蛋白可与His标签抗体和多克隆抗体血清特异性识别,说明HP原核蛋白具有良好的免疫原性,为进一步建立FAdV-4的血清学检测方法奠定了基础。

禽腺病毒概述

禽腺病毒是一种对禽类危害极大的病原体,感染后发病快、病死率高,易造成混合感染,给禽养殖业造成了巨大的经济损失。研究病毒的致病机理对于禽腺病毒病的防控有重要意义,疫苗是目前防控该病毒病最好的方法。论文就禽腺病毒的分类、病原结构、致病机制和疫苗研制的研究进展进行综述,以期为禽腺病毒病的研究与防控提供参考。

1株雏鸡致病性肺炎克雷伯菌分离鉴定与系统进化发育分析

为了确定引起雏鸡死亡的病原菌,从发病致死的雏鸡体内分离1株病菌,采用细菌常规的分离鉴定、16S rRNA基因测序、致病性试验、K-B药敏纸片法等分别对分离菌株进行鉴定、致病性及耐药性检测。结果显示,分离株鉴定为致病性肺炎克雷伯菌;其16S rRNA基因序列与GenBank登录的12株肺炎克雷伯菌参考株同源性在98%~99%之间,与肺炎克雷伯菌参考株KP262416.1聚于一支,与KJ803938.1聚于一大支,且与2株参考株存在密切的遗传进化关系;该菌株对头孢曲松、头孢克肟、恩诺沙星等4种药物敏感;对环丙沙星、新霉素、丁胺卡那霉素等6种药物中敏;对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等6种药物耐药。

禽安卡拉病的研究现状

从禽安卡拉病的病原特征、流行病学、诊断方法和疫苗研制等方面对禽安卡拉病的研究现状进行了全面总结,就诊断与免疫预防存在的问题对将来主要的研究方向进行了展望。

23味中药对鸡白痢沙门菌地方株体外抑菌试验

为了研究23种中药对鸡白痢沙门菌地方株S1、S2及标准株的体外抑菌试验效果。方法:利用平板琼脂打孔法和试管二倍梯度稀释法分别测定抑菌圈直径大小、最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:鸡白痢沙门菌地方株S1、S2对黄芩、连翘、五倍子等8种药物极度敏感;对其他的药物存在不同程度的敏感性。本试验研究为鸡白痢沙门菌地方株中药防治提供理论基础。

貉源致病性沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验分析

为了确定引起幼貉急性死亡的病原菌,从送检的病死幼貉的肝脏中分离到1株病原菌。通过常规的鉴定方法和16S rRNA基因序列分析鉴定方法,分离菌株被鉴定为沙门氏菌。动物致病性试验表明,分离菌株具有很强的致病性。药敏试验结果表明:分离菌株对头孢曲松、头孢拉定、大观霉素、新霉素、替米考星等5种药物高度敏感;对其他药物存在不同程度的耐药。

貉源细小病毒和沙门氏杆菌混合感染的诊治

为了研究秦皇岛某养殖场母貉死亡的原因,笔者无菌采集死亡貉的心血、肝脏、肠内容物等病料组织,采用胶体金试纸条法、PCR法、细菌分离鉴定、K-B纸片法等分别检测细小病毒、病原菌感染情况及病原菌的耐药性。结果表明:死亡貉细小病毒阳性,病原菌为沙门氏杆菌;分离到的沙门氏杆菌对头孢曲松、头孢拉啶、环丙沙星等5种药物敏感,对其他药物存在不同的耐药性。说明貉源细小病毒和沙门氏杆菌混合感染是引起母貉死亡的主要原因。临床上对细小病毒无特效治疗药物,接种疫苗是预防该病的主要方法。

柔嫩艾美耳球虫河北株SOSO7基因克隆与序列分析

为分析柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)河北株SO7基因序列遗传变异性,试验根据GenBank发表的SO7序列设计引物,利用RT-PCR技术克隆出柔嫩艾美耳球虫河北株SO7基因,将SO7基因克隆入pMD18-T载体中,进行测序、序列分析及表达蛋白结构的预测。结果显示:柔嫩艾美耳球虫河北株SO7基因编码215个氨基酸,具有一个开放阅读框,大小为645 bp;与GenBank中发表的美国分离株(LS18)、扬州分离株(YZ)、海南分离株(HN)、广东分离株(GD)、北京分离株(BJ)SO7核苷酸序列的同源性分别为99.4%、99.5%、99.7%、99.5%、99.4%,所推导的氨基酸序列的同源性分别为98.6%、99.1%、99.1%、98.6%、98.1%。从进化关系来看,同种间SO7基因相比,柔嫩艾美耳球虫河北株与HN株同属一个分支,遗传关系较近;与GD株、BJ株的遗传关系相对较远。蛋白结构预测显示蛋白的相对分子质量为52.20 ku,理论等电点(PI)为5.08,不稳定系数为52.73,为不稳定蛋白;在1~20个氨基酸具有信号肽;有5个疏水位点;没有跨膜结构。综上所述,柔嫩艾美耳球虫河北株SO7基因序列遗传变异性不明显,可以作为构建核酸疫苗候选基因。

新城疫疫苗研究现状

新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的禽类的一种急性烈性传染病,严重危害养禽业的发展。在疫苗接种免疫压力下,NDV演化出不同的基因型,且各基因型毒株之间不能较好地提供交叉保护,导致临床上多见非典型新城疫与高抗体家禽发生NDV感染。目前,疫苗免疫仍是预防该病的重要措施,随着其病原学与分子生物学技术的发展,研究者研发了不同类型的ND疫苗。论文就新城疫病毒的病原分子特征、传统疫苗及新型基因工程疫苗的研究现状及发展前景进行综述,旨在为我国新城疫的防控及新城疫疫苗的研发提供一定的参考。

鸡球虫核酸疫苗的研究进展

从鸡球虫保护性抗原基因的种类、作用机理、免疫效果评价及影响因素等方面对鸡球虫核酸疫苗的研究进展进行了综述,以期为鸡球虫核酸疫苗的研发提供参考。

NDV基因Ⅶ型与基因Ⅱ型感染CEF后microRNA表达谱分析

本研究旨在探究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)流行株HB株(基因Ⅶ型)与疫苗株La Sota株(基因Ⅱ型)在感染鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblasts,CEF)36 h后宿主细胞microRNA(miRNA)表达谱变化情况。通过高通量测序技术分别对La Sota株与HB株感染CEF后36 h后的样本与参考鸡源基因组进行系统比对,筛选差异表达miRNA并对其靶基因进行GO功能注释以及KEGG通路富集。最后随机筛选5条miRNA通过实时荧光定量PCR(Real-time quantification PCR,RT-qPCR)进行验证。结果表明,La Sota与HB感染组中已知miRNA分别为56.9%和47.8%;La Sota与HB感染组通过差异性比较后共筛选出10条差异表达miRNA;通过对差异表达基因的靶基因进行GO与KEGG富集发现,其主要在细胞代谢、生物合成以及应激信号传导等通路上出现显著富集;RT-qPCR结果与RNA-seq结果趋势一致,证明了测序结果的可靠性。为进一步揭示不同NDV毒株感染CEF以及在感染过程中miRNA发挥的调控作用提供了研究基础。

肉鹅源沙门菌的分离鉴定与药敏试验

为确定引起肉鹅死亡的病原菌,从无菌采集的14日龄病死肉鹅肝脏、肠内容物等病料组织中分离到1株病原菌,采用培养特性鉴定、形态学观察、生化试验鉴定、16S rRNA PCR和人工感染雏鹅致病性试验等方法对分离到的病原菌进行鉴定。结果显示,分离菌株被鉴定为致病性沙门菌。药敏试验结果显示,分离菌株对头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、恩诺沙星等4种药物敏感,对环丙沙星、丁胺卡那、氟苯尼考等4种药物中敏,对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等8种药物耐药。

E. tenella河北株重组蛋白IL-2-AMA-1对雏鸡血清主要细胞因子和免疫器官指数的影响

为了确定E.tenella河北株AMA-1基因在毕赤酵母系统中表达产物-重组蛋白IL-2-AMA-1对鸡血清主要细胞因子和免疫器官指数的影响,将150只雏鸡分成5个组,每组30只,第1,第2组分别为阴性对照组和阳性对照组,第3,第4,第5组在7,14,21日龄时分别肌肉注射重组AMA-1蛋白50,100,150μg。在28日龄时,除阴性对照组外,每只鸡经口灌服0.5 mL孢子化卵囊液,其中E.tenella孢子化卵囊含量1.6×10^8个/L,在试验的第14,21,28,35天时每组采集5只鸡心血收集血清,测定其IL-2,IFN-γ的质量浓度。试验第28天时对采血的鸡只剖杀,取脾脏、胸腺、法氏囊进行称质量,并计算免疫器官指数。结果表明,第3组血清IL-2和IFN-γ含量最高,在试验的第21,28,35天时均显著高于第1第2组;在试验的第21,35天时血清IL-2的质量浓度,试验的第35天时血清IFN-γ的质量浓度,与第4组比较也达差异显著水平(P<0.05)。第3第4第5组的脾脏指数、胸腺指数和法氏囊指数均显著高于第2组(P<0.05),与第1组比较差异不显著(P>0.05)。由此表明,适量的重组蛋白IL-2-AMA-1能显著提高雏鸡感染球虫前后的免疫水平,从而提高抗球虫能力。

entB和entC基因缺失对肠炎沙门菌生物学特性影响的研究

为研究肠炎沙门菌肠杆菌素相关因子(entB)和异分支酸酶(entC)两个基因的作用,本研究利用λ-Red重组技术构建了肠炎沙门菌entC、entB单基因和双基因缺失菌株,在不同时间点检测菌液OD_(600nm)值并绘制生长曲线,利用ATB自动生化鉴定系统对其进行生化鉴定,并进行酸(pH3.5)、碱(pH10.0)、氧化应激(10 mmoL/L H2O2)体外模拟应激试验和小鼠的感染试验,分析基因entC和entB对肠炎沙门菌的影响。结果显示,通过同源重组技术,将氯霉素基因同源替换entC和entB基因,正确构建了单基因缺失菌株(c50336ΔentC和c50336ΔentB)及双基因缺失菌株(c50336ΔentC-entB);绘制的生长曲线结果显示,与c50336相比,单基因缺失株c50336ΔentC和c50336ΔentB生长延缓,双基因缺失株c50336ΔentC-entB生长延缓得更加明显;生化鉴定显示,基因entC和entB对肠炎沙门菌的部分生化特性有一定的影响;体外应激试验显示,双基因缺失菌株c50336ΔentC-entB显著降低肠炎沙门菌对酸、碱和氧化应激环境的抵御能力;动物感染试验结果显示双基因缺失菌株c50336ΔentC-entB对小鼠的毒力显著降低。本研究首次证实了entC和entB基因不同程度影响肠炎沙门菌的生长、抗应激能力和毒力,为深入研究entC和entB基因对肠炎沙门菌致病机制的影响奠定基础。

中医治疗鸡传染性喉气管炎

鸡传染性喉气管炎（也称热喉炎）是由传染性喉气管炎病毒引起的急性、传染性极强的一种上呼吸道感染性疾病。1流行特点传染性喉气管炎病毒属于疱疹病毒,刚刚出生的火鸡、雉鸡、孔雀等禽类较容易感染该疾病,而鸭、鸽和麻雀等哺乳动物对鸡传染性喉气管炎有较强的抵抗力。该病病毒主要经鼻部、咽喉、气管和眼睛等途径进入禽类体内致病。由于其主要伴随在呼吸道分泌物经过鼻部、咽喉排出体外.

企业项目收益债市场表现及未来展望

近年来,伴随地方政府专项债快速发展,企业项目收益债市场呈现诸多新特点、新变化。本文简要梳理了企业项目收益债的发展历程,总结了其政策要求及市场表现特点,然后提出了项目收益债信用风险的分析框架,最后对其发展趋势进行了展望。

中西医结合防治牛病

一、研究背景分析 随着时代的不断发展,牛的养殖数量越来越多,针对牛各种疾病的研究也丰富起来。牛是一种反刍兽,其消化系统和代谢系统与其他动物相比有一定的特殊性。首先是牛前三胃的构造,导致牛能够消化纤维比较粗的草料。所以牛的消化系统对于牛的体质有直接的影响。

鸡传染性鼻炎的诊治

鸡传染性鼻炎为呼吸道疾病中主要传染性疾病之一,鸡传染性鼻炎的感染率和死亡率均较高,尤其是在夏季是鸡传染性鼻炎高峰发生期,因此,本文针对鸡传染性鼻炎诊治进行综述。

夏季鸡传染性鼻炎的诊治

鸡传染性鼻炎为呼吸道疾病中主要传染性疾病之一,感染率和死亡率均较高,尤其是在夏季是其发生高峰期。主要介绍了鸡传染性鼻炎的病原、流行特点、临床症状、病理变化及诊断方法,并提出了防治措施。